检测自噬的方法有哪些

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:(一)自噬诱导剂1)bredeldina/thapsigargin/tunicamycin:模拟内质网应激2)carbamazepine/l-690,330/lithiumchloride(氯化锂):impase抑制剂(即inositolmonophosphatase,肌醇单磷酸酶)3)earle's平衡盐溶液:制造饥饿4)n-acetyl-d-sphingosine(c2-ceramide):classipi3kpathway抑制剂5)rapamycin:mtor抑制剂(最常用)6)xestosponginb/c:ip3r阻滞剂(二)自噬抑制剂1)3-methyladenine(3-ma):(classiiipi3k)hvps34抑制剂2)bafilomycina1:质子泵抑制剂3)hydroxychloroquine(羟氯喹......阅读全文

实验中常用的自噬检测方法(一)

在《 Hello~自噬 》一文中,我们曾给大家介绍过自噬。自噬在维持稳态和多种疾病中都起着重要作用。那么在实验中,如何检测自噬呢?自噬,简单来说就是细胞自己吃自己、废物再利用。细胞陷于困境时 (如营养物质匮乏),启动自噬程序自救,通过降解蛋白质和细胞器获得必需的氨基酸、脂肪酸等营养物质维持基本生命活

实验中常用的自噬检测方法(二)

(1) 氯喹   ( Chloroquine ,CQ) 处理,检测自噬流中 LC3B-II 变化在酸性溶酶体中,氯喹会使溶酶体 pH 值升高,使溶酶体中酸性水解酶失活 ,从而抑制细胞内自噬溶酶体的融合与降解。氯喹处理细胞会导致 LC3B-II 的聚集,此时观察到的 LC3B-II 的变化仅代表自

线粒体自噬时自噬小体会被dapi染成蓝色吗

自噬抑制剂氯喹使用自噬(autophagy)是由Ashford和Porter在1962年发现细胞内有“自己吃自己”的现象后提出的,是指从粗面内质网的无核糖体附着区脱落的双层膜包裹部分胞质和细胞内需降解的细胞器、蛋白质等成分形成自噬体(autophagosome),并与溶酶体融合形成自噬溶酶体,降解其

自噬体和自噬溶酶体有什么区别与联系

自噬溶酶体是因为细胞内发生了自噬现象,具体表现为LC3蛋白从I型转为II型,Atg5蛋白表达升高。自噬溶酶体的出现意味着细胞步入死亡。 溶酶体是一般真核细胞内具有的细胞器

溶酶体自噬与自溶的区别

溶酶体消化的主要功能。有消化底来源有三种:①自噬(自噬),细胞内原有的物质吞噬作用;有害物质②通过形成所提供的吞噬小体(吞噬体)吞噬作用; ③通过内吞作用(内吞作用)提供的营养素。因为吞噬作用和胞吞作用被从细胞中提供,在统称为异体吞噬(heterophagy)的物质这两种来源的转消化的物质被消化。后

细胞自噬研究策略

医学科研实验基础知识笔记(四):细胞自噬研究策略细胞自噬是指细胞在外界环境因素的影响下, 细胞利用溶酶体降解自身受损、 变性或衰老的大分子物质以及细胞器的自我消化过程。自噬是细胞的一种自我保护机制, 广泛存在于真核细胞内, 在调节细胞生存和死亡的过程中, 起着重要的作用。当细胞发生自噬后, 在自噬相

自噬激活Hippo通路

而最早关于Hippo通路与自噬关系的论文则是2014年发表于《JEM》的一篇论文。mTORC1信号是自噬途径主要的上游抑制通路,而在TSC1缺失的细胞中,mTORC1通路则维持组成型激活状态。该项研究的研究者发现,在TSC1缺失的细胞中,不仅自噬受到抑制, Hippo通路也受到显著抑制。机制研究发现

细胞自噬系统介绍

自噬是近年来很热门的领域,做一下系统的介绍或讨论,内容:1) 什么是自噬?包括自噬的定义、形态学特征、分子基础、调控等2)自噬的意义自噬与细胞存活、细胞死亡、疾病、衰老等的关系3)怎么研究自噬?主要谈谈怎么证明细胞发生了自噬,即自噬的判断标准和各种研究自噬的方法及局限性。一、自噬的过程——从一张图片

自噬溶酶体的作用

自噬性溶酶体是一种自体吞噬泡, 作用底物是内源性的,即细胞内的蜕变、破损的某些细胞器或局部细胞质。这种溶酶体广泛存在于正常的细胞内,在细胞内起“清道夫”作用,作为细胞内细胞器和其它结构自然减员和更新的正常途径。在组织细胞受到各种理化因素伤害时,自噬性溶酶体大量增加,因此对细胞的损伤起一种保护作用。自

什么是细胞自噬

自噬是指细胞分解细胞质等自身构成成分的现象。自噬作用是细胞加速新陈代谢,或者在饥饿时获得能量的一个重要手段。自噬在各种生命活动中发挥着重要作用,比如它可以加速细胞内的新陈代谢,或者在细胞处于饥饿状态时从分解产物中获得能量。自噬过程中,细胞需要一个特殊的“口袋”将有待分解的物质包围并隔离起来,这个叫做

什么是细胞自噬?

自噬(英语:Autophagy,或称自体吞噬)是一个涉及到细胞自身结构通过溶酶体机制,负责将受损的细胞器、错误折叠的蛋白及其他大分子物质等运送至溶酶体降解并再利用的进化保守过程。自噬是广泛存在于真核细胞的现象,并且可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬三大类。这是一个受到紧密调控的步骤,此步骤是细

自噬受体蛋白招募自噬起始相关ULK复合物分子机制

  Nat Comm  细胞自噬(Autophagy)是真核细胞中一种高度受调控的、溶酶体依赖的细胞代谢过程,对于维持细胞内稳态以及促进细胞的生长、发育和存活具有至关重要的作用。选择性自噬通过自噬受体蛋白来特异性地识别和降解特定的底物,包括蛋白聚集体、受损线粒体、外源性的入侵病原体等。选择性自噬在众

蠕虫自噬肠道致衰老

  在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示,消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖,但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设:人类和其他生物体随着年龄增长会分解,因为在它们年轻时使其受益的特征会变得有害。  时间给线虫带来了巨大伤害。和很多人一样,

分泌自噬的概念

中文名称分泌自噬英文名称crinophagy定  义在分泌肽类激素细胞中,溶酶体与一部分分泌颗粒融合,将其降解以清除过多激素的现象。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)

细胞自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有:一、自噬诱导剂(1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Chlor

蠕虫自噬肠道致衰老

  线虫需要卵黄产生卵。 图片来源:JAMES KING-HOLMES/SCIENCE SOURCE   在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示,消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖,但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设:人类和其他生物体随

请问细胞自噬是什么?

  自噬(autophagy)一词来自希腊单词auto-,意思是“自己的”,以及phagein,意思是“吃”。所以,细胞自噬的意思就是“吃掉自己”。  虽然人们早就知道自噬存在,但是只有在 大隅良典的精巧实验之后,人们才意识到它的机制、懂得了它的重要性。  细胞自噬是什么?  今年的诺贝尔生理学或医

自[体吞]噬的概念

中文名称自[体吞]噬英文名称autophagy定  义细胞自身一部分内容物被次级溶酶体消化的过程。消化产物可作为营养物再利用,或用于细胞分化中的细胞结构重建。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生理(二级学科)

自噬信号通路相关MYCN

这个基因是myc家族的一员,编码一个具有基本螺旋-环-螺旋(bhlh)结构域的蛋白质。这种蛋白位于细胞核内,必须与另一种bhlh蛋白二聚以结合DNA。这种基因的扩增与多种肿瘤有关,尤其是神经母细胞瘤。该基因有多种编码不同亚型的选择性剪接转录变体。This gene is a member of th

自噬信号通路研究背景

2016年诺贝尔生理学或医学奖的自噬是一种动态细胞循环系统,导致大量细胞质内容物的自噬溶酶体降解、异常蛋白质聚集以及过量或受损的细胞器。自噬诱导的关键调节因子是mTOR激酶,它激活了抑制自噬的mTOR(Akt和MAPK信号),而mTOR的负调节(AMPK和p53信号)促进了自噬。ULK与酵母Atg1

细胞自噬的研究方法

正常培养的细胞自噬活性很低,不适于观察,因此,必须对自噬进行人工干预和调节,经报道的工具药有: 一、自噬诱导剂  (1) Bredeldin A / Thapsigargin / Tunicamycin :模拟内质网应激(2) Carbamazepine/ L-690,330/ Lithium Ch

细胞自噬效应及过程

自噬效应的发生取决于自噬流过程是否完成,而自噬流的意思是自噬的完整动态过程,包括自噬体形成、自噬体与溶酶体融合及后续内含物的降解和回收。巨自噬与微自噬作用过程的对比命名为“自噬”(英语:Autophagy)是由比利时化学家克里斯汀·德·迪夫在1963年发现的。当代的自噬研究是1990年代酵母的研究人

自噬形态学过程

01吞噬泡的形成细胞在接受饥饿、某些激素等自噬诱导信号后,在被降解物附近形成脂质体样小的双层膜结构,然后不断向两边延伸,形成一个小的类似"脂质体"样的膜结构,不断扩张成为吞噬泡(Phagophore)。02自噬体的形成随着吞噬泡的不断延伸,将要被降解的胞浆成分,如:受损细胞器及营养成分包裹进膜内,然

细胞自噬研究详解(二)

4、自噬流检测方法细胞经自噬诱导或抑制后,需对自噬流的水平进行观察和检测,常用的技术手段见表1: 表1 自噬体计数及自噬流检测方法汇总(Mizushima et al, Cell, 2010)其中,电镜观察法由于受到实验条件和设备的限制应用范围有限;而由于自噬过程发生快速,通过IB/WB检测LC3-

Science解析自噬与肿瘤

  自噬可通过降解长寿命(long-lived)的蛋白、蛋白聚合物以及受损细胞器来调控细胞的稳态。它还可以通过限制炎症、清除有毒的未折叠蛋白,除去生成活性氧簇(可损害DNA)的受损线粒体来抑制肿瘤形成。失去这些保护性措施将促使癌症发生。随着一些研究发现编码重要自噬蛋白Beclin 1的基因在小鼠

蠕虫自噬肠道致衰老

  在土壤和研究人员的实验室中扭动的微小线虫以内脏为食——它们自己的内脏。一项最新研究显示,消化自身肠道的习惯能帮助其繁殖,但也加速了它们的衰老。这些结果支撑了一种非正统的假设:人类和其他生物体随着年龄增长会分解,因为在它们年轻时使其受益的特征会变得有害。 【《科学》相关文章】   时间给线虫带来

关于细胞自噬的简介

  细胞自噬(autophagy)一词来自希腊单词auto-,意思是“自己的”,以及phagein,意思是“吃”。所以,细胞自噬的意思就是“吃掉自己”。  细胞自噬(autophagy)是真核生物中进化保守的对细胞内物质进行周转的重要过程。该过程中一些损坏的蛋白或细胞器被双层膜结构的自噬小泡包裹后,

细胞自噬的功能作用

营养不足自噬在各种细胞功能中都发挥作用。营养不足会导致高水平的自噬,降解不需要的蛋白质,并且回收氨基酸,以合成对细胞生存至关重要的蛋白质。在高等真核生物中,自噬作用因动物在出生后切断了来自胎盘的食物供应而被响应。自噬能力降低的突变酵母细胞会在营养缺乏的情况下迅速消失。对APG突变体的研究表明,在饥饿

细胞自噬研究详解(一)

一、自噬简介1、大自噬(macroautophagy),也就是通常说的自噬(autophagy),是真核细胞蛋白降解的途径之一。自噬可以被描述为细胞质内的成分(细胞器、蛋白等)被双层膜的囊泡包裹,形成自噬体(autophagosome),进而传递到溶酶体进行降解的过程。详细来说,自噬过程与内涵体途径

自噬信号通路相关MTOR

雷帕霉素(mTOR)的哺乳动物靶标,也称为雷帕霉素和FK506结合蛋白12-雷帕霉素相关蛋白1(FRAP1)的机制靶标,是人类中由MTOR基因编码的激酶。 mTOR是蛋白激酶的磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶家族的成员。 mTOR与其他蛋白质结合,并作为两种不同蛋白质复合物的核心成分,mTOR复合物1和m