凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原同
所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.......阅读全文
离子交换层析
离子交换层析利用含有能与周围介质进行离子交换的不稳定离子的不溶 性基质来分离分离物质。 1、离子交换基质Adams 和Holnes 有1935 年通过酚、甲醛和磺酸缩 聚成不溶性树脂，制成了第一个人工合成的离子交换材料。从此以后，人工 合成的离子交换树脂日见增多（多数是从芳香族化合物合成
病毒颗粒的等电位滴定曲线用于指导离子交换层...（一）
病毒颗粒的等电位滴定曲线用于指导离子交换层析工艺开发病毒颗粒的等电位滴定曲线用于指导离子交换层析工艺开发 S. Herzer1, P. Beckett 1 , T. Wegman 2, and P. Moore1 1Amersham Biosciences Corp, Piscataway, NJ
东曹（上海）生物科技有限公司正式成立
尊敬的客户： 首先衷心感谢您一直以来对东曹公司(Tosoh Corporation)产品的信任和支持! 随着东曹公司在中国的发展及业务需要，原东曹达(上海)贸易有限公司生命科学部于2010年7月1日正式宣布独立，成为具有独立法人资格的东曹(上海)生物科技有限公司。原东曹达(上海)贸易有
离子交换层析实验（四）
六、实例: 复杂蛋白质混合物的分离采用离子交换层析分离复合蛋白质混合物的一个典型例子就是从乳清中分离蛋白质。它可以进行一定程度的工业化放大，但也可作为一个廉价的检测体系用于离子交换剂的评价。实际上, 我们也已经通过这种蛋白质混合物来比较不同供应商所提供的离子交换剂的吸附能力（Hahnetal.，
关于层析分离法的基本介绍
层析分离法，简称层析法，亦称色谱层析法、色谱法、色层法。是利用样品中各组分的物理、化学性质的质的差别，使各组分以不同程度分布在两个相中，其中一个相为固定的（称为固定相），另一个相则流过此固定相（称为流动相）并使各组分以不同速度移动，从而达到分离的方法。层析法和其他分离方法比较，具有分离效率高，操
简述柱层析分离净化法的特点
柱层析法与其它分离方法相比较具有能耗低、 淋洗剂易于回收再利用和所得产品纯度高等优点，但也存在分离工艺复杂、 所耗时间长和所需溶剂量大的缺点，在实际生产中，很难工业化。因此，简化分离工艺、 缩短分离时间和提高溶剂利用率将成为今后改进柱层析分离法的重点。
关于层析分离法的历史介绍
1903年3月21日俄国植物学家茨维特（Michael Tswett，1872-1919）在华沙自然科学学会生物学会议上发表了“一种新型吸附现象及其在生化分析上的应用”研究论文，介绍了一种应用吸附原理分离植物色素的新方法，并首先认识到这种层析现象在分离分析方面有重大价值。1906年他在德国植物学
凝胶过滤层析过程中流速的大小有什么影响
凝胶层析操作中应注意的一些具体问题. (1)层析柱的选择 层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择.一般来讲,主要是层析柱的长度对分辨率影响较大,长的层析柱分辨率要比短的高；但层析柱长度不能过长,否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难.一般柱长度不超过100cm
分子筛（凝胶过滤层析）蛋白纯化系统的优缺点
那么下面上海嘉鹏科技有限公司为大家简单介绍一下关于分子筛（凝胶过滤层析）蛋白纯化系统的优缺点： 分子筛定义： 分子筛层析，又称为凝胶过滤层析或体积排阻层析。分子筛层析是利用有一定孔径范围的多孔凝胶作为固定相，对混合物中各组分按分子大小进行分离的层析技术。具有分子筛作用的物质很多，如浮石、琼脂、琼脂糖
影响凝胶过滤层析分辨率的主要因素
(1)层析柱的选择 层析柱大小主要是根据样品量的多少以及对分辨率的要求来进行选择。一般来讲，主要是层析柱的长度对分辨率影响较大，长的层析柱分辨率要比短的高；但层析柱长度不能过长，否则会引起柱子不均一、流速过慢等实验上的一些困难。一般柱长度不超过100cm，为得到高分辨率，可以将柱子串联使用。层
聚酰胺薄层层析分离技术
一、聚酰胺薄层层析分离原理： 用于薄层层析分离的聚酰胺基团有两类：锦纶66（尼龙）和锦纶6，这两类材料中都含有大量的酰胺基团，故统称为聚酰胺。聚酰胺以其－CO－或－NH－与极性化合物的－OH或＝O之间形成氢键，从而发生吸附作用。不同物质与聚酰胺之间形成氢键的能力不同。在聚酰胺薄膜上做层
生化分离技术－－柱层析分离
常说的过柱子应该叫柱层析分离，也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多，所以下面我就几年来过柱的体会写些心得，希望 能有所帮助。 柱子可以分为：加压，常压，减压。 压力可以增加淋洗剂的流动速度，减少产品收集的时间，但是会减低柱子的塔板数。所 以其他条件相同的时候
聚酰胺薄层层析分离技术
一、聚酰胺薄层层析分离原理：用于薄层层析分离的聚酰胺基团有两类：锦纶66（尼龙）和锦纶6，这两类材料中都含有大量的酰胺基团，故统称为聚酰胺。聚酰胺以其－CO－或－NH－与极性化合物的－OH或＝O之间形成氢键，从而发生吸附作用。不同物质与聚酰胺之间形成氢键的能力不同。在聚酰胺薄膜上做层析分离时，流动相
凝胶过滤层析常用介质有哪些及优点与用途
1.凝胶层析操作简便，所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。 2.分离效果较好，重复性高。最突出的是样品回收率高，接近100%。 3.分离条件缓和。凝胶骨架亲水，分离过程又不涉及化学键的变化，所以对分离物的活性没有不良
凝胶过滤层析法加样是应注意哪些问题
一般分为三个步骤：装柱、加样、洗脱淋洗。 装柱是需要注意的是：【1】垂直放置 【2】放置产生气泡 【3】放置柱分层 加样时，【1】加样前打开出口，使展开剂流出，至正好露出凝胶上平面时，立即关闭出口 【2】加样时，用滴管缓缓沿柱内壁加入柱子 【3】打开柱子得出口，使待分离的样品进入柱子
单克隆抗体的纯化技术操作步骤
从培养液或腹腔积液获得的单克隆抗体，不需要纯化即可应用于日常诊断或定性研究。如果用于免疫标记测定，须分离和纯化。可用半饱和、饱和硫酸铵进行沉淀，进行初步浓缩和纯化；可用亲和层析法进一步纯化。一、腹水型单抗的纯化在单抗纯化之前，一般均需对腹水进行预处理，目的是为了进一步除去细胞及其残渣、小颗粒物质、以
凝胶层析法分离蛋白质操作方法
本实验通过SephadexG50层析柱，以蒸馏水为洗脱剂，分离血红蛋白(红色，分子量约64500)与硫酸铜(蓝色，分子量249.5)的混合物，从颜色的不同可观察到血红蛋白洗脱快，硫酸铜洗脱较慢。 三．材料 1．仪器 层析柱(直径0.8-1.5cm，长10-20cm)；吸管；玻璃棒；小烧杯；2
离子交换层析可以用于哪些蛋白质的分离
离子交换层析是利用蛋白质在不同PH带不同种电荷的方法，利用离子交换的方法分离蛋白的。离子交换内的介质一般是树脂，阳离子交换型的，使用前树脂先用碱处理成钠型，将氨基酸混合液（pH=2-3)上柱，pH=2-3时，氨基酸主要以阳离子形式存在，与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上，再用洗脱剂洗脱。不同
葡聚糖凝胶色谱层析柱图结果怎么分析
1.凝胶的预处理交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒，使用前必须充分溶胀。方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5～10倍的去离子水中，参照相关资料中凝胶溶胀所需时间，进行充分浸泡，然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒，并减压抽气排除凝胶悬液中的气泡，准备装柱。在许多情况下，也可采用加热煮沸方法进行凝胶溶胀
葡聚糖凝胶色谱层析柱图结果怎么分析
1.凝胶的预处理交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒，使用前必须充分溶胀。方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5～10倍的去离子水中，参照相关资料中凝胶溶胀所需时间，进行充分浸泡，然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒，并减压抽气排除凝胶悬液中的气泡，准备装柱。在许多情况下，也可采用加热煮沸方法进行凝胶溶胀
葡聚糖凝胶色谱层析柱图结果怎么分析
1.凝胶的预处理交联葡聚糖凝胶的市售商品多为干燥颗粒，使用前必须充分溶胀。方法是将欲使用的干凝胶缓慢地倾倒入5～10倍的去离子水中，参照相关资料中凝胶溶胀所需时间，进行充分浸泡，然后用倾倒法除去表面悬浮的小颗粒，并减压抽气排除凝胶悬液中的气泡，准备装柱。在许多情况下，也可采用加热煮沸方法进行凝胶溶胀
离子交换层析实验——基本方案
离子交换层析（Ion Exchange Chromatography简称为IEC）是以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。实验材料蛋白质试剂、试剂盒离子交换缓冲液仪器、耗材离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤1.
常用的层析分析方法
在分离分析特别是蛋白质分离分析中，层析是相当重要、且相当常见的一种技术，其原理较为复杂，对人员的要求相对较高，这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是
关于分离纯化蛋白质的电泳操作的介绍
*SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，常用于蛋白质分子量的测定。 *等电聚焦电泳，通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。 *双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。 * 层析(chromatography)或色谱法：待分离蛋白质溶液（流动相）经过一个固态物质（固定相）时，根据待分离蛋白质的
柱层析原理及影响因素
免疫亲和层析 原理：亲和色谱分离蛋白以一个蛋白与特异性配基配对到色谱基质上，且蛋白质与配基间具有可逆的相互作用作为基础。目标蛋白与配基之间的生物学相互作用，可以是由于静电学的相互作用或是分子间疏水的相互作用，也可以是范德华力或氢键结合力产生的。 影响因素：主要是亲和标签的完整程度，缓冲液的组
免疫原的制备
一、 颗粒性抗原的制备 颗粒性抗原是指细胞抗原或细菌抗原。 二、 可溶性抗原的制备和纯化 （一） 组织和细胞抗原的粗制 1. 新鲜的组织或器官，经高速组织捣碎机研磨、酶消化、离心等手段，而获得单个细胞。 2. 组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备 （二） 离心分离抗原 差速离心法──低速与高速离心交替
亲脂凝胶层析的概念和原理
中文名称亲脂凝胶层析英文名称lipophilic gel chromatography定 义用于脂溶性物质分离的凝胶层析技术。如Sephadex LH20、LH60是用羟丙基取代交联葡聚糖羟基的凝胶，不仅能在水中溶胀，也可在多数有机溶剂中溶胀，可用做亲脂物质分离的分子筛。应用学科生物化学与分子生物
凝胶层析技术的原理和过程
凝胶层析（又叫凝胶过滤或分子筛）凝胶层析是指混和物随流动相流经固定相的层析柱时，混合物中各组分按其分子大小不同而被分类的技术。1. 原理凝胶层析的固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间多孔网状结构的物质，凝胶的每个颗粒内部都具有很多细微的小孔，如同筛子一样。常用凝胶有琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺
离子交换层析的预处理和装柱
对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒，以保证有较好的均匀度，对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理，使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理，使最终转为-OH-型或盐型交换剂；对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理，使最终
薄层色谱法的优缺点
(1)定义薄层色谱，或称薄层层析，薄层层析是把支持物均匀涂布于支持板(常用玻璃板，也可用涤纶布等)上形成薄层，然后用相应的溶剂进行展开。从而对混合样品进行分离、鉴定和定量的一种层析分离技术。 (2)分类薄层层析可根据作为固定相的的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、