DNA电泳(agarose胶)操作方法
一、 试剂与材料:1、 琼脂糖2、 电泳缓冲液(1×TAE)3、 10mg/ml溴化乙锭4、 上样缓冲液5、 电泳仪和水平电泳漕6、 透射紫外灯7、 胶带纸 二、 操作方法 按1~2%的琼脂糖浓度(据DNA样品分子量不同而定)配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌,至琼脂糖完全溶解 ↓ 温度降至大约 50℃时(勿忘记加入溴化乙锭),立即倒入靠近一端梳子的电泳槽 ↓ 待凝胶完全溶解后,小心拔去梳子 ↓ 倒入 1×TAE,少许超出胶面(如超出太多,电阻太大),使缓冲液进入凝胶孔 ↓ 用微量移液器将DNA样品依次加入加样孔内(勿忘记加入 marker) ↓ 盖上电泳槽并通电,50~100V恒压电泳,使DNA向阳极方向移动 ↓ 紫外成像仪上成像......阅读全文
DNA电泳(agarose胶)操作方法
一、 试剂与材料:1、 琼脂糖2、 电泳缓冲液(1×TAE)3、 10mg/ml溴化乙锭4、 上样缓冲液5、 电泳仪和水平电泳漕6、 透射紫外灯7、 胶带纸 二、 操作方法 按1~2%的琼脂糖浓度(据DNA样品分子量不同而定)配胶100ml ↓ 置于微波炉内加热搅拌,至琼脂糖完全溶解
DNA电泳(agarose胶)
实验材料 DNA样品试剂、试剂盒 琼脂糖 电泳缓冲液溴化乙锭 上样缓冲液仪器、耗材 电泳仪电泳漕 透射紫外灯 胶带纸 紫外成像仪
DNA电泳(agarose胶)
DNA电泳可用于:(1)分离不同大小的DNA片段;(2)鉴定目的DNA片段;(3)纯化和回收DNA片段。实验方法原理利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场中向正极移动,且相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷,能以
DNA电泳(agarose胶)
DNA琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 利用DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时具有的电荷效应和分子筛效应。电荷效应是指DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电,在电场
DNA凝胶电泳(DNA-agarose-gel-electrophoresis)
实验原理琼脂糖凝胶电泳是常用的用于分离、鉴定DNA、RNA分子混合物的方法,这种电泳方法以琼脂凝胶作为支持物,利用DNA分子在泳动时的电荷效应和分子筛效应,达到分离混合物的目的。DNA分子在高于其等电点的溶液中带负电,在电场中向阳极移动。在一定的电场强度下,DNA分子的迁移速度取决于分子筛效应,即分
ELECTROPHORESIS-OF-DNA-IN-AGAROSE-GELS
ELECTROPHORESIS OF DNA IN AGAROSE GELSA). AGAROSE CONCENTRATIONS: Use 0.8% agarose (w/v) for high molecular weight DNA fragments, and 1 - 1.2% f
Agarose-Gel-Electrophoresis-of-DNA
1) Dissolve 1 g of agarose in 100 ml of 1X TAE or TBE buffer (gives a 1% gel). See note for making LMP agarose gel. 2) Cast the gel with the comb in p
DNA琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)分析
一、原理琼脂糖凝胶具有分子筛效应。在中性ppH值的电泳缓冲液体系中,DNA分子由于带负电荷,所以在电场作用下由负极向正极泳动。由于DNA分子的大小和构型不同,在相同的时间内迁移至不同的位置。凝胶经溴化乙锭染色后,紫外检测仪下观察,即可看见DNA片段按大小不同呈条带分布。由于在一定条件下,DNA的迁移
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)检测DNA
原理: 琼脂糖是从海藻中提取出来的一种线状高聚物,可作为电泳支持物,适用于分离大小范围在0.2-50kb的DNA片段。DNA分子的迁移率与分子量的对数值成反比关系。观察其迁移距离,与标准DNA片段进行对照,就可获知该样品分子量大小。在质粒抽提过程中,由于各种因素的影响,使质粒DNA呈现超螺旋的共
DNA片段的琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)
【原 理】琼脂糖凝胶电泳是重组DNA研究中常用的技术,可用于分离,鉴定和纯化DNA片段。不同大小、不同形状和不同构象的DNA分子在相同的电泳条件下(如凝胶浓度、电流、电压、缓冲液等),有不同的迁移率,所以可通过电泳使其分离。凝胶中的DNA可与荧光染料溴化乙锭(EB)结合,在紫外灯下可看到荧光条带,籍
质粒DNA的琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)
带电荷的物质在电场中的趋向运动称为电泳。电泳的种类多,应用非常广泛,它已成为分子生物学技术中分离生物大分子的重要手段。琼脂糖凝胶电泳由于其操作简单、快速、灵敏等优点,已成为分离和鉴定核酸的常用方法。实验目的:掌握琼脂糖凝胶电泳的原理,学习琼脂糖凝胶电泳的操作。实验材料:质粒DNA、BAC、植物总DN
Preparation-of-Agarose-Gels-for-DNA-separations
Weigh out the desired amount of agarose and place in an Erlenmeyer flask with a measured amount of electrophoresis buffer, e.g. for an 0.8% gel, add 0
Agarose-Gels-for-Single-Stranded-DNA
1. Prepare 50X TAE as:242 g Tris Base57.1 mL Glacial Acetic Acid100 mL 500 mM EDTA, pH 8.0600 mL ddH2OMix. Bring volume to 1 L. Autoclave.2. Mix the f
DNA-Purification-from-Agarose-Gels
1. Separate DNA fragments in an agarose gel cast with 0.5 mg/mL Ethidium bromide. Locate bands with a hand-held long-wave UV lamp.2. Slice the gel wit
电泳时的DNA分子量Marker和Agarose浓度的选择
电泳时的DNA分子量Marker和Agarose浓度的选择DNA片段长度Agarose浓度 使用Marker种类200 bp以下3%以上 фX174-Hae Ⅲ digest DNA Marker фX174-Hinc Ⅱ digest DNA Marker DL500™DNA Marker
Preparation-of-Yeast-DNA-Embedded-in-Agarose-Plugs
Preparation of Yeast DNA Embedded in Agarose PlugsAnja van Brabant(adapted from Iadonato, S. P., and A. Gnirke. 1996. RARE-cleavage analysis of YACs.
大片段DNA测序(>50KB)
大片段DNA的测序: 通过鸟枪法 (Shot Gun Sequencing) 测序 鸟枪法测序的操作方法1. 用限制酶切下目的片段的大片段Insert DNA, 并用Agarose凝胶电泳进行回收。2. 对回收的大片段DNA用物理方法 (如超声波等) 进行切断处理,然后用T4 DNA Polymer
QUALITATIVE-ANALYSIS-OF-DNA-FRAGMENTATION-BY-AGAROSE-GEL-ELECTROPHORESIS
1. IntroductionNuclear morphology changes characteristic of apoptosis appear within the cell together with a distinctive biochemical event: the endonu
琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的
染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBRgreen也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发光下发射荧光,荧光强度与DNA含
琼脂糖凝胶电泳,做胶加EB目的
在搜搜上找的同一问题的答案:“染色啊。你agarose胶电泳跑DNA,根据大小不同电泳速度不同,可是最后你需要看啊,怎么看呢?可见光下看不见DNA的。所以加EB也好,SYBR green也好,我们实验室用的genefinder也好,都是将DNA染色,用特殊的化学分子与DNA结合,并且在特殊波长的激发
dna胶怎么配
就是琼脂糖凝胶,要是分子量大的DNA就配1%的胶,就是取1g琼脂糖+100ml的TAE缓冲液,微波炉高火加热至沸腾(沸腾2-3次),降温到50℃左右时加入EB,混匀后倒入制胶架中,一小时以后就可以使用了。琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂
QUALITATIVE-ANALYSIS-OF-DNA-FRAGMENTATION-BY-AGAROSE-GEL-ELECTROPHORESIS2
3. Commentary 3.1. Background informationApoptosis is an innate mechanism of eukariotic cell suicide which plays a major role in many physiological
琼脂糖凝胶配方
琼脂糖凝胶是以琼脂糖为支持介质制备的凝胶。琼脂糖分为一般琼脂糖和经化学修饰后熔点降低的低熔点琼脂 糖,琼脂糖的熔点在62〜65°C之间,融化后在37°C下可维持液态数小时,30°C时凝固成胶。多用于对染色体DNA在凝胶内进行原位酶切及DNA片段回收。琼脂糖凝胶 由于孔径大常用于大分子蛋白质、DNA的
甲醛洋菜胶体电泳(formaldehydeagarose-gel-electrophoresis)
甲醛洋菜胶体电泳 (formaldehyde-agarose gel electrophoresis)甲醛是一种常用的RNA 变性剂。在进行甲醛洋菜胶体电泳分析时,必须先配制含有甲醛的洋菜胶体,RNA 也必须先以甲醛及formamide 进行变性处理,以确保其二度结构充分被打开。由于甲醛可能
琼脂糖凝胶电泳(agarose-gel-electrophoresis)介绍
主要试剂:核酸电泳缓冲液有三种,即Tris-硼酸(TBE)、Tris-乙酸(TAE)和Tris-磷酸(TPE).TBE与TPE缓冲容量高,DNA分离效果好,但TPE在DNA段回收时含磷酸盐浓度高,容易使DNA沉淀.TAE缓冲容量低,但价格较便宜,因而推荐选用TBE.缓冲液中的EDTA可螯合二价阳离子
RNA甲醛变性胶电泳
提取样品的总RNA后,一般根据RNA的凝胶电泳图来判断RNA的质量。由于RNA容易形成二级结构,因此常用甲醛变性胶来进行RNA电泳,得到的电泳图能真实反映RNA的质量状况。一、试剂:DEPC(Sigma公司产品),MOPs(Bocherigmer公司产品),甲酰胺(Formamide,Sigma公司
非变性胶蛋白电泳
Section 2.1Nondenaturing Polyacrylamide Gel Electrophoresis of ProteinsJohn M. Walker1. IntroductionSDS-PAGE (Section 2.2) is probably the most commo
电泳胶浓度的选择
浓缩胶一般都是5%的,下面的是5ML的配方,其余的你可以自己算了5mlH2O 3.6acrylamide mix(30%) 0.621M Tris(PH6.8) 0.6310% SDS 0.0510% AP 0.05TEMED 0.005
胶管冷冻设备操作方法
开机前胶管冷冻设备须先预热,使压缩机里的冷冻机油和制冷剂得到充分的分离。按配电箱上的“制冷”按钮,等温控表上的温度达到温度后即可进行胶管管胎的冷冻了。按配电箱上的“制冷”按钮下方的“停止”按钮,制冷停止。 胶管冷冻设备产品是近几年胶管行业设备里出现的一种辅助设备,主要配套在钢丝编织机及钢丝缠绕
DNA电泳
DNA电泳(主要内容如下) Preparation of Agarose Gel and Electrophoresis Extraction of DNA From Agarose Gel Extraction of DNA from Acrylamide Gels DNA Marker