关于葡萄糖苷酶的主要催化机理介绍
1、保留型酶的“两步法”机制 大多数葡萄糖苷酶都是保留型葡萄糖苷酶,其催化机理通常都遵循“两步法”机制。 第一步:作为亲核基团的羧基负离子亲核进攻糖苷键上的异头碳,同时作为广义酸碱对的另一个催化羧基上的氢与糖苷键上的氧原子形成氢键,第一次形成含氧碳正离子样过渡态(Oxocarbenium-like transition state)。经过键的形成有断裂,糖基分子的异头碳构型发生第一次翻转,并与亲核羧基形成酯键,生成糖基-酶共价中间体,同时释放出一分子糖配基。 第二步:糖基受体分子的活性羟基氢与发生解离的广义酸碱对羧基离子相互作用,同时受体分子的活性羟基氧亲核进攻糖基-酶共价中间体中糖基分子的异头碳,再次形成含氧碳正离子样过渡态,最终使得异头碳构型发生第二次翻转,并与受体羟基氧形成共价键,完成反应。 2、翻转型酶的差异 在翻转型葡萄糖苷酶中,由于催化残基与底物之间的距离跟保留型酶的有所不同,导致受体分子从相反的方向进......阅读全文
临床化学检查方法介绍尿α葡萄糖苷酶介绍
尿α-葡萄糖苷酶介绍: 利用比色法测定尿液α—Glu的活性。尿α-葡萄糖苷酶正常值: 10.51-23.63U/g·Cr尿α-葡萄糖苷酶临床意义: 升高:肾实质疾病、药物性肾病。尿α-葡萄糖苷酶注意事项: 尿液检查是体检中较为常规的检查项目。尿液标本受饮食、运动、药物等因素的影响较大,特别是
β葡萄糖苷酶的纯化方法
粗提的β-葡萄糖苷酶可采用硫酸铵沉淀或用乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀等方法初步分离。β-葡萄糖苷酶的进一步纯化,往往是根据具体情况,采用多种方法逐步分离。目前分离β-葡萄糖苷酶的方法较多,其中离子交换柱层析和凝胶过滤柱层析两种手段结合使用最为普遍,多数是先离子交换柱层析,后用凝胶过滤柱层析。离子交换柱层
葡萄糖苷酶的功能作用
葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一。β-葡萄糖苷酶可以参与纤维素的代谢以及多种生理生化途径,α-葡萄糖苷酶更是直接参与淀粉及糖原的代谢途径。这类酶的功能发生异常会导致出现代谢类的疾病,同时这类酶也是多种药物与抑制剂的作用靶点,用以调节人体内的糖化学代谢。
β葡萄糖苷酶的纯化方法
粗提的β-葡萄糖苷酶可采用硫酸铵沉淀或用乙醇、丙酮等有机溶剂沉淀等方法初步分离。β-葡萄糖苷酶的进一步纯化,往往是根据具体情况,采用多种方法逐步分离。目前分离β-葡萄糖苷酶的方法较多,其中离子交换柱层析和凝胶过滤柱层析两种手段结合使用最为普遍,多数是先离子交换柱层析,后用凝胶过滤柱层析。离子交换柱层
β葡萄糖苷酶的提取方法
不同来源的β-葡萄糖苷酶,其提取方法也有所不同。动植物体及大型真菌中的糖苷酶一般需要对酶源进行组织捣碎,然后用缓冲液浸提。常用的缓冲液有磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液等。pH值一般选用酶的稳定pH值;提取温度适于低温,一般为4 ℃。利用微生物发酵法生产β-葡萄糖苷酶是β-葡萄糖苷酶的另一
酶的催化机理介绍
催化机理酶的催化机理和一般化学催化剂基本相同,也是先和反应物(酶的底物)结合成络合物,通过降低反应的活化能来提高化学反应的速度,在恒定温度下,化学反应体系中每个反应物分子所含的能量虽然差别较大,但其平均值较低,这是反应的初态。S(底物)→P(产物)这个反应之所以能够进行,是因为有相当部分的S分子已被
β半乳糖苷酶的主要来源介绍
β-半乳糖苷酶的主要来源有: ① 细菌、霉菌、酵母等微生物,其中细菌中的乳酸菌、大肠杆菌等,霉菌中的米曲霉、黑曲霉等,酵母中的脆壁克鲁维酵母、乳酸克鲁维酵母等,放线菌中的天蓝色链霉菌等; ② 植物,尤其是杏、扁桃和苹果等; ③ 哺乳动物,特别是幼小哺乳动物的小肠中。仅来源于微生物的β-半乳
生化检测项目精浆α葡萄糖苷酶介绍
精浆α-葡萄糖苷酶介绍: 精液中的α-葡萄糖苷酶主要由附睾上皮细胞分泌,是附睾的特异性酶和标记酶,可催化蛋白质的糖类组成部分或低聚糖的分解,为精子成熟提供适宜的能量,该酶可作为附睾的功能性指标。精浆α-葡萄糖苷酶正常值: (42.7±20.9)U/L。精浆α-葡萄糖苷酶临床意义: 异常结果:
临床化学检查方法介绍精浆α葡萄糖苷酶介绍
精浆α-葡萄糖苷酶介绍: 精液中的α-葡萄糖苷酶主要由附睾上皮细胞分泌,是附睾的特异性酶和标记酶,可催化蛋白质的糖类组成部分或低聚糖的分解,为精子成熟提供适宜的能量,该酶可作为附睾的功能性指标。精浆α-葡萄糖苷酶正常值: (42.7±20.9)U/L。精浆α-葡萄糖苷酶临床意义: 异常结果:
葡萄糖苷酶的基本信息
葡萄糖苷酶是糖苷水解酶大家族中的一大类酶,主要功能为水解葡萄糖苷键,释放出葡萄糖作为产物,是生物体糖代谢途径中不可或缺的一类酶。
葡萄糖苷酶的来源与分布
葡萄糖苷酶来源广泛,几乎所有以碳水化合物为能源的具有细胞结构的生物体内都有所存在。根据具有糖类活性的酶数据库(Carbohydrate-Active enZYmes Database,CAZy)依据蛋白质晶体结构的同源性与功能的相似性所进行的归类 [2] ,可将现已发现的糖苷水解酶分为133个糖苷
β葡萄糖苷酶的酶学性质
不同来源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等电点、最适反应pH值、pH值稳定性范围、最适反应温度和热稳定性范围上均有很大差别(见表1)。1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其来源不同,它们的相对分子量也可能不同,而且它们的结构和组成也有很大差异。β-葡萄糖苷酶的相对分子量范围
β葡萄糖苷酶的酶学性质
不同来源的β-葡萄糖苷酶在氨基酸序列、分子量、比活力、等电点、最适反应pH值、pH值稳定性范围、最适反应温度和热稳定性范围上均有很大差别(见表1)。3.1 β-葡萄糖苷酶的分子量大小β-葡萄糖苷酶由于其来源不同,它们的相对分子量也可能不同,而且它们的结构和组成也有很大差异。β-葡萄糖苷酶的相对分子量
β葡萄糖苷酶的特性和应用
β-葡萄糖苷酶是纤维素酶系的重要组分,可将纤维二糖、可溶性纤维寡糖水解成葡萄糖及相应配基,水解β-糖苷键及合成新的糖衍生物。瑞士木霉β-葡萄糖苷酶,通过基因敲除、氨基酸突变,突变体酶活力比野生型提高了143倍。新鞘氨醇杆菌β-葡萄糖苷酶基因在E. coli成功表达,可转化异黄酮糖苷生成相对应的苷元。
葡萄糖苷酶的来源与分布
葡萄糖苷酶来源广泛,几乎所有以碳水化合物为能源的具有细胞结构的生物体内都有所存在。根据具有糖类活性的酶数据库(Carbohydrate-Active enZYmes Database,CAZy)依据蛋白质晶体结构的同源性与功能的相似性所进行的归类 [2] ,可将现已发现的糖苷水解酶分为133个糖苷
β葡萄糖苷酶的发现与研究
1837年,Liebig和Wohler首次在苦杏仁汁中发现了β-葡萄糖苷酶。β-葡萄糖苷酶(EC 3.2.1.21)的英文名是β-glucosidase,属于水解酶类,又称β-D-葡萄糖苷水解酶,别名龙胆二糖酶、纤维二糖酶和苦杏仁苷酶。它可催化水解结合于末端非还原性的β-D-糖苷键,同时释放出配基与
关于葡糖苷酶的应用介绍
葡萄糖苷酶因为其特性,主要应用于两个方面 纤维素的水解与利用:主要涉及各种β-葡萄糖苷酶与纤维素水解相关酶类,目的即将难溶的纤维素变为可溶的、易于利用的小分子寡糖。 功能性低聚糖的合成:主要涉及葡萄糖苷酶的转糖苷活力,目的即通过具有转苷活力的葡萄糖苷酶合成功能性低聚葡聚糖、低聚麦芽寡糖、低聚
关于葡糖苷酶的分类介绍
一、根据水解方式分类 根据不同葡萄糖苷酶对寡糖底物的水解方式,可将其分为外切(exo-)葡萄糖苷酶与内切(endo-)葡萄糖苷酶。外切葡萄糖苷酶是指从寡糖底物的一端(还原端或非还原端)进行水解的葡萄糖苷酶,而内切葡萄糖苷酶则是指从寡糖底物的中间部分开始水解的葡萄糖苷酶。 二、根据水解糖苷键的
β葡萄糖苷酶应用及展望
目前对β-葡萄糖苷酶的理化性质研究得比较透彻,但是对它的应用开发研究力度还是不够。在饲料工业上,β-葡萄糖苷酶通过破解富含纤维的细胞壁,使其包含的蛋白质、淀粉等营养物质释放出来并加以利用,同时又可将纤维降解为可被畜禽机体消化吸收的还原糖,从而提高饲料利用率。此外,在食品开发上,其作为特殊的风味酶已得
β葡萄糖苷酶应用及展望
目前对β-葡萄糖苷酶的理化性质研究得比较透彻,但是对它的应用开发研究力度还是不够。在饲料工业上,β-葡萄糖苷酶通过破解富含纤维的细胞壁,使其包含的蛋白质、淀粉等营养物质释放出来并加以利用,同时又可将纤维降解为可被畜禽机体消化吸收的还原糖,从而提高饲料利用率。此外,在食品开发上,其作为特殊的风味酶已得
N乙酰葡萄糖苷酶
β-N-乙酰氨基葡萄糖苷酶(NAG)可水解β-N-乙酰氨基葡萄糖苷,也能水解β-N-乙酰氨基半乳糖苷。该酶广泛存在于各种组织器官、体液、血细胞中,是溶酶体中的一种酸性水解酶。其测定方法有比色法和荧光光度法,血、尿NAG活性测定对反映肾实质病变,尤其是急性损伤和活动期病变更 敏感,主要用于早期肾损
葡萄糖苷酶如何被发现?
葡萄糖苷酶的发现可以追溯到19世纪末。当时,科学家们发现一些微生物能够分解淀粉等复杂的碳水化合物,产生单糖和低聚糖等产物。这些微生物被认为具有一种特殊的酶类,能够催化这些反应。 20世纪初,科学家们开始研究这些微生物中的酶类,并成功地从其中分离出了一种能够水解淀粉的酶类。这种酶类被命名为“淀粉
葡萄糖苷酶来源与分布
葡萄糖苷酶来源广泛,几乎所有以碳水化合物为能源的具有细胞结构的生物体内都有所存在。根据具有糖类活性的酶数据库(Carbohydrate-Active enZYmes Database,CAZy)依据蛋白质晶体结构的同源性与功能的相似性所进行的归类 ,可将现已发现的糖苷水解酶分为133个糖苷水解酶家族
β葡萄糖苷酶活性测定方法
β-葡萄糖苷酶的活性测定方法很多,常见反应底物有对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(pNPG)、纤维二糖、水杨苷等。由于酶与pNPG作用产生的对硝基苯可用分光光度法在400 nm处测定, 方法简单、反应快速、反应活性大,所以大多数实验采用pNPG作为底物的分光光度法测定酶活性。由于测定葡萄糖含量的方法很多,
β葡萄糖苷酶活性测定方法
β-葡萄糖苷酶的活性测定方法很多,常见反应底物有对硝基苯-β-D-葡萄糖苷(pNPG)、纤维二糖、水杨苷等。由于酶与pNPG作用产生的对硝基苯可用分光光度法在400 nm处测定, 方法简单、反应快速、反应活性大,所以大多数实验采用pNPG作为底物的分光光度法测定酶活性。由于测定葡萄糖含量的方法很多
尿N乙酰βD氨基葡萄糖苷酶的介绍
尿液N-乙酰β-D-氨基葡糖苷酶活性反映肾实质病变,对急性损伤和活动期特别灵敏,可用于早期肾损伤的监测和病程的观察。
α葡萄糖苷酶抑制剂的种类
临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物主要是:阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇。这三种药物发挥作用时,各有不同的特点。米格列醇对各种α-葡萄糖苷酶均有强烈的抑制作用,其中对蔗糖酶和葡萄糖淀粉酶的抑制效率最高,原因可能是米格列醇与葡萄糖的结构更为相似,更接近酶的活性中心;阿卡波糖主要竞争抑制小肠上皮刷状
简述葡萄糖苷酶的重要作用
葡萄糖苷酶是生物体内糖代谢途径中的重要成员之一。β-葡萄糖苷酶可以参与纤维素的代谢以及多种生理生化途径,α-葡萄糖苷酶更是直接参与淀粉及糖原的代谢途径。这类酶的功能发生异常会导致出现代谢类的疾病,同时这类酶也是多种药物与抑制剂的作用靶点,用以调节人体内的糖化学代谢。
葡萄糖苷酶的化学结构是什么
葡萄糖苷酶是一种蛋白质,其化学结构是由氨基酸组成的多肽链。根据不同的来源和功能,葡萄糖苷酶的氨基酸序列和空间结构可能会有所不同。 一般来说,葡萄糖苷酶的分子量较大,通常在50-200kDa之间。它们通常由多个亚基组成,形成多聚体结构。葡萄糖苷酶的活性中心位于分子表面,由一些特定的氨基酸残基组成
α葡萄糖苷酶抑制剂的种类
临床上应用的α-葡萄糖苷酶抑制剂类药物主要是:阿卡波糖、伏格列波糖和米格列醇。这三种药物发挥作用时,各有不同的特点。米格列醇对各种α-葡萄糖苷酶均有强烈的抑制作用,其中对蔗糖酶和葡萄糖淀粉酶的抑制效率最高,原因可能是米格列醇与葡萄糖的结构更为相似,更接近酶的活性中心;阿卡波糖主要竞争抑制小肠上皮刷状