引起电泳图谱不整齐的原因
条带弯曲可能是胶没有混匀或者含有气泡、电泳时电压过大造成的。......阅读全文
DNA印迹法的基本原理
这种方法最初是由Southern于1975年建立的。方法中DNA转移的方式和复印的过程一样,比较准确地保持了特异DNA顺序在电泳图谱中的位置,也可将变性的凝胶负压干燥后与特定的DNA探针进行原位杂交。它把电泳分离和杂交结合起来,不但能检测出特异的DNA序列片段,而且能进行定位和测定分子量。即先以
血清质量的鉴定有哪些方面?
●理化性质:如渗透压、pH值、蛋白电泳图谱、蛋白含量、激素水平、内毒素等。蛋白含量包括血清总蛋白含量(不低于35-45g/L)、球蛋白含量(应小于20g/L)、血红蛋白含量等。其中球蛋白含量是一项非常重要的指标,血清中球蛋白主要是抗体,球蛋白含量越低血清质量越高。血红蛋白也是越低越好。 ●微生
螨变应原活性物质的制备
收集螨虫培养收获物,采用经批准的生产工艺进行提取、过滤等,获得具有变应原活性的蛋白质混合物,即为螨变应原活性物质。提取活性物质的过程应考虑尽可能减少潜在刺激性低分子量物质和非致敏性组分的产生。活性物质可直接用于原液生产,也可以液体或者冻干粉形式保存于适宜条件下备用。若需要贮存,应证明该贮存条件不影响
脉冲场凝胶电泳(PFGE)概述
脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为:细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(low frequency cle
脉冲场凝胶电泳(PFGE)概述
脉冲场凝胶电泳(PFGE)的原理大致为:细菌包埋于琼脂块中,用适当的内切酶在原位对整个细菌染色体进行酶切,酶切片段在特定的电泳系统中通过电场方向不断交替变换及合适的脉冲时间等条件下而得到良好的分离。PFGE中内切酶的选用至关重要,所采用的内切酶常为寡切点酶(lowfrequencycleavager
聚丙烯酰氨凝胶电泳的实验结果分析
1、电泳条件的选择为了选择血清蛋白电泳较合适的条件,我们分别对单体浓度、双体浓度、配制凝胶时所用不同正离子、各种电压、二甲氨基丙腈的浓度、过硫酸铵的浓度等条件进行了试验。根据以上试验结果,我们在分离血清蛋白时选用的条件是:单体浓度6.25-6.5%,双体占总丙烯酰胺量的4-5%,正离子采用三羟甲基氨
血清蛋白质的电泳分析简介
醋酸纤维薄膜(ACM)和琼脂糖凝胶是目前最广泛采用的两类介质。巴比妥缓冲液pH8.6,离子强度0.05,标本用量3-5μl,标准电泳条件为CAM每厘米宽电流0.75mA,琼脂糖约为每厘米宽10mA,电泳时间40-60分钟,电泳前沿达6cm左右。虽然目前已开展和应用不少个别蛋白质的测定方法,但血浆蛋白
如何知道细胞系是否发生交叉污染了?
如果存在细胞系之间发生交叉污染,而且鉴定用的细胞可能有两种以上的细胞系时,那么在进行STR位点检测的时候,多个位点会出现两个以上的峰。峰高值表示该等位基因的信号强度,理论上峰值与样本的DNA浓度有直接的关系。因此,存在交叉污染的混合细胞系中,其中一个位点中某些峰会明显高于其他的峰,其中大峰是属于混合
血清蛋白质的电泳分析简介
醋酸纤维薄膜(ACM)和琼脂糖凝胶是目前最广泛采用的两类介质。巴比妥缓冲液pH8.6,离子强度0.05,标本用量3-5μl,标准电泳条件为CAM每厘米宽电流0.75mA,琼脂糖约为每厘米宽10mA,电泳时间40-60分钟,电泳前沿达6cm左右。虽然目前已开展和应用不少个别蛋白质的测定方法,但血浆蛋白
PCR在临床检验中的应用(四)
遗传病是由于遗传基础异常而引起的疾病,人类遗传病约有3000多种,患者占总人口数的10%。遗传病大概可分为单基因、多基因及染色体遗传病。常用诊断方法有家系谱分析、染色体检查(特别是显带法)、生物化分析等。随分子生物学发展,基因诊断愈来愈表现出其优越性,PCR技术是基因诊断的主要技术之一,为快速、准确
关于限制性内切核酸酶的由来介绍
一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI
限制性核酸内切酶的来源
一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI、H
尿聚丙烯酰胺凝胶电泳的临床意义及正常值
临床意义 尿聚丙烯酰胺凝胶电泳可以大致推断尿蛋白的来源(是溢出性蛋白尿还是组织破坏性蛋白尿);并可了解肾功能的情况,如仅有中分子量尿蛋白,病变较轻。如低中高分子量尿蛋白均有,说明病变较重。 当肾小球通透性增高或滤膜缺损时,导致在正常情况不被肾小球滤膜通过的中、大分子蛋白在尿中出现,称肾小球性
尿聚丙烯酰胺凝胶电泳的临床意义
尿聚丙烯酰胺凝胶电泳可以大致推断尿蛋白的来源(是溢出性蛋白尿还是组织破坏性蛋白尿);并可了解肾功能的情况,如仅有中分子量尿蛋白,病变较轻。如低中高分子量尿蛋白均有,说明病变较重。 当肾小球通透性增高或滤膜缺损时,导致在正常情况不被肾小球滤膜通过的中、大分子蛋白在尿中出现,称肾小球性蛋白尿(中、
嵌杯样病毒胃肠炎的实验室检查
依赖病原学及血清学检测确诊。可用电镜或免疫电镜从患者粪便中查见病毒颗粒,或用 ELISA 或 RIA 法检查患者粪便中病毒特异性抗原和患者血中特异性抗体。可用电镜或免疫电镜从患者粪便中查见病毒颗粒,或用 ELISA 或RIA 法检查患者粪便中病毒特异性抗原和患者血中特异性抗体。 1、血常规 外
简述Ⅱ型限制性内切酶的由来
一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI
安捷伦2100生物分析仪的特点-上海弥楼生物
▶快速获得结果,30 分钟内可完成 10 个样品的自动化分析。▶不需要手动染色和脱色的步骤,所有的程序都集中在一个步骤中实现。▶检测的精确度高,预包装的试剂和标准化检测方法可产生高度重现结果。▶可分析多种蛋白质样品,细胞消化液、柱层析组分、抗体和纯化的蛋白质。▶样品消耗量低,每个分析仅需要4 μl
基因测序仪的原理
abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单链dna
基因测序仪的原理
abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3''''末端为4种不同荧光染料的单链dna
限制性核酸内切酶的研究历史
一般是以微生物属名的第一个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillus amylolique faciens H中提取的限制性内切酶称为Bam H,在同一品系细菌中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI、H
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验
实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不相同, 在电场中移动的速度也不等, 例如, 血清或卵清样品中白蛋白等电点比其他蛋白质低, 在pH8 . 6 时带的负电荷比其他蛋白质多, 加上白蛋
醋酸纤维素膜电泳分离鉴定蛋白质实验
电泳法 实验方法原理 混合蛋白质样品中各种蛋白质的等电点不同, 在pH8 . 6 的巴比妥缓冲液中, 各种蛋白质所带的静电荷量不同, 加上蛋白质分子大小不
基因测序仪的原理
基因测序仪是一种在医学领域使用的仪器。原理:abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3'''
基因测序仪的原理
基因测序仪是一种在医学领域使用的仪器。原理:abi prism 310型基因分析仪采用毛细管电泳技术取代传统的聚丙烯酰胺平板电泳,应用该公司ZL的四色荧光染料标记的ddntp(标记终止物法),因此通过单引物pcr测序反应,DNA测序仪生成的pcr产物则是相差1个碱基的3'''
血清蛋白质电泳技术操作步骤
1. 点样 将醋酸纤维薄膜 (2.5cm×8cm) 一条,浸于巴比妥缓冲液,待完全浸透后,取出轻轻夹于滤纸中,吸去多余的溶液,再于薄膜的无光泽面的一端 2.0cm 处,用小玻片蘸取少许血清,垂直印于膜上,待血清渗入薄膜后,以无光泽面向下,两端用数层浸湿的滤纸 ( 或纱布 ) 贴紧,加盖,平衡 2 ~
异常血红蛋白(abnormal-hemoglobin)筛查的步骤与方法
1. 浸膜:将醋酸纤维素薄膜膜面向下放入浸膜液中,浸透后用眼科镊子压入液面底部。2. 采血:碘伏消毒耳垂部,用一次性采血针采血,并将血液吸在两次对折的滤纸尖部。3. 加样:将浸泡好的醋酸纤维素薄膜膜面向上放在滤纸上,用滤纸吸去多余的液体,在距一侧1.5cm处用沾血的滤纸涂圆点状(直径约0.2cm)或
琼脂糖凝胶电泳的原理
原理如下:琼脂糖凝胶电泳是用琼脂糖作支持介质的一种电泳方法。其分析原理与其他支持物电泳最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构,物质分子通过时会受到阻力,大分子物质在涌动时受到的阻力大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅取决于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大
肉毒毒素的检测方法介绍
肉毒毒素中毒的临床诊断主要依据临床体症和主述分析。实验室检测肉毒毒素及定型对确诊和治疗具有重要意义,预防中毒最重要的是加强监测。经典的小鼠致死及中和试验仍是最敏感、最可信的肉毒检测方法,该方法经过不断完善,甚至可以对很微量的毒素作到定量检测。但该方法比较繁琐和耗时,不易推广,因此人们不断探索一些
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳可应用于:(1)测定血清中蛋白质含量;(2)诊断疾病。实验方法原理琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大(98-99%),近似自由电泳,因为固体支持物的影响少,故电泳速度快,区带整齐。而且由于琼脂糖不含带电荷的基团,电渗影响很少,是一种较好的电泳材料,分离效果较好。
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳
血清蛋白琼脂糖凝胶电泳 实验方法原理 琼脂糖主要通过氢键而形成凝胶。电泳时因凝胶含水量大(98-99%),近似自由电泳,因为固体支持物的影响少,故电泳速度快,