pBR322与pUC质粒载体相比优点
(1)具有更小的分子量和更高的拷贝数如pUC8为2 750bp,pUCl8为2 686bp,控制质粒复制rop基因的缺失,平均每个细胞即可达500~700个拷贝(2)适用于组织化学法检测重组体通过a-互补作用,利用菌落颜色筛选重组子。(3)具有多克隆位点区段(MCS)可以定向克隆防止载体自我连接。......阅读全文
pUC18-和-pUC19质粒图谱
相关专题那些实验室常用的克隆载体pUC18 和 pUC19质粒图谱pUC18 和 pUC19 大小只有 2686bp ,是最常用的质粒载体,其结构组成紧凑,几乎不含多余的 DNA 片段,GenBank注册号为 L08752(pUC18)和 X02514(pUC19)。由 pBR322 改造而来,其中
pUC质粒载体结构
(1)来自于pBR322的Ori(2)氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生了变化(3) LacZ′基因编码β—半乳糖酶的α—肽链即氨基末端。(4)MCS区段是一段用于插入外源DNA片段的特定区域,由一系列的紧密相连的限制性内切酶位点组成,而且每个限制性内切酶位点在整个载体中是唯一的。
PUC管拉伸拉力试验机
一、PUC管拉伸拉力试验机技术参数:zui大试验力:5KN(500N,1KN,2KN,,3KN,5KN,10KN,30KN,50KN,100KN,200KN,500KN)负荷传感器容量:0.5T(5KN)(能加配1个或多个其他容量的负荷传感器)精度等级:0.5级试验力测量范围:0.4%~100%FS
PUC管拉伸试验机部分功能
一、PUC管拉伸试验机使用范围及技术说明1、适用范围 试验机为材料力学性能测量的试验设备,可进行金属线材与非金属、高分子材料等的拉伸、剥离、压缩、弯曲、剪切、顶破、戳穿、疲劳等项目的检测。可根据客户产品要求按GB、ISO、ASTM、JIS、EN等标准编制,能自动求取zui大试验力,断裂力,屈服力,抗
pBR322与-pUC质粒载体相比优点
(1)具有更小的分子量和更高的拷贝数如pUC8为2 750bp,pUCl8为2 686bp,控制质粒复制rop基因的缺失,平均每个细胞即可达500~700个拷贝(2)适用于组织化学法检测重组体通过a-互补作用,利用菌落颜色筛选重组子。(3)具有多克隆位点区段(MCS)可以定向克隆防止载体自我连接。
pUC119载体的基本信息和质粒图谱
pUC119载体载体基本信息载体名称pUC119载体抗性Ampicillin载体长度3162 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Vieira J, Messing J.拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpUC
pUC118载体的基本信息和质粒图谱
pUC118载体载体基本信息载体名称pUC118载体抗性Ampicillin载体长度3162 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Vieira J, Messing J.拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpUC
pUC18载体的基本信息和质粒图谱
pUC18载体载体基本信息载体名称pUC18载体抗性Ampicillin载体长度2686 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Yanisch-Perron C, Vieira J, Messing J.拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3&
pUC57载体的基本信息和质粒图谱
pUC57载体载体基本信息载体名称pUC57载体抗性Ampicillin载体长度2710 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源GenScript拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpUC57载体质粒图谱
pUC19载体的基本信息和质粒图谱
pUC19载体载体基本信息载体名称pUC19载体抗性Ampicillin载体长度2686 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源Yanisch-Perron C, Vieira J, Messing J.拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3&
pUC57Simple载体的基本信息和质粒图谱
pUC57-Simple载体载体基本信息载体名称pUC57-Simple载体抗性Ampicillin载体长度2710 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源GenScript拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpU
pUC57Kan载体的基本信息和质粒图谱
pUC57-Kan载体载体基本信息载体名称pUC57-Kan载体抗性Kanamycin载体长度2579 bp载体类型Basic Cloning Vectors载体来源GenScript拷贝数High copy number5'引物M13 fwd3'引物M13 revpUC57-Kan
外源DNA片段在质粒载体中的克隆实
实验方法原理 限制性内切酶可识别特定位点并切割DNA产生粘性末端或平端的外源片段,经DNA的纯化处理后用于连接反应;选择克隆载体pUC18多克隆位点上相应的限制性内切酶切割,并用碱性磷酸酶处理防止载体自连;在连接酶的作用下将外源片段连接到载体上,实现外源片段的克隆。实验材料 DNA片段PUC18试剂
DNA的酶切实验原理和操作步骤
一、实验目的 本实验学习、了解限制性内切酶的特性,学习根据具体目的设计适当的酶切体系并实施之。 二、实验原理 利用限制性内切酶切割DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一。成功的酶切为后续工作提供了有效的实验材料。限制性内切酶是细菌体内限制修
DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1
载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下
应用Daudi细胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探讨抗MHC-Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P对Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达的抑制作用. M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位.以pTK117质粒为模板,PCR扩增带有抗CⅡTA第452及629位点的引导序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),
应用Daudi细胞研究核糖核酸酶P的M1RNA介绍
探讨抗MHC-Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P对Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位.以pTK117质粒为模板,PCR扩增带有抗CⅡTA第452及629位点的引导序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分别插
应用Daudi细胞研究核糖核酸酶P的M1RNA
探讨抗MHC-Ⅱ类分子转录激活因子(CⅡTA)的核糖核酸酶P对Daudi细胞表面MHC-Ⅱ类分子表达的抑制作用.M1-RNA是核糖核酸酶P的催化活性单位.以pTK117质粒为模板,PCR扩增带有抗CⅡTA第452及629位点的引导序列的M1-RNA(M1-452-GS及M1-629-GS),再分别插
重组DNA的转化实验原理和操作步骤
实验目的制备出感受态细胞,把体外重组的DNA引入受体细胞,使受体菌具有新遗传性,并从中选择出转化子。实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态,只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。pUC18的LacZ基因区域当有DNA片段插入时,LacZ基因失活,转化进入大肠杆菌并在含有IPTG和
概述M13噬菌体的-构建
单链 DNA 的酶切和连接是比较困难的,因此 M13 噬菌体在用作载体时是利用其双链 RF DNA。RF DNA 很容易从感染细胞中纯化出来,可以象质粒一样进行操作,并可通过转化方法再次导入细胞。 (1)载体的插入位点 在 M13 噬菌体基因组中绝大多数为必需基因,只有两个间隔区可用来插入外
外源DNA片段在质粒载体中的克隆实验
克隆法 实验方法原理 限制性内切酶可识别特定位点并切割DNA产生粘性末端或平端的外源片段,经DNA的纯化处理后用于连接反应;选择克隆载体pUC18多克隆位点上
质粒载体对宿主生存并不是必需的
这点不同于线粒体,线粒体DNA也是环状双链分子,也有独立复制的调控,但线粒体的功能是细胞生存所必需的。线粒体是细胞的一部分,质粒也往往有其表型,其表现不是宿主生存所必需的,但也不妨碍宿主的生存。某些质粒携带的基因功能有利于宿主细胞的特定条件下生存,例如,细菌中许多天然的质粒带有抗药性基因,如编码
外源DNA片段在质粒载体中的克隆实验原理和步骤
DNA重组技术包括载体及外源DNA片段的酶切消化、目的片段的获得及纯化、目的片段与克隆载体的体外连接、重组子的筛选和鉴定等内容。DNA片段的克隆技术是分子操作的核心部分。 实验目的: 学习DNA的酶切、纯化及外源片段与载体的连接,将BAC克隆所携带的外源DNA酶切片段亚克隆到pUC18载体上
外源DNA片段在质粒载体中的克隆实验
NA重组技术包括载体及外源DNA片段的酶切消化、目的片段的获得及纯化、目的片段与克隆载体的体外连接、重组子的筛选和鉴定等内容。主要用于(1)外源性基因转染;(2)对外源性基因的转化分离。实验方法原理限制性内切酶可识别特定位点并切割DNA产生粘性末端或平端的外源片段,经DNA的纯化处理后用于连接反应;
DNA的酶切与连接
实验方法原理 限制性内切酶能够特异性地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异性位点上,并切割双链DNA。实验材料 标准pUC19(2686bp)试剂、试剂盒 EcoRI及其配套的酶切缓冲液 0.5×TBE电泳缓冲液 6×Loading Buffer Goldview 琼脂糖仪
DNA的酶切与连接
实验方法原理 限制性内切酶能够特异性地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异性位点上,并切割双链DNA。 实验材料 标准pUC19
BL21(DE3)表达的最佳条件是什么
E.coli Electro-CellsE.coli Electro-Cell JM109制品名 TaKaRa Code 包装量 价格(人民币元)E.coli Electro-Cell JM109 D9022 1 Set (50 μl×10支) 300■ GenotypeE.coli JM109re
质粒载体的基本特征
质粒(plasmid)是细菌或细胞染色质以外的,能自主复制的,与细菌或细胞共生的遗传成分。其特点如下:是染色质外的双链共价闭合环形DNA(covalently closed circular DNA,cccDNA),可自然形成超螺旋结构,不同质粒大小在2-300kb之间,15kb的大质粒则不易提取。
DNA的酶切与连接——质粒DNA酶切
DNA的连接和酶切可用于:(1)利用限制性核酸内切酶切割DNA和利用DNA连接酶连接DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一;(2)成功的酶切和有效的连接为后续的外源基因进入宿主细胞进行表达提供了有效的实验材料。实验方法原理限制性内切酶能够特异性地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附
大肠杆菌感受态细胞的制备与重组质粒转化
一、目的1.了解感受态细胞生理特性及制备条件,掌握大肠杆菌感受态细胞制备方法。2.掌握质粒DNA 转化大肠杆菌的方法,了解转化的条件和利用半乳糖苷酶基因插入失活选择重组质粒DNA 的原理。二、原理(一)大肠杆菌感受态细胞制备的原理所谓感受态,是指细菌生长过程中的某一阶段的培养物,只有某一生长阶段中的