色谱分离制备薄板时要注意什么

薄层板的制备是将吸附剂涂布在大小适当的戴板上,形成一定厚度的薄膜。制备一定规格的薄层板,是保证获得满意的分离效果及良好的Rf值重现性必不可少的条件。具体制备方法及有关问题分别讨论如下:(一)载板:戴板应对各种展开溶剂、化学显色试剂以及温度都具有稳定性,同时又应有一定的机械强度以便重复使用。常用的戴板中,以玻璃最好,一般玻璃只要表面平整光滑,厚度在2—4厘米,允差±0.1—0.2毫米即可。戴板大小无绝对规定,由斯塔尔推荐的标准规格为20×20厘米、20×10厘米。作为一般简单的快速薄层分离,也可用显微镜戴玻片作戴板。至于制备薄层色谱,所用戴板可达20×100厘米。戴板应非常干净,才能保证良好的粘着效果。故玻板应先用肥皂水洗净,再在重铬酸洗液内浸泡,然后清洗干净,最后用蒸馏水淋洗,晾干后备用。玻璃板的缺点是不易保存。其他材料的戴板中,最常用的为塑料板。塑料戴板制备薄层板操作复杂,因此多为成品薄层板出售。其优点为使用简便,缺点为高温下......阅读全文

色谱仪分离基本原理

色谱仪是利用外力使含有样品的流动相通过固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面,样品中各组分在两相中进行不同程度的作用,与固定相作用强的组分随流动相流出的速度慢,与固定相作用弱的组分随流动相流出的速度快。由于流出速度的差异,使样品中组分终形成各个单组分的“带”,对依次流出的各个单组分可分别进行

生物亲和色谱仪分离模式解析

生物亲和色谱仪是利用蛋白质或生物大分子等样品与固定相上生物活性配位体之间的特异亲和力进行分离的。一、固定相:将具有生物活性的配位体以共价键结合到不溶性固体基质上制得。二、生物活性配位体:1、酶:底物及其类似物。2、辅酶:类固醇等。3、抗体:植物激素等。4、激素:糖和多糖等。5、抗生素:核苷酸等。三、

如何提高气相色谱的分离度

提高分离度的方法有:1、适当的增加柱长可以提高分离度。2、减少样品的进样量(固体样品加大溶剂量降低浓度)。3、提高进样水平防止造成两次进样。4、降低载气的压力和流速。5、降低色谱柱的温度使其分离更好。6、提高汽化室的温度。7、减少气路系统的死体积,比如色谱柱连接要插到位,不分流进样应选择不分流结构的

高效液相色谱如何计算分离度

不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工

高效液相色谱仪的分离原理

使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外

色谱仪分离技术的共同特点

色谱仪分离技术的共同特点:1、色谱仪都存在有两个相,即流动相和固定相。流动相是气体或液体,固定相是固体或涂渍在固体表面上的高沸点液体。2、流动相对固定相作相对运动,携带样品通过固定相。3、被分离样品中的各组分与色谱两相间具有不同的作用力,这种作用力一般表现为吸附力和溶解能力。正是这种作用力的差异导致

高效液相色谱分离模式的选择

基于样品的一般性质选择分离模式的基本原则。

液液色谱法的分离原理

使用将特定的液态物质涂于担体表面,或化学键合于担体表面而形成的固定相,分离原理是根据被分离的组分在流动相和固定相中溶解度不同而分离。分离过程是一个分配平衡过程。涂布式固定相应具有良好的惰性;流动相必须预先用固定相饱和,以减少固定相从担体表面流失;温度的变化和不同批号流动相的区别常引起柱子的变化;另外

反相色谱法的分离机制

在反相色谱法中的固定相是被共价结合到硅胶载体上的直链饱和烷烃,其链的长短不同,最长的是十八烷基、这也是使用得最多的固定相、流动相的极性比固定相的极性强。在反相键合相色谱中,极性大的组分先流出、极性小的组分后流出。一般说来,固定相上的烷基配合基或被分离分子中非极性部分的表面积越大,或者流动相表面张力及

色谱仪分离的基础是什么?

色谱仪是基于固定相对样品中各组分的吸附或溶解能力的强弱进行分离的,这种吸附或溶解能力的强弱可以用分配系数定量。分配系数是在一定温度和压力下,样品组分在固定相和流动相之间的分配达到平衡时,其在固定相和流动相中的浓度之比。当样品组分被流动相带入色谱柱后,在固定相与流动相之间不断地进行分配平衡。分配系数小

色谱仪分离方法的选择原则

色谱仪分离方法的选择原则:一、根据相对分子质量选择:1、相对分子质量很低的样品采用气相色谱。2、液液分配色谱、液固吸附色谱和离子交换色谱最适合分析相对分子质量为200~2000的样品。3、相对分子质量大于2000的样品,采用凝胶色谱为最优。二、根据溶解度选择:1、溶于水并能离解的样品,采用离子交换色

液相色谱柱分离效果的好坏

 液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有zui优的分离效率。    液相色谱柱采用高纯硅胶为基质

高效液相色谱仪的分离原理

储液器中的流动相被高压泵打入检测系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入色谱柱(固定相)内,由于样本溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数,在两相中作相对运动时,经过反复多次的“吸附-解吸”的分配过程,各组分在移动速度上产生较大的差别,被分离成单个组分依次从柱内流出,通过检测器时,样本浓度被

尺寸排阻色谱仪分离原理

尺寸排阻色谱仪不是根据组分与两相的相互作用的不同进行分离,而是根据组分分子体积(流体力学体积)或分子大小进行分离。尺寸排阻色谱仪简称排阻色谱仪,又称凝胶色谱仪或分子筛色谱仪,主要用于溶解度、极性、吸附或离子特征无足够差异的高分子化合物的分离和合成聚合物分子量分布的测定。尺寸排阻色谱仪采用具有一定孔径

相色谱的分离基本原理

1.利用混合物中各组分在流动相和固定相中具有不同的溶解和解吸能力,或不同的吸附和脱附能力或其他亲和性能作用的差异。2.当两相作相对运动时样品各组分在两相中反复多次受到各种作用力的作用,从而使混合物中各组分获得分离。

柱色谱法分离条件的探索

柱色谱法分离条件的探索柱色谱法的实验条件,例如选用什么吸附剂和洗脱剂较好,各个组分按什么顺序从柱中洗脱出来,每一分洗脱液中是含单一组分或就含几种没有分开的组分等,都可以在薄层上进行探索和检验。薄层上所有的展开剂虽不完全照搬柱色谱法上,但仍有参考价值。

IC色谱分离柱的保养与再生

离子色谱(IC)是非常精密的分析仪器。通常,IC样品都需要前处理后,方可进样分析,不建议用户未经任何处理直接进样!分离柱(A Supp5 阴离子)部分维护注意pH范围3-12,浓酸、浓碱必须经处理后方可进样样品要事前过滤(0.45μm),流速

色谱仪分离的基础是什么

色谱仪分离的基础是什么色谱仪是基于固定相对样品中各组分的吸附或溶解能力的强弱进行分离的,这种吸附或溶解能力的强弱可以用分配系数定量。分配系数是在一定温度和压力下,样品组分在固定相和流动相之间的分配达到平衡时,其在固定相和流动相中的浓度之比。当样品组分被流动相带入色谱柱后,在固定相与流动相之间不断地进

吸附色谱的分离效果的因素介绍

吸附色谱的分离效果,决定于吸附剂、溶剂和被分离化合物的性质这三个因素。(1)吸附剂凡能够将其他物质聚集到自己表面上的物质,都称为吸附剂。能聚集于吸附剂表面的物质称为被吸附物。在吸附色谱中应用的吸附剂一般为固体。常用的吸附剂有硅胶、氧化铝、活性炭、硅酸镁、聚酰胺、硅藻土等。①硅胶色谱用硅胶为一多孔性物

液相色谱仪组成之分离柱

 担负分离作用的色谱柱是液相色谱仪的心脏,柱效高、选择性好、分析速度快是对色谱柱的一般要求。商品化HPLC微粒填料,粒度通常为3µm、5µm、7µm及10µm。超高压液相色谱中采用的固定相粒度甚至可以小到1µm,而制备色谱所采用的固定相粒度通常大于10µm。   填充HPLC柱柱效的理论值可达到每米

高效液相色谱如何计算分离度

不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工

生物样品分离技术柱色谱法

用能吸附蛋白质的材料装填成小柱,使欲除蛋白质的样品流过小柱,样品中的蛋白质被柱填料吸附,欲测组分不被吸附,从小柱中流出。现已有厂家将这种小柱做成商品出售,称为预柱。这种预柱可以直接连在HPLC的进样装置上,含蛋白质的样品通过预柱后可直接进入HPLC系统分析。如分析尿中的某些代谢产物时,可将样品通过预

制备色谱分离纯化之流动相选择

制备色谱的目的,是从混合物中得到高纯单组份,和分析色谱不同,在选用流动相时,还要考虑后续溶剂去除等分离操作(旋蒸、冻干等方法)。一般来说,不宜采用高毒性溶剂,对多元溶剂要尽可能的少用,另溶剂的纯度也要考虑在其中。这里小编介绍下制备色谱做分离纯化的流动相选择。 一般常用的正相,反相流动相  制备色谱纯

色谱的分离度什么因素会影响

又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比.  resolution,R  相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率,表示相邻两峰的分离程度。R越大,表明相邻两组分分离越好。一般说

什么是色谱分离中次级保留效应

  在良好的色谱分离中,样品分子是以单一的保留过程被保留,如在反相色谱中,溶质与柱填料的非极性烷基链发生疏水性相互作用,但,在以硅胶为基质的填料中,有些样品组分能与硅醇基团相互作用,脱附的过程很慢,使峰严重拖尾,这就是次保留过程。对付次保留效应最有效的方法就是选用封尾更好色谱柱或加入流动相改良剂(也

高效液相色谱仪的分离系统

高效液相色谱仪的分离系统由色谱柱、色谱柱的连接部件、柱恒温装置和固定相等组成。一、色谱柱:高效液相色谱仪的色谱柱一般用内部抛光的不锈钢制成,柱内径为 1~4 mm,柱长为 10~50 cm,柱形多为直形,内部充满微粒固定相。近年来,由于高性能填充剂的细粒化,3~5um 微粒填料的使用,趋向柱内径为

色谱法按分离原理生化检验

色谱法按分离原理:吸附色谱法:利用吸附剂表面对不同组分物理吸附性能的差别而使之分离的色谱法称为吸附色谱法。适于分离不同种类的化合物(例如,分离醇类与芳香烃)。分配色谱法:利用固定液对不同组分分配性能的差别而使之分离的色谱法称为分配色谱法。离子交换色谱法:利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液

高效液相色谱如何计算分离度

不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工

高效液相色谱如何计算分离度

分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工作站都会自动给出,你可以向以前做过的人咨询一下应该怎么设置。分离度又称分辨率,为了判断

高效液相色谱如何计算分离度

不是很明白楼主的意思,你的意思是进了5针吗?每个都给出保留时间还是一张图上有5个峰呢?分离度是计算临近2峰的,单个峰是没有办法说分没分开的问题的。如果是5张图上的话,每张图都要算对照和临近峰之间的分离度,而且尽量重复性高。要是是一张图上的5个峰的话就要算对照品临近两峰之间的分离度了。一般的液相色谱工