层析技术的分类

分类1. 按两相所处物理状态分类气相层析:气液层析(固定相为液体)和气固层析(固定相为固体),流动相为气体。液相层析:液液层析(固定相为液体)和液固层析(固定相为固体),流动相为液体。2. 按层析方式分类柱层析:固定相装于柱内,使样品沿着一个方向移动而分离。薄层层析:将适当粘度的固定相均匀铺在薄板上,点样后,用流动相展开。纸层析:用滤纸作液体的载体,点样后用流动相展开。3. 根据层析原理分类:常用分类法 (1)吸附层析:固定相是固体吸附剂,通过对不同溶质吸附力强弱不同进行分离。(2)分配层析:利用两相中的分配系数不同。分配系数:当一种溶质在两种给定的互不相溶的溶剂中分配时,在一定温度下达到平衡后,溶质在两相中的浓度比值为一常数,即分配系数(Kd)Kd=Ca / CbCa和Cb分别代表某一物质在互不相溶的两相,A相(动相)和B相(静相)中的浓度。(3)离子交换层析:固定相是离子交换剂,......阅读全文

层析技术的基本原理

层析须在两相系统间进行。一相是固定相,需支持物,是固体或液体。另一相为流动相,是液体或气体。当流动相流经固定相时,被分离物质在两相间的分配,由平衡状态到失去平衡到又恢复平衡,即不断经历吸附和解吸的过程。随着流动相不断向前流动,被分离物质间出现向前移动的速率差异,由开始的单一区带逐渐分离出许多区带,这

高效液相层析技术介绍

70年代新发展的层析法。其特点是:用高压输液泵,压强最高可达5000psi(相当于34个标准大气压)。用直径约3~10微米的超细支持物装填均匀的不锈钢柱。常用的支持物是在玻璃小珠上涂一层1~2微米的二氧化硅,经硫酰氯反应生成Si—Cl,进一步连接疏水的烷基,如Si—C18H37,或阳离子交换基团—S

层析技术(Layeranalise-technique)

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。(一)原理在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,

免疫层析技术原理和应用

  免疫层析检测技术是20世纪90年代出现的新兴免疫检测技术,其特点是应用抗原-抗体免疫学反应和层析反应,并以干片法试纸的形式,达到快速、准确地显色以检测待测物之目的。  在医用临床检测技术发展过程中,放射免疫方法是第一代,酶联免疫方法是第二代,而金标单克隆抗体快速检测试纸是正在发展的第三代。如今,

离子交换层析技术的应用介绍

离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

关于层析技术的基本信息介绍

  层析法是利用不同物质理化性质的差异而建立起来的技术。所有的层析系统都由两个相组成:一是固定相,另一是流动相。当待分离的混合物随流动相通过固定相时,由于各组分的理化性质存在差异,与两相发生相互作用(吸附、溶解、结合等)的能力不同,在两相中的分配(含量比)不同,且随流动相向前移动,各组分不断地在两相

免疫亲和层析技术的工作原理

亲和层析利用流动相和固定相内不同生物分子之间相互作用强度的差异来分离物质。通常,在开始亲和层析前需要预先进行全细胞提取物的粗制,例如细胞裂解液,生长培养基或血清。首先将固定相装入带有流动相的色谱柱中,其中含有某类特定的生物大分子(从DNA到蛋白质,取决于实验需求)。等待一段时间使两相充分混合,随后将

离子交换层析技术的应用介绍

离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

关于气相层析技术的特点介绍

  ①气体粘度小,气相与液相(固定相)间的质量传递率高,容易达到平衡,当使用高的气相流速时可缩短分离时间,分析常在几分钟到几十分钟内完成,使用长的层析管能提高分离效率;  ②检定气体中的组分比检定液体中的组分容易,已有许多简单与灵敏的仪器可以利用,并可设法使检定工作自动化,节省人力和时间,它也可与红

​-柱层析技术的上样方法介绍

上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴

免疫亲和层析技术的应用介绍

一种基于免疫层析测试(ICT)试纸的亲和层析测试。有别于普通临床检测,该试纸提供了快速的诊断手段。使用ICT,技术人员无需使用实验室,即可在患者的床边进行测定。 ICT检测对引起感染的微生物高度特异。

​-柱层析技术的装柱方法介绍

装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂

关于量子点免疫层析技术的简介

  量子点(QuantumDots,QDs)是一种半导体荧光纳米颗粒,直径通常在1-20nm之间,一般由II-VI或III-V族元素组成。与有机染料荧光标记材料相比,量子点具有斯托克斯位移大,激发光谱宽、发射光谱窄,荧光发射强度强而稳定,量子产率高,耐光漂白,成为分析检测领域研究的新热点。  白亚龙

柱层析技术的上样方法介绍

  上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶

层析技术(Layeranalise-technique)(1)

离子交换层析技术是以离子交换纤维素或以离子交换葡聚糖凝胶为固定相,以蛋白质等样品为移动相,分离和提纯蛋白质、核酸、酶、激素和多糖等的一项技术。 (一)原理 在纤维素与葡聚糖分子上结合有一定的离子基团,当结合阳离子基团时,可换出阴离子,则称为阴离子交换剂。如二乙氨乙基(Dicthy

层析技术(Layeranalise-technique)(3)

3.平衡 将DEAE―纤维素放入0.0lMol/L pH 7.4 PB液中(即起始缓冲液),静止1h,不时搅拌,待纤维素下沉后,倾去上清液或抽滤除去洗液,如此反复几次至倾出液体的pH值与加入的PB液的pH值相近时为止。4.装柱 层析柱的选择要大小、长度适当。一般而言,柱长和柱直径之比为10:1~20

层析技术(Layeranalise-technique)(2)

离子交换纤维素的优点为:①离子交换纤维素为开放性长链,具有较大的表面积,吸附容量最大;②离子基团少,排列稀疏,与蛋白质结合不太牢固,易于洗脱;③具有良好的稳定性,洗脱剂的选择范围广。 2.离子交换交联葡聚糖 离子交换交联葡聚糖也是广泛使用的离子交换剂,它与离子交换纤维素不同点是载体不同,常用交联葡聚

体外诊断之侧向层析技术

  侧向层析技术是20世纪90年代在单克隆抗体技术、胶体金免疫层析技术和新材料技术基础上发展起来的一项新型体外诊断技术,具有快速、简便、单人份检测、经济的优点,现已广泛应用于医学检测、食品质量监测、环境监测、农业和畜牧业、出入境检验检疫、法医定案等领域。  侧向层析技术以大孔径的微孔滤膜(NC膜、硝

关于分配层析技术的基本信息介绍

  各物质在两相中扩散速度不同,产生不同的分配系数。分配层析分离技术是利用各物质不同分配系数,使混合物随流动相通过固定相时而予以分离的方法。  分配系数是指一种溶质在两种互不相溶的溶剂中的溶解达到平衡时,该溶质在两相溶剂中所具浓度的比例。不同物质因其性质不同而有不同的比例,也就是有不同的分配系数。现

凝胶层析技术中的主体——层析柱

  凝胶是一类多孔性高分子聚合物,每个颗粒犹如一个筛子。当样品溶液通过凝胶柱时,相对分子质量较大的物质由于直径大于凝胶网孔而只能沿着凝胶颗粒间的空隙,随着溶剂流动,因此流程较短,向前移动速度快而首先流出层析柱;反之,相对分子质量较小的物质由于直径小于凝胶网孔,可自由地进出凝胶颗粒的网孔,在向下移动过

关于免疫层析技术的基本信息介绍

  免疫层析技术(ImmunochromatographicAssay,ICA)是20世纪末发展起来的结合免疫技术和色谱层析技术的一种分析方法,该方法具有特异性、操作简单、快速等特点,广泛应用于临床诊断、环境监测、食品安全等重要领域。传统免疫层析技术以胶体金为标记物,通过条带显色对目标物定性检测或半

关于亲和层析技术的相关内容

  1、名称简介  在生物分子中有些分子的特定结构部位能够同其他分子相互识别并结合,如 酶与 底物的识别结合、受体与配体的识别结合、 抗体与 抗原的识别结合,这种结合既是特异的,又是可逆的, 改变条件可以使这种结合解除。生物分子间的这种结合能力称为 亲和力。亲和层析就是根据这样的原理设计的 蛋白质

硅胶填料在层析技术中的原理是什么

  一.什么是硅胶:  硅胶是一种高活性吸附材料,属非晶态物质,其化学分子式为mSio2·nH20,,不溶于水和任何溶剂,无毒无味,化学性质稳定,除强碱、氢氟酸外不与任何物质发生反应,各种型号的硅胶因其制造方法不同而形成不同的微孔结构,硅胶的化学组份和物理结构,决定了它具有许多其他同类材料难以取代得

关于荧光素免疫荧光层析技术的简介

  荧光素是指具有荧光特性的有机染料。1942年Coons等首次报道了异氰酸荧光素标记抗体用于检测鼠组织切片中肺炎球菌抗原分布的研究,由此出了免疫荧光技术。后来,为了改进异氰酸荧光素的性能,Ruggas等合成了性质稳定、毒性较低的异硫氰酸荧光素。自Marshall等改良了荧光抗体标记技术后,荧光免疫

关于荧光免疫层析技术的基本信息介绍

  荧光免疫层析技术是基于抗原抗体特异性免疫反应的新型膜检测技术。该技术以固定有检测线(包被抗体或包被抗原)和质控线(抗抗体)的条状纤维层析材料为固定相,测试液为流动相,荧光标记抗体或抗原固定于连接垫,通过毛细管作用使待分析物在层析条上移动。对于带有多个抗原决定簇的大分子抗原(蛋白、病毒、致病菌等)

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(二)

  1.2 实验室规则    ⑴ 实验前必须认真预习实验内容,明确本次实验的目的和要求,掌握实验原理,写好实验预习报告,否则,不能进行实验。    ⑵ 实验时自觉遵守实验室纪律,保持室内安静,不大声说笑和喧哗。    ⑶ 实验过程中要听从教师指导,认真按照实验步骤和操作规程进行实验。若想改进和设计新

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(七)

3.3 离子交换层析3.3.1 简介离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(三)

3.1 层析技术概述3.1.1 引言层析法又称色层分析法或色谱法(Chromatography),它是在1903-1906年由俄国植物学家M. Tswett首先系统提出来的。他将叶绿素的石油醚溶液通过CaCO3管柱,并继续以石油醚淋洗,由于CaCO3对叶绿素中各种色素的吸附能力不同,色素被逐渐分

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(九)

3.4.3 亲和吸附剂选择并制备合适的亲和吸附剂是亲和层析的关键步骤之一。它包括基质和配体的选择、基质的活化、配体与基质的偶联等等。这里主要介绍一些基本的原理,关于活化、偶联等过程的具体实验操作可以参阅本书后面的实验部分或相应的参考书。基质⑴ 基质的性质基质构成固定相的骨架,亲和层析的基质应该具有以

生化实验讲义(理论部分)——层析技术(一)

  通过生物化学实验应该做到:    ⑴ 学习设计一个实验的基本思路,掌握各个实验的基本原理,学会严密地组织自己的实验,合理地安排实验步骤和时间。    ⑵ 训练实验的动手能力,学会熟练地使用各种生物化学实验仪器,包括各种天平、各种分光光度计、各种离心机、自动部分收集器、恒流泵、核酸蛋白检测仪、冰冻