巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍

常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有500ml、250ml、100ml等几种。2、培养瓶:根据培养细胞种类要求不同培养瓶的形态各异,用于细胞传代培养的细胞要求瓶壁厚簿均匀,便于细胞贴壁生长和观察,瓶口要大小一致,口径一般不小于1cm,允许吸管伸入瓶内任何部位,规格有200ml、100ml、50ml、25ml、10ml等几种。3、培养皿:用于开放式培养及其它用途。分直径30mm、60mm、120mm等几种。4、吸管:常用的有长吸管和短吸管两类,长吸管也称刻度吸管。其改良后管上部有球型刻度称改良吸管,刻度吸管用于移动液体。常用1ml和10ml两种。短吸管也叫滴管,分弯头和直头两种。5、离心管:离心管是细胞培养中......阅读全文

细胞培养中常用培养基及基本特性

  1、RPMI-1640 Medium   RPMI-1640广泛应用于哺乳动物、特殊造血细胞、正常或恶性增生的白细胞,杂交瘤细胞的培养,是目前应用十分广泛的培养基。主要用于悬浮细胞培养。其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴细胞、T细胞淋巴瘤细胞以及HCT-

细胞培养常用设备及实验技巧(二)

细胞的复苏 细胞复苏的原则——快速融化:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。具体操作 一、实验前准备:1.将水浴锅预热至37℃。2.用75%酒精擦拭紫外线照射30min的超净工作台台面。3.在超净工作

细胞培养常用设备及实验技巧(一)

常用设备准备室的设备:单蒸馏水蒸馏器、双蒸馏水蒸馏器、酸缸、烤箱、高压锅、储品柜(放置未消毒物品)、储品规(放置消毒过的物品)、包装台。配液室的设备:扭力天平和电子天平(称量药品)、PH计(测量培养用液PH值)、磁力搅拌器(配置溶液室搅拌溶液)。培养室的设备:液氮罐、储品柜(存放杂物)、日光灯和紫外

细胞培养常用器材及处理方法

一、玻璃器材   常用的玻璃器材有各种规格的玻璃瓶、培养瓶、培养皿、吸管、离心管等。   无论是初次使用还是培养后重复使用的玻璃器材均需要进行消毒处理。*使用的玻璃器材应先用自来水初步刷洗,然后用稀盐酸溶液(1%)浸泡过夜,再用自来水冲洗,后处理方法与重复使用的器皿的处理。重复使用的玻璃器皿的处理步

实验室细胞培养常用仪器设备

细胞培养实验室组建的基本要求:1、细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。2、细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。3、细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封

常用玻璃器皿的清洗方法

  (一)常用洗涤液和它们的使用方法  1.合成洗涤剂  市售的合成洗涤剂如洗衣粉、餐具洗洁剂等均可用于清洁玻璃器皿。其特点是价格低廉,使用方便,去油污力强。使用时配制成1%~2%的水溶液,将待清洁之玻璃器皿浸泡在洗涤剂溶液中刷洗。值得注意的是,因残留洗涤剂往往对实验结果影响较大,故此类洗涤剂洗过的

关于细胞培养的培养过程介绍

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

细胞培养常用设备及实验技巧(二)无菌操作

无菌室的灭菌:1.定期打扫无菌室:每周打扫一次,先用自来水拖地、擦桌子、超净工作台等,然后用3‰来苏尔或者新洁尔灭或者0.5%过氧乙酸擦拭。2.CO2孵箱(培养箱)灭菌:先用3‰新洁尔灭擦拭,然后用75%酒精擦拭或者0.5%过氧乙酸,再用紫外灯照射。3.实验前灭菌:打开紫外灯、三氧杀菌机、空气净化器

细胞培养试剂的常用配制成分有哪些?

现在很多领域的发展及其产品的研发过程都离不开对细胞的培养,而要有效培养细胞就要使用专业的细胞培养试剂,以确保能够为细胞提供良好的生存繁殖条件,同时也能够更好的用于观察和研究。那么在细胞培养试剂当中有哪些常用的配制成分呢? 1、水 活着的细胞也是有生命的,而水则是生命之源,所以在

细胞培养实验中细胞培养液的相关介绍

  现代生物技术均通过细胞作为载体来进行,无论是基因治疗、干细胞、克隆技术都在细胞内进行的。细胞的生长需要一定的营养环境,用于维持细胞生长的营养基质称为培养基,即指所有用于各种目的的体外培养、保存细胞用的物质,就其本意上讲为人工模拟体内生长的营养环境,使细胞在此环境中有生长和繁殖的能力。它是提供细胞

关于巨噬细胞的培养方法的介绍

  巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:  1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌

单细胞培养培养方法介绍看护培养法

有些植物细胞,一旦分离出来,不仅不能分裂、增殖,还可能死亡。看护培养法是用一块愈伤组织来哺育单细胞,使其正常分裂和增殖的培养方法。用微量移液管或小勺,将来自悬浮培养物或愈伤组织的单细胞转移到漂浮的定量滤纸上,滤纸下是旺盛生长的愈伤组织。几天之后,在愈伤组织看护影响下,在一般培养基中沉寂的细胞开始分裂

单细胞培养培养方法介绍平板培养法

将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封闭,在2

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

常用玻璃器皿的规格和使用

  化学检验实验室常用的玻璃器皿分两大类,一类作为容器用的玻璃器皿如试管、烧杯、试剂瓶等;一类为用于计量液体体积的计量玻璃量器如量筒、量杯、移液管等。其体积计量单位为毫升;因其计量的检定条件是以20℃为标准,故在量器上标示出mL、20℃的字样。  (一)刻度吸管  刻度吸管是化学检验实验室使用较多的

常用玻璃器皿的洗涤和保养

常用玻璃器皿的清洗方法(一)常用洗涤液和它们的使用方法1.合成洗涤剂市售的合成洗涤剂如洗衣粉、餐具洗洁剂等均可用于清洁玻璃器皿。其特点是价格低廉,使用方便,去油污力强。使用时配制成1%~2%的水溶液,将待清洁之玻璃器皿浸泡在洗涤剂溶液中刷洗。值得注意的是,因残留洗涤剂往往对实验结果影响较大,故此类洗

动物细胞培养的培养步骤介绍

注:所有步骤应在无菌无毒的超净工作台进行。胰蛋白酶处理时间不宜过长。取离体的动物组织,器官或细胞,剪碎并加入胰蛋白酶分解成单个细胞,配置形成细胞悬液。制备动物细胞培养液体培养基(需加入血清,保证无菌无毒),将细胞接种至培养基,放入二氧化碳培养箱中进行初代培养。当细胞增殖达到一定程度,出现接触抑制现象

全血细胞培养染色体技术常用试剂配制

 (一)培养液    (1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。    (2)小牛血清商品    (3)植物凝集素(PHA)    (4)pH调整液:5% NaHCO3溶液高压灭

全血细胞培养染色体技术常用试剂配制

一、国内实验室应用试剂配制(一)培养液(1)RPMI1640培养液:称取RPMI培养基9.8g,碳酸氢钠1.9g、青霉素100u/ml,加双蒸水至1000ml,调节 pH7.2~7.4无菌过滤冻存备用。(2)小牛血清商品:成都生物制品厂。(3)植物凝集素(PHA):自制或成品(重庆药检所)。(4)p

细胞培养实验室常用的基本仪器设备

1.显微镜:倒置显微镜——是组织细胞培养室所必需的日常工作常规使用设备之一,便于掌握细胞的生长情况并观察有无污染等。2.培养箱:体外培养的细胞和体内细胞一样,需要在恒定的温度下生存,大多数情况下,最适温度是37℃,温差变化一般不应超过±0.5℃,细胞在温度升高2℃ 时,持续数小时即不能耐受,40℃以

细胞培养常用设备及实验技巧(四)配制与消毒

器材与试剂: 干粉型培养基、胰蛋白酶、青霉素、链霉素、纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。具体步骤: 一. 水的制备:细胞培养用水**非常纯净,不含有离子和其他的杂质。需要用新鲜的双蒸水、三蒸水或纯净水 。二.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS,如:Hanks,D-Hanks液的配制):1

细胞培养实验——贴壁细胞培养

实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm

细胞培养技术的细胞培养方式

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不

单细胞培养培养方法介绍微室培养法

人工制造一个小室,将单细胞培养在小室中的少量培养基上,使其分裂、增殖形成细胞团的方法,称为微室培养法,亦称为双层盖玻片法。其操作是将携带1个细胞的1滴培养基置于无菌载玻片上,并用无菌矿物油包围培养基液滴。再分别在培养基液滴的两侧滴1滴矿物油,在每一矿物油滴上放一张盖玻片。然后,把第三张盖玻片放在培养

单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法

用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层

巨噬细胞的培养方法

  巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:  1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌

巨噬细胞的培养环境

  细胞培养是无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁,空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于一室,而洗刷消毒在另一室。  常用

巨噬细胞的培养方法

巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW264.7等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸肉汤

巨噬细胞的培养方法

巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌硫羟乙酸

巨噬细胞的培养方法

  巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P338D1、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获恶性,培养中呈巨噬细胞形态和吞噬功能,易于传代和瓶壁分离,但难以建株。培养巨噬细胞可用各样方法和各种来源来获取细胞,以小鼠腹腔取材法最为实用,其法如下:  1、实验前三天,向每只小鼠腹腔内注入无菌