酮体的合成方法及步骤
在肝脏线粒体中脂肪酸一旦降解,生成的乙酰CoA可以有几种代谢结果。最主要的当然是进入柠檬酸循环及进一步的电子传递系统,最终完全氧化为CO2及H2O;其二是作为类固醇的前体,生成胆固醇,它在胆固醇生物合成中是起始化合物;其三是扮演脂肪酸合成前体的角色:其四是转化为乙酰乙酸、D-β-羟丁酸和丙酮,这三个化合物统称为酮体(ketone body)。酮体合成主要是肝脏的功能。酮体中丙酮的生成量相当小,生成后即被吸收。乙酰乙酸和D一β-羟丁酸则经血流进入肝外组织,在那里被氧化,经柠檬酸循环提供更多能量给那些组织使用,例如骨、心肌和肾皮质。脑组织一般只用葡萄糖作为燃料,但饥饿时,葡萄糖供给不足,它可接受使用乙酰乙酸或D -β-羟丁酸 。肝细胞线粒体中的脂肪酸β-氧化产生的乙酰辅酶A生成酮体 酮体在肝细胞的线粒体中合成。合成原料为脂肪酸β-氧化产生的乙酰CoA。肝细胞线粒体内含有各种合成酮体的酶类,特别是HMG......阅读全文
酮体的合成方法及步骤
在肝脏线粒体中脂肪酸一旦降解,生成的乙酰CoA可以有几种代谢结果。最主要的当然是进入柠檬酸循环及进一步的电子传递系统,最终完全氧化为CO2及H2O;其二是作为类固醇的前体,生成胆固醇,它在胆固醇生物合成中是起始化合物;其三是扮演脂肪酸合成前体的角色:其四是转化为乙酰乙酸、D-β-羟丁酸和丙酮,这三个
酮体的合成部位及合成步骤
酮体生成的部位是在肝细胞线粒体内。脂肪酸β-氧化生成的乙酰CoA是合成酮体的原料。其合成过程分三步进行。1.两分子乙酰CoA在硫解酶(thiolase)催化下缩合成1分子乙酰乙酰CoA。2.乙酰乙酰CoA再与1分子乙酰CoA缩合成β-羟-β-甲基戊二酸单酰CoA(HMG-CoA),催化这一反应的酶为
引物合成的步骤及方法
第一步是将预先连接在固相载体CPG上的活性基团被保护的核苷酸与三氯乙酸反应,脱去其5'-羟基的保护基团DMT,获得游离的5'-羟基; 第二步,合成DNA的原料,亚磷酰胺保护核苷酸单体,与活化剂四氮唑混合,得到核苷亚磷酸活化中间体,它的3'端被活化,5'-羟基
引物合成的步骤及方法介绍
Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这大大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。 现在一般都采用β-乙腈亚磷酰胺化学合成Oligo DNA,将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的合成
引物合成的步骤及方法介绍
Oligo DNA的人工化学合成始于50年代初期,1980年,全自动的固相DNA合成仪面市后,使得快速、高效合成Oligo DNA成为可能,这大大地推动了生物工程技术的蓬勃发展。现在一般都采用β-乙腈亚磷酰胺化学合成Oligo DNA,将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的合成时从3'
尿液酮体的检测方法及评价
1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar
合成酮体的关键酶究竟是
合成酮体的关键酶是HMGCoA合成酶。酮体的生成:以乙酰CoA为原料,在肝线粒体经酶催化先缩合,后再裂解而生成体,除肝之外,肾也含有生成酮体的酮体系。酮体的合成过程可分三步进行。1、由两分子乙酰CoA在硫解酶的作用下缩合生成乙酰乙酰CoA,同时释放出一分子CoA-SH。2、乙酰乙酰CoA再与一分子乙
尿液酮体检查的检测方法及评价
1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar
尿液酮体检查检测方法及评价
1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar
尿液酮体检查检测方法及评价
检测方法及评价1. 试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2. 湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。
引物合成的步骤
引物合成是指通过测定引物的OD值,溶解引物,最终合成引物的一个完善的过程。目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。亚磷酰胺三酯法合成DNA片段,具有高效、快速的偶联以及起始反应物比较稳定的特点。亚磷酰胺三酯法是将DNA固定在固相载体上完成DNA链的合成的,合成的方向是由待合成引物的3′端向5′端
DNA合成仪的使用方法操作步骤
以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的
DNA合成仪的使用方法操作步骤
DNA合成仪的使用方法操作步骤 以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤
DNA合成仪的使用方法操作步骤
以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下:1)仔细检查合成仪上所有试剂瓶中的
多肽合成步骤
1、树脂的选择及氨基酸的固定 用于多肽合成的高分子的载体主要有3类:交联聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂类树脂。氨基酸的固定主要是通过保护的氨基酸的羧基同树脂的反应基团之间形成共价键来实现。 2、氨基、羧基、侧链的保护及脱除 要成功合成具有特定的氨基酸顺序的多肽,需要对暂不参与形成酰胺
合成酮体的酶全部位于细胞质吗
合成酮体的酶不是全部位于细胞质。根据酶在细胞的分布可分为胞外酶和胞内酶。胞外酶如唾液淀粉酶(就是在我们的口水中)等各类消化酶。酶内胞有呼吸酶等等。
合成酮体的酶全部位于细胞质吗
合成酮体的酶不是全部位于细胞质。根据酶在细胞的分布可分为胞外酶和胞内酶。胞外酶如唾液淀粉酶(就是在我们的口水中)等各类消化酶。酶内胞有呼吸酶等等。
合成酮体的酶全部位于细胞质吗
合成酮体的酶不是全部位于细胞质。根据酶在细胞的分布可分为胞外酶和胞内酶。胞外酶如唾液淀粉酶(就是在我们的口水中)等各类消化酶。酶内胞有呼吸酶等等。
ELISA方法的及步骤
ELISA是酶联接免疫吸附剂测定( Enzyme-Linked Immunosorbnent Assay )的简称。它是继免疫荧光和放射免疫技术之后发展起来的一种免疫酶技术。此项技术自70年代初问世以来,发展十分迅速,目前已被广泛用于生物学和医学科学的许多领域。 (一) 原理 ELISA是以
简介有机药物的逆合成方法基础步骤
1、化合物结构的宏观判断:找出基本结构特征,确定采用全合成或半合成策略。 2、化合物结构的初步剖析:分清主要部分(基本骨架)和次要部分(官能团),在通盘考虑各官能团的引入或转化的可能性之后,确定目标分子的基本骨架,这是合成路线设计的重要基础。 3、目标分子基本骨架的切断:在确定目标分
互补DNA的合成步骤
1.cDNA第一链的合成所有合成cDNA第一条链的方法都要用依赖于RNA的DNA聚合酶(反转录酶)来催化反应,主要有两个关键因素,一个是mRNA模板,另一个是反转录酶 [3] 。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒(AMV)逆转录酶和从表达克隆化的Moloney鼠白血病病毒
互补DNA的合成步骤
1.cDNA第一链的合成所有合成cDNA第一条链的方法都要用依赖于RNA的DNA聚合酶(反转录酶)来催化反应,主要有两个关键因素,一个是mRNA模板,另一个是反转录酶 [3] 。商品化反转录酶有从禽类成髓细胞瘤病毒纯化到的禽类成髓细胞病毒(AMV)逆转录酶和从表达克隆化的Moloney鼠白血病病毒
糖原的合成反应步骤
由葡萄糖(包括少量果糖和半乳糖)合成糖原的过程称为糖原合成,反应在细胞质中进行,需要消耗ATP和UTP,合成反应包括以下几个步骤:合成反应步骤糖原合成酶催化的糖原合成反应不能从头开始合成第一个糖分子,需要至少含4个葡萄糖残基的α-1,4-多聚葡萄糖作为引物(primer),在其非还原性末端与UDPG
简述酮体代谢的特点及意义
酮体代谢由脂肪酸的β-氧化及其他代谢所产生的乙酰CoA,在一般的细胞中可进入三羧酸循环进行氧化分解,但在动物的肝脏、肾脏、脑、等组织中,尤其在饥饿、禁食、糖尿病等情形下,乙酰CoA还有另一条代谢去路。最终生成乙酰乙酸、β-羟基丁酸和丙酮,这三种产物统称为酮体。酮体是人体利用脂肪的正现象,对于不能利用
尿液酮体检查的检测方法
1.试带法基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。2.湿化学法(1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。(2)Gerhar
尿液酮体检查的检测方法
1.试带法 基于传统的湿化学亚硝基铁氰化钠法,是目前临床最常用的尿酮体筛检方法。检测过程简易快速,尤其适合于床边检验。不同试带对丙酮和乙酰乙酸的灵敏度不一。 2.湿化学法 (1)Rothera法:在碱性条件下,亚硝基铁氰化钠可与尿中的乙酰乙酸、丙酮起反应呈现紫色,但不与β-羟丁酸起反应。 (
多肽合成的原理与步骤
多肽合成是一个重复添加氨基酸的过程,固相合成顺序一般从C端(羧基端)向 N端(氨基端)合成。过去的多肽合成是在溶液中进行的称为液相合成法。从1963年Merrifield发展成功了固相多肽合成方法以来,经过不断的改进和完善,到今天固相法已成为多肽和蛋白质合成中的一个常用技术,表现出了经典液相合成法无
DNA合成仪的操作步骤
以亚磷酰胺寡核苷酸合成为例介绍该类仪器的一般操作步骤。亚磷酰胺DNA合成的试剂有:保护碱基的5/—DMT,A、G、C、T亚磷酰胺单体,四唑偶联催化剂,乙酐,N—甲基咪唑封闭试剂,三氯乙酸(TCA)脱保护溶液,12氧化混合物,乙腈清洗溶剂,氨水切除溶液。使用步骤如下: 1)仔细检查合成仪上所有试
反转录酶的合成步骤
1、使用前每个组份轻轻混匀,然后2000rpm离心20s2、取灭过菌且无核酸酶的0.2ml离心管,依次加入2~5μgRNAnμL3、65℃保温5min,然后冰浴5min;4、往3步骤中的0.2ml离心管依次加入下列组份RNase抑制剂(40u/μL)0.5μL10×M-MLVReactionBuff
cDNA合成技术的基本步骤
(1)取一灭菌的无RNA酶的eppendorf管,加入RNA模板和适当引物,每RNA使用0.5ug引物(如使用Not I引物接头,用0.3ug),用H2O调整体积至15ul,70℃处理5min冷却至室温,离心使溶液集中在管底,再依次加入:5X第一链缓冲液5ul。RNasinRNA酶抑制剂25UM—M