DNA杂交的基本信息介绍
DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物的DNA单链事先用同位素进行标记。如果两种生物DNA分子之间存在互补的部分,就能形成双链区。由于同位素被检出的灵敏度高,即使两种生物DNA分子之间形成百万分之一的双链区,也能够被检出。......阅读全文
线粒体DNA的基本信息介绍
线粒体DNA是线粒体中的遗传物质,线粒体能为细胞产生能量(ATP),是在细胞线粒体内发现的脱氧核糖核酸特殊形态。线粒体是为细胞提供能量(ATP)的细胞器。一个线粒体中一般有多个DNA分子。 它们携带着自己的DNA——mtDNA,而这些基因的突变能引起线粒体疾病。虽然疾病症状是多变的,但大脑、肌
DNA探针原位杂交
1、4—6微米切片,用防脱片胶(多聚赖氨酸)处理过的玻片贴附 2、56—60℃烤片2—16h 3、新鲜二甲苯脱蜡,10minX2(趁热脱蜡) 4、100%乙醇5minX2次,不用浸水,直接空气干燥 5、加入50μl蛋白酶K工作液(蛋白酶K用蒸馏水稀释,浓度为25μg/ml),37℃消化1
细胞化学词汇DNA杂交
中文名称:DNA杂交基 础:具有互补碱基序列的DNA分子意 义:定物种之间亲缘关系的远近相关理论:同位素被检出的灵敏度高
DNA杂交实验方法
杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。其基本原理就是应用核酸分子的变性和复性的性质,使来源不同的DNA(或RNA)片段,按碱基互补关系形成杂交双链分子(heteroduplex)。杂交双链可以在DNA与DNA链之间,也可在RNA与DNA链之间形成。使双螺旋解开成
DNA斑点杂交方法
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
DNA、RNA斑点杂交
实验概要将RNA 或DNA 变性后直接点样于硝酸纤维素膜上,同探针进行杂交,用于基因组中特定基因及其表达的定性及定量研究,称为斑点印迹。与Southern 及Nouthern 印迹法相比,其优点是简单、迅速,可在一张膜上同时进行多个样品的检测,特别是对于核酸粗提样晶的检测。缺点是不能鉴定所测基
关于荧光原位杂交的基本信息介绍
荧光原位杂交(Fluorescence in situ hybridization,FISH)是20世纪80年代末在放射性原位杂交技术基础上发展起来的一种非放射性分子生物学和细胞遗传学结合的新技术,是以荧光标记取代同位素标记而形成的一种新的原位杂交方法。
DNA分子杂交的方法和过程
DNA分子杂交的基础是,具有互补碱基序列的DNA分子,可以通过碱基对之间形成氢键等,形成稳定的双链区。在进行DNA分子杂交前,先要将两种生物的DNA分子从细胞中提取出来,再通过加热或提高pH的方法,将双链DNA分子分离成为单链,这个过程称为变性。然后,将两种生物的DNA单链放在一起杂交,其中一种生物
关于DNA疫苗的基本信息介绍
DNA疫苗——对目标细胞,藉由改造过的病毒或细菌感染,以插入基因或调节基因表现(gene expression)的手法,引起免疫系统的活化,若这些细胞因此在表面呈现异于接种者本身的物质,将会被免疫系统辨识后受到攻击,尽管此项技术仍在试验中,却有可能成为未来治疗癌症、遗传疾病的重要疗法。
关于叶绿体DNA的基本信息介绍
叶绿体DNA,英文chloroplast DNA,缩写cpDNA,存在于叶绿体内,双链环状,长度中间值通常为45微米,具有独立基因组。一个叶绿体含有10~50个cpDNA。 chloroplast DNA(cpDNA),存在于叶绿体内的DNA。高等植物叶绿体的DNA为双链共价闭合环状分子,其长
关于DNA变性的基本信息介绍
变性DNA常发生一些理化及生物学性质的改变: 1)溶液粘度降低。DNA双螺旋是紧密的刚性结构,变性后代之以柔软而松散的无规则单股线性结构,DNA粘度因此而明显下降。 2)溶液旋光性发生改变。变性后整个DNA分子的对称性及分子局部的构性改变,使DNA溶液的旋光性发生变化。 3)增色效应(hy
关于卫星DNA的基本信息介绍
卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看
关于DNA重组的基本信息介绍
DNA重组(DNA recombination)实质上指的是遗传重组(genetic recombination),也称为遗传改组(genetic reshuffling),是指两个不同姐妹染色体间遗传物质的交换。DNA重组导致后代产生不同于任一亲本的新性状。真核生物减数分裂期间的DNA重组产生
关于DNA效应的基本信息介绍
一个国际研究小组通过单分子生物物理等手段严谨地证实了DNA中确实存在别构效应。该研究揭示了DNA一个新的基本性质,不但在物理上非常有趣,而且有重要的生理意义。相关研究发表在近期的《科学》杂志上。 别构效应广泛存在于蛋白质特别是酶中。别构效应是描述远离活性中心的结合到变构位点的效应因子能够通过蛋
关于端粒DNA的基本信息介绍
端粒DNA,包括非特异性DNA和由高度重复序列组成的特异DNA序列,通常是由富含鸟嘌呤核苷酸(G)的短的串联重复序列组成,伸展到染色体的3'端。人工合成四膜虫端粒的重复DNA片段(TTGGGG)4端。人和小鼠的端粒DNA重序列为TTGGG,人类端粒的长度约为15Kb碱基。由于dsDNA存
什么是DNA斑点杂交
是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜,NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时
什么是DNA斑点杂交
是指将待测的DNA变性后点加在硝酸纤维素膜(或尼龙膜,NC膜)上,用已标记的探针进行杂交,洗膜(除去未接合的探针),放射自显影,判断是否有杂交及其杂交强度,主要用于基因缺失或拷贝数改变的检测。 斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时
DNA印迹杂交分析实验
实验方法原理 本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。实验材料 DNA试剂、试剂盒 SDSSSC仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 用6×SSC润湿带有固定了的DNA的膜。2. 将膜的DNA面朝上置于杂交管中,ATP溶
DNA斑点杂交方法步骤
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。④将膜烘干,密封保存备用。
DNA斑点杂交方法(二)
核酸杂交法检测病原微生物 核酸杂交技术是根据两条互补的核苷酸单链可以杂交结合成双链的原理所建立,用一段已知序列的放射性或非放射性标记的核苷酸单链做探针,与待检标本中的DNA杂交来探查待检标本中有无与之相互补的核酸。该方法特异性高,但敏感性低于PCR方法。 本实验学习用非放射性标记物-地高辛(DI
DNA斑点杂交方法简介
①先将膜在水中浸湿,再放到15×SSC中。 ②将DNA样品溶于水或TE,煮沸5min,冰中速冷。 ③用铅笔在滤膜上标好位置,将DNA点样于膜上,每个样品一般点5μl(2~10μg DNA)。 ④将膜烘干,密封保存备用。
DNA斑点杂交方法(一)
斑点杂交(Dot blot)是将被检标本点到膜上,烘烤固定。这种方法耗时短,可做半定量分析。一张膜上可同时检测多个样品,为使点样准确方便,市售有多种多管吸印仪(Manifold),如MinifoldⅠ和Ⅱ、Bio-Dot(Bio-Rad)和Hybri-Dot,它们有许多孔,样品加到孔中,在负压下
DNA印迹杂交分析实验
放射标记法 实验方法原理 本方案适合于用100~1 000 bp 长的放射性标记的DNA探针对Southern转印、斑点及狭线印迹进行杂交分析。
关于小卫星DNA的基本信息介绍
小卫星DNA (minisatellite DNA )又称可变数目串联重复(variable number tandem repeat, VNTR),由15~65bp的基本单位串联而成,总长通常不超过20kb,重复次数在群体中是高度变异的。多态性由于重复单位之间的不平衡交换,从而产生不同等位基因
关于DNA双螺旋的基本信息介绍
DNA双螺旋(外文名DNA double helix)指的是一种核酸的构象,在该构象中,两条反向平行的多核苷酸链相互缠绕形成一个右手的双螺旋结构。 DNA双螺旋的碱基位于双螺旋内侧,磷酸与糖基在外侧,通过磷酸二酯键相连,形成核酸的骨架。碱基平面与假想的中心轴垂直,糖环平面则与轴平行,两条链皆为
关于随体DNA的基本信息介绍
随体DNA更广泛地是指染色体DNA和独立存在的小型DNA。 若将DNA放在氯化铯中,用平衡密度梯度离心,则按GC含量,在特定的密度部位形成带。采用该法将从细胞抽提的DNA分离,除主要的DNA带外,有时可出现小的带,后者就叫做随体DNA。有的随体DNA像细胞内的质环DNA那样是独立的分子,但也有
在原位杂交中-为什么rna可以和dna杂交
因为碱基互补配对啊。RNA不光和DNA杂交,还可以和RNA杂交。RNA原位核酸杂交又称RNA原位杂交组织化学或RNA原位杂交。该技术是指运用cRNA或寡核苷酸等探针检测细胞和组织内RNA表达的一种原位杂交技术。其基本原理是:在细胞或组织结构保持不变的条件下,用标记的已知的RNA核苷酸片段,按核酸杂交
痘苗DNA检测实验——Southern-杂交法
实验方法原理以前,用 HindIII 限制性内切核酸酶消化鉴定痕苗病毒 DNA。大部分的外源基因插入重组病毒的 TK 基因中,TK 基因位于 HindIII 5.1 kb 的 J 片段上。这样在重组病毒中,如果插入片段上没有 HindIII 内切酶位点,则J片段就会增大。如果缺乏 HindIII 5
揭开DNA杂交动力学之谜
新南威尔士大学医学与健康学院EMBL澳大利亚单分子科学节点的纳米科学家和理论物理学家联合起来,揭开了控制两条匹配的DNA链完全结合(或杂交)形成双链DNA的复杂机制。他们的研究结果发表在《核酸研究》杂志上。大约50年前提出了一个理论,假设DNA链杂交的速度是由最初的接触决定的,这种接触导致DNA链上
杂交育种的杂交类型介绍
品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交(种内杂交)品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交(属内杂交)同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交” 。同一属或同一科不同属的不