基因突变检测的检测方法及临床应用

常见检测方法 1.焦磷酸测序法 测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。 2.单链构象异构多态分析技术 依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳的迁移率不同,从而将正常链与突变链分离出来。与测序法相比,灵敏性更高。 3.聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析技术 通过聚合酶链反应扩增出可能包含突变的基因组片段,然后利用限制性内切酶对这些聚合酶链反应片段进行酶切,电泳检测后根据酶切片段的长度差异来判断是否存在突变位点。该法一般用于检测已知的突变位点。 4.探针扩增阻滞突变系统 又称等位基因特异聚合酶链反应,是利用TapDNA聚合酶缺少3′到5′外切酶活性,聚合酶链反应引物的3′端末位碱基必须与其模板DNA互补才能有效扩增的原理。通过设计适当的引物以检测突......阅读全文

基因突变检测的检测方法及临床应用

  常见检测方法  1.焦磷酸测序法  测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。  2.单链构象异构多态分析技术  依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,

基因突变检测的临床应用

  基因突变检测可用于多种疾病的早期筛查、诊断及预后判断。多种恶性肿瘤,如恶性黑色素瘤、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌等存在不同比例的B-raf基因突变;结直肠癌、胰腺癌、肺癌等存在不同比例的K-ras基因突变。良性肿瘤的患者若是检出B-raf或K-ras基因突变,提示有肿瘤恶变的可能。PIK3CA基因突

基因突变检测的临床应用

  基因突变检测可用于多种疾病的早期筛查、诊断及预后判断。多种恶性肿瘤,如恶性黑色素瘤、甲状腺癌、结直肠癌、肺癌等存在不同比例的B-raf基因突变;结直肠癌、胰腺癌、肺癌等存在不同比例的K-ras基因突变。良性肿瘤的患者若是检出B-raf或K-ras基因突变,提示有肿瘤恶变的可能。PIK3CA基因突

抗体检测方法及临床应用

  方法  现在抗体检测的方法众多,除传统的沉淀反应,凝集试验,补体结合试验外,标记免疫测定(如酶联免疫测定、放射免疫测定、荧光免疫测定、发光免疫测定等)已成为主要的免疫测定技术,免疫印迹法也发挥了明显的作用,一些快速测定法(如快速斑点免疫结合试验)也被广泛使用。  临床应用  首先抗体检测用于诊断

基因突变检测的常见检测方法

  1.焦磷酸测序法  测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。  2.单链构象异构多态分析技术  依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳

基因突变检测的方法

  1.焦磷酸测序法  测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。  2.单链构象异构多态分析技术  依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其特定的第二构象,构象不同导致电泳

基因突变检测方法

基因突变检测方法:1.PCR-SSCP法是在非这性聚丙烯酰胺凝胶上,短的单链DNA和RNA分子依其大街基序列不同而形成不同构象,一个碱基的改变将影响其构象而导致其在凝胶上的移动速度改变。其基本原理为单链DNA在中性条件下会形成二级结构,这种二级结构依赖于其碱基组成,即使一个碱基的不同,也会形成不同的

肌酐检测的检测方法及临床意义

  检测方法  1.碱性苦味酸终点比色法  血清中的肌酐与苦味酸在碱性溶液中生成黄红色的苦味酸盐复合物,最初采用的方法是终点比色法,在510~520nm处测定其吸光度,由此计算血清肌酐浓度。  2.酶法测定  酶法测定肌酐主要是利用肌酐酶催化肌酐水解生成肌酸及其逆反应。  临床意义  若肾脏功能受损

降钙素原(PCT)检测及临床应用

       降钙素原(Procalcitonin, PCT)是一种由116个氨基酸组成、分子量为13kDa的糖蛋白,是血清降钙素(CT)的前体物,在人体内的半衰期约20-24小时,稳定性好。正常条件下,PCT在甲状腺C细胞中生成并裂解成降钙素。人血清PCT含量极低,约2.5pg/ml(运用高效液相

降钙素原(PCT)检测及临床应用

降钙素原(Procalcitonin, PCT)是一种由116个氨基酸组成、分子量为13kDa的糖蛋白,是血清降钙素(CT)的前体物,在人体内的半衰期约20-24小时,稳定性好。正常条件下,PCT在甲状腺C细胞中生成并裂解成降钙素。人血清PCT含量极低,约2.5pg/ml(运用高效液相色谱分析)。

细菌内毒素检测及临床应用

一 细菌内毒素定量检测法应用与发展近10年,人们对疾病病因、病理的认识不断深化,发现了许多疾病与内毒素的关系。由于很小剂量的内毒素即能引起极广泛的生物作用及病理作用,因而加强内毒素的检测研究便成为临床、公卫及药检等领域的重要课题。  细菌内毒素检查法又称鲎试验法,它是1964年由美国学者Levih和

cccDNA检测方法及应用价值

细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA(relaxed circularDNA,rcDNA)分子,其两条链均不是闭合的,其中负链较长,约3200个碱基,含有乙肝病毒基因组的全长基因,在其5’起始端与3’末端之间有一个数个碱基的“缺刻”(nick);正链较短,有较大的“缺口”(gap),其

关于基因突变检测常见的检测方法介绍

  1、基因突变检测— 焦磷酸测序法  测序法的基本原理是双脱氧终止法,是进行基因突变检测的可靠方法,也是使用最多的方法。但其过程繁琐、耗时长,灵敏度不高,对环境和操作者有危害,故在临床应用中存在一定的限制。  2、基因突变检测— 单链构象异构多态分析技术  依据单链DNA在某一种非变性环境中具有其

超敏C反应蛋白的检测及临床应用

一、C反应蛋白定义由肝细胞合成(1 - 19 mg/天)存在于人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中是炎性淋巴因子(白介素-6、白介素-1、肿瘤坏死因子)刺激肝脏和上皮细胞产生的急性相蛋白,是非特异性免疫机制的一部分。相对分子质量为115, 000~140, 000。 最早发现其和肺炎球菌的C多糖相结

血小板聚集功能的检测及临床应用

[关键词] 血小板;聚集功能;检测[中图分类号] R446.11   [文献标识码] B   [文章编号] 1008-8849(2006)03-0351-02      血小板聚集是血小板的主要功能之一。血小板在执行生理性止血作用的同时,在病理性血栓形成过程中起着先导而关键的作用,因此,检测血小板聚

超敏C反应蛋白的检测及临床应用

  一、C反应蛋白定义  由肝细胞合成(1-19mg/天)存在于人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中是炎性淋巴因子(白介素-6、白介素-1、肿瘤坏死因子)刺激肝脏和上皮细胞产生的急性相蛋白,是非特异性免疫机制的一部分。相对分子质量为115,000~140,000.最早发现其和肺炎球菌的C多糖相结合而

超敏C反应蛋白的检测及临床应用

一、C反应蛋白定义  由肝细胞合成(1 - 19 mg/天)存在于人的血清、脑脊液、胸腹水等多种体液中是炎性淋巴因子(白介素-6、白介素-1、肿瘤坏死因子)刺激肝脏和上皮细胞产生的急性相蛋白,是非特异性免疫机制的一部分。相对分子质量为115, 000~140, 000。  最早发现其和肺炎球菌的C多

血小板聚集功能的检测及临床应用

血小板聚集是血小板的主要功能之一。血小板在执行生理性止血作用的同时,在病理性血栓形成过程中起着先导而关键的作用,因此,检测血小板聚集功能对早期发现是否有血栓形成的危险存在以及阐明相关疾病的机制等有重要意义。1 原  理一般认为血小板的聚集始于各种诱导剂与血小板膜受体之间的相互作用。这种相互作用通过

血小板聚集功能的检测及临床应用

血小板聚集是血小板的主要功能之一。血小板在执行生理性止血作用的同时,在病理性血栓形成过程中起着先导而关键的作用,因此,检测血小板聚集功能对早期发现是否有血 栓形成的危险存在以及阐明相关疾病的机制等有重要意义。 1 原  理 一般认为血小板的聚集始于各种诱导剂与血小板膜受体之间的相互作用。这种相互作

血小板功能检测进展及临床应用

丛玉隆 李祖兰自2002年卫生部文件建议“废除Duke法检测出血时间、玻片法检测凝血时间,建议应用PT、APTT替代作为术前出血筛查”以来,凝血试验检测在国内发展迅速,使用凝血仪器的档次在国际上也处于很高的水平,但在临床应用上距离国际水平还相差太远。我们现在所说的凝血检测在绝大部分医院中指的仅仅是凝

血小板功能检测进展及临床应用

自2002年卫生部文件建议“废除Duke法检测出血时间、玻片法检测凝血时间,建议应用PT、APTT替代作为术前出血筛查”以来,凝血试验检测在国内发展迅速,使用凝血仪器的档次在国际上也处于很高的水平,但在临床应用上距离国际水平还相差太远。我们现在所说的凝血检测在绝大部分医院中指的仅仅是凝血四项,或再

实时荧光定量PCR检测及临床应用

实时荧光定量PCR技术的应用定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Appliedbiosystems公司推出,它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用对荧光信号积累的实时检测来监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的

血小板功能检测进展及临床应用

自2002年卫生部文件建议“废除Duke法检测出血时间、玻片法检测凝血时间,建议应用PT、APTT替代作为术前出血筛查”以来,凝血试验检测在国内发展迅速,使用凝血仪器的档次在国际上也处于很高的水平,但在临床应用上距离国际水平还相差太远。我们现在所说的凝血检测在绝大部分医院中指的仅仅是凝血四项,或再加

尿微量白蛋白检测及临床应用

      尿微量白蛋白指高于正常,但常规方法无法检出的白蛋白尿,他的检测作为早期肾损害诊断的重要指标已受到广泛重视,测定方法包括放射免疫法、ELASA法等。应用较多的是免疫透射比浊法,但报告方式不一,有的以每升尿中白蛋白量表示,有的以24小时排泄量表示,常用的报告方式是以白蛋白/肌酐比值报告。

尿微量白蛋白检测及临床应用

王玉国 徐宏亮 古晓杰   尿微量白蛋白指高于正常,但常规方法无法检出的白蛋白尿,它的检测作为早期肾损害诊断的重要指标已受到广泛重视,测定方法包括放射免疫法、ELASA法等。应用较多的是免疫透射比浊法,但报告方式不一,有的以每升尿中白蛋白量表示,有的以24小时排泄量表示,常用的报告方式是以白蛋白/

BNP检测的临床应用

在最近的几年中,许多人主张血浆BNP浓度检测在心衰病人的诊断、危险分层和治疗监测方面有非常重要的意义的。本文在此对当前的BNP进行一个总结,同时制订出一个临床应用的指南。BNP检测最有价值的应用就是在诊断领域,它可以帮助不是专家的|检验地带网|临床医师提高对心衰的诊断水平。在临床实践中,BNP检测最

基因突变的检测方法有哪些

基因突变的检测方法可以用放射性标记的基因探针进行检测

基因突变的检测方法有哪些?

从基因突变的性质来看,检测方法分为显性突变法、隐性突变法和回复突变法三类。①显性致死突变法,用待测物质处理雄性小鼠,使处理的雄鼠和未处理的雌鼠交配,观察母鼠子宫中的死胎数,死胎数愈多则说明诱发的显性致死突变愈多。这一方法适用于慢性处理,其优点是可靠性较大,而且测试对象是哺乳动物。缺点是不能区别出药物

凝血因子检测的临床意义及应用

因血浆中某一凝血因子缺乏造成凝血障碍并引起出血的病证分为两大类:    ①遗传性凝血因子缺乏性疾病。其特点是常自幼发生出血症状,有遗传家族史,除血友病甲和乙为性染色体隐性遗传外,一般均为常染色体隐性遗传,男女均可患病,常有近亲结婚史。该组疾病均为单个凝血因子缺乏,其中以Ⅷ因子缺乏(血友病甲)

凝血因子检测的临床意义及应用

因血浆中某一凝血因子缺乏造成凝血障碍并引起出血的病证分为两大类:①遗传性凝血因子缺乏性疾病。其特点是常自幼发生出血症状,有遗传家族史,除血友病甲和乙为性染色体隐性遗传外,一般均为常染色体隐性遗传,男女均可患病,常有近亲结婚史。该组疾病均为单个凝血因子缺乏,其中以Ⅷ因子缺乏(血友病甲)最常见,其他所有