流式图四个象限怎么看凋亡

流式图四个象限看凋亡:在二维散点图上,PI 和 annexin V 分别是X和Y轴。一般认为PI单染的细胞是已经死亡的细胞,annexin V 单染的细胞是凋亡早期的细胞,而双染是凋亡中期的。需要在散点图上先画出4个象限,位置根据无染色的阴性细胞先定出左下象限。Annexin V是一种检测细胞凋亡的试剂,在正常细胞中,磷脂酰丝氨酸只分布在细胞膜脂质双层的内侧,细胞发生凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。相关分析使用流式细胞仪正确分析Annexin V-FITC/PI双染的细胞前要求仪器的荧光补偿来去除两种染料激发光之间的叠加。因为荧光补偿设置与PMT的电压直接相关,所以不同仪器之间的补偿不同。建议在实验开始阶段分析经Annexin V、PI分别单染的细胞来调整荧光补偿去除光谱重叠。根据未处理细胞空白对照和经Annexin V、PI分别细胞染色后的单染对照的分析设定十字门的位置。......阅读全文

流式细胞仪技术专辑

 最方便的实验干货查询工具微信扫码进入「丁香实验」小程序编辑: 呜咽分享到:      Flow Cytometry Analysis (Springer Lab, Harvard University)Flow cytometry employs instrumentation that scan

如何选择流式细胞仪

按需选择。首先明确您要流式细胞仪的目的是什么,比如用来做哪些检测。然后根据这些需求看市场上有多少符合您需求的。您可以查看各项指标、操作界面和数据处理等方面是不是符合您的要求,和现有的条件是否配套。推荐您选择贝克曼库尔特公司的流式细胞仪,贝克曼库尔特自1953年推出世界上第一台流式细胞分析仪后,对技术

流式细胞仪检测原理

流式细胞仪检测原理如下:流式细胞仪是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白量等指

流式细胞仪技术(FCM)

流式细胞术(FCM)简述流式细胞术 (Flow Cytometry)是70年代发展起来的一种利用流式细胞仪对细胞等生物粒子的理化及生物学特性(细胞大小、DNA/RNA含量、细胞表面抗原表达等)进行定量、快速、客观多参数相关检测分析的新技术。它借鉴了荧光显微镜技术与血球计数原理,同时利用荧光染料,激光

流式抗体染色不避光会怎样

  流式抗体荧光标记搭配主要由3个因素决定的:  流式细胞仪能检测多少个通道  需要同时检测检测多少个指标  厂家的抗体有多少种荧光标记  如果流式细胞仪的通道越多,那么同一份样本能同时做的表面/胞内标志就越多  A、 如何根据流式细胞仪搭配流式抗体  1) BD流式细胞仪  BD流式试剂选择及应用

什么是流式细胞仪?

  流式细胞仪(Flowcytometry)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总

流式样本的固定和保存

1、全血样本的保存:一般来说,血液样本必须在6个小时内处理,最晚不得超过12小时;做完染色后,需要放在多聚甲醛中保存,一般可以存放3天左右。多聚甲醛的质量直接影响保存的效果。所以多聚甲醛的制备也非常重要!!注意:如果是MOUSE,RAT的全血样本,不建议用多聚甲醛保存;效果非常不好;不信你可以试试,

什么是流式细胞仪

流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总

流式细胞仪的使用

  流式细胞仪(Flow cytometer)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总

流式细胞仪基本结构

组成流式细胞仪主要由四部分组成。它们是:流动室和液流系统;激光源和 光学系统;光电管和检测系统;计算机和分析系统。上图为其结构示意图。流动室和液流系统流动室由 样品管、 鞘液管和喷嘴等组成,常用光学玻璃、石英等透明、稳定的材料制作。设计和制作均很精细,是液流系统的心脏。 样品管贮放样品,单个细胞悬液

流式平均荧光强度反映什么

流式平均荧光强度反映精确地数值。左边这张图每个峰下面积除以细胞数就是平均荧光强度,在流式细胞仪分析完结果后会出据平均荧光强度的数值,可以看原始数据。右边这张图纵坐标。流式细胞仪检测得到的都是相对值,没有单位。这个平均荧光强度也是一样。单独看一个样本的值是没有意义的,要么是比较不同样本直接的差别,要么

流式细胞术的样品制备

样本制备的基本原则:1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜,尽快完成样本制备和检测;2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDTA处理,以清除杂质,使粘附的细胞彼此分离而形成单细胞状态;3.对新鲜实体瘤组织可选用或联用酶消化法,机械打散法和化学分散法来获得足够数量的单细胞悬液;4.对石蜡包埋组织应先

流式与werstern的区别有哪些?

(1)Western 是检测蛋白表达的金标准,可用于检测细胞多种类型的蛋白;流式细胞术的方法多用于检测细胞膜蛋白,虽然也可通过Triton-X100给细胞打孔的方法来检测胞内蛋白,但对于分泌蛋白却是无能为力的;(2)Western测蛋白含量对抗体的量需要很少,一般1:1000左右,而流式对抗体的需要

流式细胞术:标本处理

一、流式细胞术常规检测时的样品制备(一)直接免疫荧光标记法取一定量细胞(约1X106细胞/ml),在每一管中分别加入50μl的HAB,并充分混匀,于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色,可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入),。孵育20-60分

什么是流式细胞仪?

流式细胞仪(Flowcytometry)是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总蛋白

流式细胞术,你了解多少?

  流式细胞术:即FCM。很多小伙伴在做实验过程中会碰到很多问题,比如:无信号、荧光强度高等一系列问题,接下来就来聊聊流式细胞技术!   目前,流式细胞术广泛应用于细胞表面和细胞内分子表达特征的分析,界定不同种类的细胞群,测定分离出的亚类纯度,分析细胞的大小和总量,它可以同时分析单个细胞的多个参数

流式细胞术的工作原理

  将待测细胞染色后制成单细胞悬液。用一定压力将待测样品压入流动室,不含细胞的磷酸缓冲液在高压下从鞘液管喷出,鞘液管入口方向与待测样品流成一定角度,这样,鞘液就能够包绕着样品高速流动,组成一个圆形的流束,待测细胞在鞘液的包被下单行排列,依次通过检测区域。  流式细胞仪通常以激光作为发光源。经过聚焦整

流式细胞术质量控制

流式细胞术(flow cytometry,FCM)越来越广泛的应用在临床检验中。由于临床检验本身的性质,它要求临床检验的管理者和操作人员必须把好常规操作已经结果分析的质量关。同时还必须懂得如何判断分是在控还是失控。作为临床检验工作,其工作的质量标准就是使检验的结果最佳地符合病人有无病变的实际情况。在

流式细胞仪技术概述

流式细胞仪技术,主要是测量群体中单个细胞经适当染色后其成分所发出的散射光和荧光,经染色的细胞在悬液中以单行流过高强度光源的焦点,当每个细胞经过焦点时,发出一束散射光/或荧光。它们经过过滤及光镜系统收集到达一个光电检测器(光电倍增管或一个固态装置),光检测器把散射光定量转化成电信号,经数字转换器进行数

流式细胞仪实验安全

  生物学操作技术最重要的就是安全问题,在操作流程中有诸多环节存在各种安全隐患,需要谨慎操作。  (1)电安全问题:偏振板,激光供电等都是高电压,需要特别小心。仪器内部只能由厂家人员及相关工作人员才可操作,实验人员不得冒险操作。  (2)激光安全问题:流式细胞术的激光有相应的cover保护,不得打开

溢流式球磨机安全操作须知

球磨机设备按照排矿方式不同而分为格子型球磨机和溢流型球磨机用于选矿生产线、水泥生产线、加气混凝土生产线等大型工业生产线中。溢流式球磨机的筒体内部装有蓖板,只要达到细度要求的物料就可以通过球磨机的转动自动卸 料,24小时不间断的生产。掌握溢流球磨机的科学安全操作,不仅可以可降低机器故障的频率,提高生产

升流式厌氧污泥床(UASB)

升流式厌氧污泥床(UASB)  UASB是荷兰农业大学几名教授在AF基础上发展起来的,其特点是反应器的上部设置1个气、固、液三相分离器,混合液中的污泥能自动回到反应区以维持较多的生物量和较长的SRT,整个反应器由反应区和沉淀区两部分组成。UASB具有很高的容积负荷率和污泥负荷率。

流式细胞仪分选方法

流式细胞仪96孔微孔板单个细胞分选方法进行优化和应用。通过对液流的调节.获得较稳定的分选设定值;在96孔微孔板盖上分选肉眼可见液滴,确定分选液滴在96孔微孔板每孔相对应的盖上的位置;分选结束后,计数单个细胞存在的细胞孔数;分选细胞培养7d后.记录单个细胞存在孔数及单克隆形成的数量。结果5个细胞形成的

流式细胞仪的使用

  1.分析 细胞表面标志  2.分析细胞内抗原物质  3.分析细胞受体  4.分析肿瘤细胞的DNA、RNA含量  5.分析 免疫细胞的功能

流式荧光技术的特点和应用

流式荧光,又称悬浮阵列、液相芯片等,是近20多年逐渐发展起来的多指标联合诊断技术。该技术以荧光编码微球为核心,集流式原理、激光分析、高速数字信号处理等多种技术于一体,多指标并行分析,最多可一管同时准确定量检测2-500种不同的生物分子;具有高通量、高灵敏度、并行检测等特点;可用于免疫分析、核酸研究、

流式细胞仪的原理

最近一直在了解流式细胞术和流式分选的知识,看到这个问题想回答一下:流式细胞仪是以流式细胞术为基础,快速精确的对单个细胞的理化性质进行定量分析和分选。分析流程为:制备单细胞悬液,用特异性荧光染料标记的抗体进行染色,经染色后的待测细胞在一定气体压力下被压入流动室,在鞘液的包裹下细胞呈单行排列,依次通过检

流式细胞仪介绍大全

流式细胞仪(Flow cytometry )是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总

流式细胞术:临床检验基础

流式细胞术(flowcytometry ,FCM )是一种综合应用光学、机械学、流体力学、电子计算机、细胞生物学、分子免疫学等学科技术,使被测溶液流经测量区域,并逐一检测其中每一个细胞的物理和化学特性,从而对高速流动的细胞或亚细胞进行快速定量测定和分析的方法。 首先,待测细胞经处理或染色后被压

什么是流式细胞仪

流式细胞仪(Flow cytometer )是对细胞进行自动分析和分选的装置。它可以快速测量、存贮、显示悬浮在液体中的分散细胞的一系列重要的生物物理、生物化学方面的特征参量,并可以根据预选的参量范围把指定的细胞亚群从中分选出来。多数流式细胞计是一种零分辨率的仪器,它只能测量一个细胞的诸如总核酸量,总

什么是流式细胞术检测

又称荧光激活细胞分选法,一种细胞分选或分析技术。即以荧光素标记抗体结合相应细胞,用激光束激发单行流动的细胞,根据细胞所携带荧光(强度或类别)进行分选或分析。