免疫酶测定法简介

免疫酶测定法是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法。本法将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物高效催化作用结合起来,根据酶作用底物后显色,以颜色变化判断实验结果。目前常用的方法有酶免疫组化技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)。前者测定细胞表面抗原和组织内的抗原,后者主要测定可溶性抗原或抗体。用酶标测定仪测定光密度值(OD)反应抗原或抗体的含量,常用于标记的酶有辣根过氧化物酶(HRP),碱性磷酸酶(ALP),葡萄糖氧化酶等,其中以HRP应用最广。......阅读全文

免疫比浊测定法的种类

1.免疫透射比浊法 抗原抗体结合后,形成免疫复合物,在一定时间内复合物聚合出现浊度。当光线通过溶液时,可被免疫复合物吸收。免疫复合物量越多,光线吸收越多。光线被吸收的量在一定范围内与免疫复合物的量成正比。利用比浊计测定光密度值,复合物的含量与光密度值成正比,同样当抗体量一定时,光密度值也与抗原含量成

放射免疫测定法原理

放射免疫测定法原理:放射免疫RIA:以标记抗原与反应系统中未标记抗原竞争结合特异性抗体来测定的待检样品中抗原量。 免疫放射IRMA:以过量标记抗体与抗原非竞争结合,采用固相免疫吸附载体分离游离和结合标记抗体。 其他:放射受体分析RRA;放射配体结合分析RBA

放射免疫测定法介绍

放射免疫测定法是用放射性核素标记抗原或抗体进行免疫学检测的技术。该法结合了放射性核素高灵敏性和抗原抗体反应的特异性,使检测的灵敏度达到pg水平。常用于标记的放射性核素为125碘和131碘,分为液相和固相两种方法。该法常用于胰岛素,甲状腺素,生长激素和IgE等微量物质的测定。

相对密度测定法简介

目录1 拼音2 比重瓶法3 韦氏比重秤法1 拼音xiāng duì mì dù cè dìng fǎ相对密度系指在共同特定的条件下,某物质的密度与水的密度之比。除另有规定外,温度为20℃。某些药品具有一定的相对密度。纯度变更,相对密度亦随同改变。测定相对密度,可以区别或检查药品的纯杂程度。液体药品的

常用酶免疫测定法检测艰难梭菌感染的敏感度差

最近,美国学者Lance R.Peterson等对艰难梭菌感染(CDI)的10种诊断方法进行了试验,他们发现,只有美国食品与药物管理局(FDA)批准的实时聚合酶链反应(qPCR)和1种谷氨酸脱氢酶检测法的敏感性不显著劣于培养法,而常用的酶免测定法的敏感度均低于50%。该研究发表于《美国临床病理学杂志

酶联免疫法的基本原理简介

  ①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。  ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原

发光免疫测定法的实验目的

中文名称发光免疫测定英文名称luminescent immunoassay;LIA定  义以发光物质标记抗原或抗体,免疫反应后引发发光反应,根据发光强度对抗体或抗原进行的测定。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

免疫测定法方法学评价

免疫测定法几乎可以用于所有细胞因子的检测。优点:①特异性高,使用特异的单克隆抗体,可用于单一细胞因子的检测;②操作简便、快速,无需依赖细胞株,故不需维持培养,可操作性增加,容易推广和便于普查;③影响因素相对较少且容易控制,重复性好,方法容易标准化。缺点:①所测定的只是细胞因子的蛋白含量,与其生物活性

孕酮的放射免疫测定法

孕酮的放射免疫测定法很敏感,但由于孕酮是半抗原,须先同牛血清白蛋白结合,才能注射于家兔,使之产生抗体。牛血清白蛋白结合在孕酮上的不完全部位对抗血清的特异性有很大关系,若结合在C3抗血清无特异性,结合在C6则特异性高,结合在Cll特异性更好。孕酮试剂盒已广泛应用于临床,介绍如下。一、基本原理此法采用双

酶活性测定法的测定方式介绍

  酶活力的测定可采用两种方式:  其一是测定完成一定量反应所需的时间,其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。  终点法  该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。  其一个发展是采用检测器对反应进行连

酶活性测定法的常用方法介绍

  常用的测定方法有取样法和连续法。  取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应系统中取出一定量的反应液,并用适当方法停止其反应,再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析,求得单位时间内酶促反应的变化量。  连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上的不同,在反应过程中对反应系统添加酶的变性剂以终止

免疫学技术专题:斑点金免疫渗滤测定法(DIGFA)

基本原理斑点金免疫渗滤测定法是在斑点免疫渗滤测定法基础上,改用胶体金标记物代替酶,省去底物显色的步骤。试验方法是以硝酸纤维素膜(NC膜)为载体,将试剂及标本滴加在膜上,通过渗滤而逐步反应。全过程可于数分钟内完成,阳性结果在膜上呈红色斑点。试剂及材料1. 渗滤装置:为一塑料小盒(4x3x0.6cm

胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法

方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶

胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法

方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶

胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法

方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶

胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法

方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶

异相酶免疫试验和均相酶免疫试验

  Ag为待测抗原,AgAb-E为结合标记物,Ab-E为游离标记物。若抗原-抗体反应影响标记物中酶的活性,如酶活性消失,即结合标记物(AgAb-E)无酶活性,游离标记物(Ab-E)有酶活性;  (1) 检测时不需分离结合标记物(AgAb-E)和游离标记物(Ab-E),检测体系中标记物酶活性(Ab-E

免疫亲和柱荧光计快速测定法

  (1)试剂与设备   ①4-系列真菌毒素专用荧光计。   ②均质器(250mL)。   微量移液器(0.5mL)。   涡流混合器。   ⑤塑料注射器(60mL)。   ⑥VICAM T-2毒素亲和柱。   ⑦聚乙二醇(PEG),相对分子质量8000。   色谱级甲醇。   ⑨

酶联免疫吸附测定法的概述

  酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。  从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定

化学发光免疫测定法介绍

化学发光免疫测定(CLIA)亦称化学发光标记免疫测定,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体(化学发光剂标记物),与待测标本中相应抗体或抗原、磁颗粒性的抗原或抗体反应,通过磁场把结合状态(沉淀部分)和游离状态的化学发光剂标记物分离开来,然后加入发光促进剂进行发光反应,通过对发光强度的检测进行定量或定性检测

放射免疫测定法测定睾酮

放射免疫测定法:睾酮主要产生于睾丸小叶曲精管之间的间质细胞,此外肾上腺皮质也能合成。当标本中加入H睾酮和睾酮抗体即产生竞争抑制作用,在反应系统中,当H睾酮和其抗体量保持恒定,则标记抗体复合物的形成量受未标记抗原量所制约,用葡聚糖加膜活性炭进行分离,使结合标记抗原与游离标记抗原分开,测定沉淀的结合部分

酶联免疫吸附测定法呕吐毒素

呕吐毒素的介绍脱氧雪腐镰刀菌烯醇,又称为呕吐毒素,属单端孢霉烯族化合物。该毒素是F.镰刀菌霉(主要是 F.graminearum h 和 F.culmorum)的二级代谢产物,化学名为3α,3β,7α,15-四羟基镳草镰刀菌-9-烯-8-酮。这类真菌大多在低温、潮湿和收割季节,在谷物庄稼中慢慢生长。

循环免疫复合物补体相关测定法

  IgG和IgM类抗体与抗原结合后,重链CH2区的补体结合点暴露,可以固定C1q并激活补体的系列反应,这是利用补体有关技术检测免疫复合物的基础。  1.C1q结合试验:将待检血清先行加热56℃30min,以灭活其中的补体和破坏已与CIC结合的C1q,空出补体结合点。CIC与C1q的结合可用多种方法

酶联免疫吸附测定法的概述

  酶联免疫测定方法是以抗原和抗体分子为测定 靶标的方法,亦是目前最为常用的实验室诊断方法之一。  从理论上说,一种 生物或生理活性物质,只要有办法得到其特异的抗体,就可以建立这种物质的酶联免疫测定方法。在以前看来一些难以进行质量测定的微量生物活性物质,如受体、 细胞因子以及酶等均可使用酶联免疫测定

关于蛇毒的免疫学测定法介绍

  光学免疫分析(oia)基于spr原理,将单分子层薄膜涂在硅芯片基质表面,蛇毒与薄膜的特异性结合会导致入射白光产生金黄色至蓝紫色的反射光。免疫学测定法可对血、尿等生物样品中的4种类型的蛇毒的原型同时进行定性和半定量检测,lod为0.2~1.6 μg/l。荧光免疫技术结合了荧光检测的高灵敏度和免疫法

酶联免疫吸附测定法的原理

酶联免疫吸附测定法(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)是一种常用的免疫学检测技术,用于定量或定性检测样品中的抗原或抗体。基本原理是将抗原或抗体固定在固相载体(如 96 孔酶标板)表面,然后加入待检测的样品,使其中的抗原或抗体与固相载体上的抗原或抗体结合。

胃蛋白酶测定法的相关介绍

  方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法  应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。  本方法适用于胃蛋白酶。  方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。  试剂:  1. 血红蛋白试液  2.

关于胰蛋白酶的测定法介绍

  取底物溶液3.0ml,加0.001mol/L盐酸溶液200μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于25.0℃±0.5℃)3.0ml,立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A),在253nm的波长处,每

蛋白酶的测定实验——Anson-测定法

实验方法原理血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于

免疫酶染色试验_细胞免疫酶染色法

细胞免疫酶染色法(以检测血清中 EB 病毒 IgA 抗体为例说明)实验方法原理免疫酶染色试验 (immunoenzymatic staining test, IEST) 是用酶(如辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶等)标记已知抗体或抗原,与相应抗原或抗体结合,形成酶标记抗体-抗原复合物,复合物中的酶在遇到相