酶活性测定法的测定方式介绍
酶活力的测定可采用两种方式: 其一是测定完成一定量反应所需的时间,其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其一个发展是采用检测器对反应进行连续跟踪,并在反应达到某一程度时,精确地自动记录所需要的时间,这就是酶分析自动化中的固定浓度法;另一个发展是作成简便的酶检测纸片。 动力学法 该方式测定原理是:在一定条件下,酶促反应速度和酶浓度成正比,因此测得反应速度就需要求得酶浓度。待测的酶浓度是影响反应速度的唯一因素,其他因素都应处于最适于酶发挥催化作用的水平,为此应选择适宜的底物浓度、缓冲体系、温度,并向反应系统中添加必要的辅助因子。......阅读全文
酶活性测定法的测定方式介绍
酶活力的测定可采用两种方式: 其一是测定完成一定量反应所需的时间,其二是测定单位时间内的酶催化的化学反应量。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其一个发展是采用检测器对反应进行连
酶活性测定法的常用方法介绍
常用的测定方法有取样法和连续法。 取样法是在酶反应开始后不同的时间,从反应系统中取出一定量的反应液,并用适当方法停止其反应,再根据产物和底物在化学性质上的差别进行分析,求得单位时间内酶促反应的变化量。 连续法则是基于底物和产物在物理化学性质上的不同,在反应过程中对反应系统添加酶的变性剂以终止
酶活性测定的方式
酶促反应速度的测定可采用两种方式: 一、测定完成一定量反应所需的时间; 二、测定单位时间内的酶促反应量。前者称为终点法,后者称为动力学法。 终点法 该方式是在特定条件下,将样品中要检知的酶作用一定量的底物,然后根据反应进行到某一程度(即达到某一指标)所需要的时间长短来估计酶的活力。 其
酶的活性调节方式介绍
酶的活性调节主要包括四种方式:变构调节、共价修饰调节、酶原激活以及调节蛋白的调控。
酶的活性调节方式
酶的活性可以通过以下几种方式进行调节:一、酶活性的别构调节概念:别构酶具有别构效应,即一些小分子化合物与酶蛋白分子活性中心以外的某一部位特异结合,引起酶蛋白分子构象变化,从而改变酶的活性。调节方式:别构激活:使酶活性增强的效应。通常由底物或底物以外的别构激活剂引起。别构抑制:使酶活性降低的效应。可由
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微
趋化活性测定法测定细胞因子活性
具有趋化活性的细胞因子,也称趋化因子,诸如IL-8、IL-16、PANTES、MCP及MIP等,能诱导中性粒细胞、单核-巨噬细胞或淋巴细胞等定向迁移。其诱导细胞迁移的方式包括趋化性和化学增活性。趋化性是诱导细胞由趋化因子低浓度处向趋化因子高浓度处做定向移动的特性,可采用琼脂糖和Boyden盲端微
酶测定法实验
在本单元中,用一种较简单的方法测定它对核心 RNA 聚合酶自非特异性模板 poly(dAT) 起始转录的刺激作用。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南,作者:朱厚础。试剂、试剂盒核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液
酶测定法实验
试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶纯σ32 标准品纯化的 σ32 样品核心 RNA 聚合酶-σ32 复合物样品[α-32P]UTP终止液DEAE-纤维素(DE81) 纸片P04 清洗缓冲液乙醇反应液仪器、耗材 水浴锅实验步骤 材料与设备核心 RNA 聚合酶 (2.3 mg/ml)纯σ32 标准品 (
酶测定法实验
酶测定法实验 试剂、试剂盒 核心 RNA 聚合酶 纯σ32 标准品 纯化的 σ32 样品
关于胰蛋白酶的测定法介绍
取底物溶液3.0ml,加0.001mol/L盐酸溶液200μl,混匀,作为空白。另取供试品溶液200μl,加底物溶液(恒温于25.0℃±0.5℃)3.0ml,立即计时,混匀,使比色池内的温度保持在25℃±0.5℃,照紫外-可见分光光度法(2010年版药典二部附录Ⅳ A),在253nm的波长处,每
胃蛋白酶测定法的相关介绍
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法 应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。 本方法适用于胃蛋白酶。 方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。 试剂: 1. 血红蛋白试液 2.
酶蛋白的传统测定法
酶蛋白浓度测定的方法:酶浓度严格来说是指酶分子的质量浓度,常以酶蛋白浓度来表示。人体体液中的酶有几百种,除LPS、LCAT、ChE、铜氧化酶(CER)外,大多数酶的含量在μg/L水平甚至更低。因此,酶活性浓度的测定是主要测定方法。20世纪70年代以后,随着新技术特别是免疫学技术的发展,酶的定量分
免疫酶测定法简介
免疫酶测定法是一种用酶标记一抗或二抗检测特异性抗原或抗体的方法。本法将抗原抗体反应的高度特异性与酶对底物高效催化作用结合起来,根据酶作用底物后显色,以颜色变化判断实验结果。目前常用的方法有酶免疫组化技术和酶联免疫吸附试验(ELISA)。前者测定细胞表面抗原和组织内的抗原,后者主要测定可溶性抗原或抗体
脂肪酶的活性测定方法介绍
方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最
关于溶酶体酶活性的测定方法介绍
溶酶体贮积症的诊断是通过酶活性测定或测代谢产物进行的。过去测酶活性的方法与步骤比较复杂,底物用量较大。1980年后荷兰 Erasmus大学遗传代谢病试验室应用微量酶活性测定法获得成功。它使用了新的人工合成底物,提高了实验的灵敏度及准确性, 简化了实验步骤。1990年中国医学科学院基础医学研究所医
酶活性的测定方法
一般采用测定酶促反应初速度的方法来测定活力,因为此时干扰因素较少,速度保持恒定。反应速度的单位是浓度/单位时间,可用底物减少或产物增加的量来表示。因为产物浓度从无到有,变化较大,而底物往往过量,其变化不易测准,所以多用产物来测定
酶活性的测定实验
连续性检测 实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量
酶活性的测定实验
酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际
酶的活性及浓度的调节方式
调节酶的浓度酶浓度的调节主要有两种方式,一种是诱导或抑制剂的合成;一种是调节酶的降解。调节酶的活性激素通过与细胞膜或细胞内受体相结合而引起一系列生物学效应,以此来调节酶活性。反馈抑制调节许多小分子物质的合成是由一连串的反应组成的,催化此物质生成的第一步的酶,往往被它们的终端产物抑制。这种抑制叫反馈抑
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
酶活性测定实验
实验方法原理U/L=K•ΔA/min实验步骤1. 诱导试剂.2. 开机预温达37度.3. 选取测定程序.4. 测试:加入试剂准确计的30秒后测定读取吸光度.以后每隔30秒测定一次.5. 实验结果:计算ΔA/min求出测定结果.
中药生物活性测定法的基本内容
1.实验条件 试验系选择 生物活性测定所用的试验系,包括整体动物、离体器官、血清、微生物、组织、细胞、亚细胞器、受体、离子通道和酶等。试验系的选择与实验原理和制定指标密切相关,应选择背景资料清楚、影响因素少、检测指标灵敏和成本低廉的试验系统。应尽可能研究各种因素对试验系的影响,采取必要的措施对影
生物活性测定法的基本原理
生物活性测定法是以药物的生物效应为基础,以生物统计为工具,运用特定的实验设计,测定药物有效性的一种方法,从而达到控制药品质量的作用。其测定方法包括生物效价测定法和生物活性限值测定法。
蛋白酶的测定实验——Anson-测定法
实验方法原理血红蛋白不是很贵,被用来做这个实验。由于处于天然结构的蛋白质通常可以抵制蛋白酶的攻击,因此首先用尿素使血红蛋白失活。分离非水解蛋白质后,利用 Folin-Ciocaheau 试剂的上清液测量消化产物。这种试剂优先识别色氨酸和酪氨酸,但是也可以识别半胱氨酸和组氨酸。'实验温度取决于
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法
方法名称: 胃蛋白酶的测定—胃蛋白酶测定法应用范围: 本方法采用胃蛋白酶测定法测定胃蛋白酶的效价。本方法适用于胃蛋白酶。方法原理: 精密称取本品适量,加盐酸溶液制成每1mL中约含0.2-0.4个单位的溶液,照胃蛋白酶测定法,测定胃蛋白酶的效价。试剂: 1. 血红蛋白试液2. 三氟醋酸溶液3. 盐酸溶
脂肪酶的活性测定
方法:⒈粗酶液的制备用电子天平分别称取粗脂肪酶0.010 g、0.020 g 和0.030 g, 用蒸馏水溶解并定容至100 mL, 配成浓度分别为0.01%、0.02% 和0.03%的粗酶液。⒉实验设计本实验以10 mL色拉油为底物,以酶用量、水解温度、反应时间为因素,通过酸价的测定选定其水解的最