DNA跑胶具体步骤
制胶、设置电泳系统(缓冲液、电源、电泳槽等)、DNA样品准备(DNA及DNA Marker+上样缓冲液)、加样、电泳、染色、UV检测分析等。......阅读全文
WB跑胶后没有条带是什么原因
提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多,你可以减少到200-300ul试试,提取蛋白后做个BCA蛋白定量,在做后续的考蓝染色,确定蛋白没有问题再电泳转膜
PCR纯化,跑胶没有出现条带,是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回收看不到,那么,跑胶用的TAE/TBE是不是1X的,你点胶的时候PCR
PCR纯化,跑胶没有出现条带,是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回收看不到,那么,跑胶用的TAE/TBE是不是1X的,你点胶的时候PCR
RNA电泳跑胶为什么没有5S条带
生物体内一般含有核糖体rna(rrna)、信使rna(mrna)、转运rna(trna)三种主要的rna,其中rrna含量最多,提取组织总rna所得最多的就是rrna。真核生物中含有5s、5.8s、18s、28s,原核生物中有5s、16s、23s;而植物组织中一般较多的为5s、18s、28ss代表沉
PCR纯化,跑胶没有出现条带,是什么原因
你要确定你PCR有没有扩增出条带,先用检测胶点了看一下。如果检测胶可以看到条带,回收胶看不到的话,可能是你PCR的产物的量太少了,回收胶胶孔宽,PCR结果不好的条带可能就看不到了。如果你确定你的PCR的产物是有的,明亮的,但是跑回收看不到,那么,1.跑胶用的TAE/TBE是不是1X的,你点胶的时候P
DNA胶回收实验技术总结
胶回收一. 提高胶回收量的办法:1) 增加电泳时的上样量。2) 电泳缓冲液用新鲜配制的。3) 切胶时尽量只切有条带的胶,减小切胶体积:含目的片断很少的胶就不要要了,不然影响回收率。4) 把切的两块或多块胶融化后,无论多大的体积都用一个管子,转移到同一个柱子上。5) 溶胶时所加的溶液可多一点,这样更有
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和du小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和du小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他
提取total-RNA-跑胶为什么只有3条带
三条是主带哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他两种RNA的分子量比较小,这就解释了为什么
请问PCR后的酶切跑胶的原理和目的
回收纯化得到目的条带,以用于下游的实验。
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和du小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他
实时荧光定量PCR跑胶与普通PCR有区别吗
Real time PCR一般是不用跑胶的,普通PCR一般都需要通过跑胶来确定结果。但有时候Real time PCR完成后有些人为了更确定实验结果也会跑一下。 如果说区别的话,对于同一个基因来说Real time PCR为了提高扩增效率(往往循环数比较多),设计的引物都只能扩增出较小的片段,而同一
提取的总RNA跑胶从大到小有几条带
提取的总RNA跑胶从大到小有带3条。三条是主带。哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和du小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5.8s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他
DNA电泳跑不出条带啊!!什么原因
首先确定你得pcr体系有没有问题,比如酶或者buffer,dNTP,还有模板,如果你之前能p出来,基本引物和反应条件不会有什么问题,我建议你用实验室里别人的东西重复一下,,个人认为是模板或者酶的问题比较大
DNA电泳(agarose胶)操作方法
一、 试剂与材料:1、 琼脂糖2、 电泳缓冲液(1×TAE)3、 10mg/ml溴化乙锭4、 上样缓冲液5、 电泳仪和水平电泳漕6、 透射紫外灯7、 胶带纸 二、 操作方法 按1~2%的琼脂糖浓度(据DNA样品分子量不同而定)配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌,至琼脂糖完全溶解
western-blot-跑胶时无法压成一条线
先看一下你的Mark 的条带是不是正常的,那就应该是你的制样有问题的,样品的盐浓度是不是太高了,样品是不是没有煮到位,如果mark都不正常,那就要考虑你的体系有没有问题,电极缓冲液的pH要一次到位,不能要HCl什么的调,否则条带扩散,SDS的量是不是对的,丙烯酰胺和甲叉丙烯酰胺有没有过期(胶凝了也跑
提取的总RNA跑胶为什么只有3条带
三条是主带哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他两种RNA的分子量比较小,这就解释了为什么从凝
提取的总RNA跑胶为什么只有3条带
三条是主带哺乳动物的RNA包括mRNA,rRNA,tRNA和小RNA,根据分子量和沉降系数的不同,rRNA又可分为28s, 18s 和5s 的rRNA。从RNA的含量上看,rRNA是几种RNA中最多的,高达90%以上,而mRNA很少,只有1-2%,而其他两种RNA的分子量比较小,这就解释了为什么从凝
PCR产物跑胶什么条带都没有是怎么回事
做PCR时,最抑闷的一件事就是花了三个多小时,一点儿结果都没有。以前做的时候,我也遇到这增的问题!所有的反应液和底物加好了,机器设好了,跑吧,跑完PCR了,好的,再来跑电泳检测,结果,白花花一大片,什么都没有,那一刻,觉得自己好失败,别人的什么有,自己的什么都见不到,真想把机器给砸了。 后来不
western-blot-跑胶的条带扩散混一起怎么回事
western blot 跑胶的条带扩散混一起原因很多但是可以肯定的是和SDS-PAGE的胶或者样品有关系具体来说,可能是蛋白上样体积太大,加样时溢出,可以减少上样量或者用更厚的胶或者是浓缩胶和分离胶之间有缝隙总之要检查SDS-PAGE的过程,就可以解决western blot跑胶的条带扩散混一起的
western-blot-跑胶的条带扩散混一起怎么回事
western blot 跑胶的条带扩散混一起原因很多但是可以肯定的是和SDS-PAGE的胶或者样品有关系具体来说,可能是蛋白上样体积太大,加样时溢出,可以减少上样量或者用更厚的胶或者是浓缩胶和分离胶之间有缝隙 总之要检查SDS-PAGE的过程,就可以解决western blot跑胶的条带扩散混一起
在做western-blot时,跑胶的电流为什么越来越低
泡胶是电路是电泳槽小槽里的溶液,离子会经过胶渐渐进去下层,电路中离子减少,电阻增大,恒压的话就会电流降低。转膜时离子一直在,可能是温度的问题吧
在做western-blot时,跑胶的电流为什么越来越低?
泡胶是电路是电泳槽小槽里的溶液,离子会经过胶渐渐进去下层,电路中离子减少,电阻增大,恒压的话就会电流降低。转膜时离子一直在,可能是温度的问题。
蛋白质电泳所加样品在浓缩胶中跑的不成一条直线
首先得确认你配置胶的浓度以及配胶的试剂没问题,如果浓度没问题的话,应该是胶板下面(原先圈着的胶条位置)存有气泡没有赶跑,把气泡用吸管赶走后就OK了之前我也碰到过类似情况
“胶类中药源性DNA分子鉴定实验室”成立
据山东广播电视台新闻中心《山东新闻联播》报道,国内首个“胶类中药源性DNA分子鉴定实验室”今天在省农科院揭牌成立,依托DNA测序,动物源性分子鉴定和动物疾病疫病快速检测技术,首次应用到传统的阿胶生产工艺中,做到每一张驴皮都能鉴别,每一块阿胶都可追溯。
DNA片段的胶回收方法和注意事项
DNA片段的胶回收方法电泳洗脱法低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法冻融回收法玻璃奶回收法柱回收法胶回收注意事项将电泳槽用ddH2O反复清洗干净,倒入新鲜配制的灭菌电泳缓冲液;根据点样量制备合适厚度的琼脂糖凝胶板;切胶时尽可能切掉不含DNA片段的凝胶;要尽量减少DNA在紫外下的照射时间以减少对DNA的损伤;熔
DNA片段的胶回收方法和注意事项
DNA片段的胶回收方法电泳洗脱法低熔点琼脂糖凝胶电泳挖块法冻融回收法玻璃奶回收法柱回收法胶回收注意事项将电泳槽用ddH2O反复清洗干净,倒入新鲜配制的灭菌电泳缓冲液;根据点样量制备合适厚度的琼脂糖凝胶板;切胶时尽可能切掉不含DNA片段的凝胶;要尽量减少DNA在紫外下的照射时间以减少对DNA的损伤;熔
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,
琼脂糖凝胶电泳跑的DNA为什么会拖尾
由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶;减少dNTP的浓度;适当降低Mg2+浓度;增加模板量,减少引物的用量,减少循环次数,提高退火温度。琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,