单细胞培养培养方法介绍平板培养法

将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封闭,在25℃黑暗或漫射光照射下培养。培养皿可以在倒置显微镜下观察,用优质记号笔在培养皿外侧标记单细胞的位置,以便 跟踪观察这些细胞的生长和再生,确保筛选出纯的单细胞无性系。......阅读全文

单细胞培养培养方法介绍平板培养法

将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封闭,在2

单细胞培养培养方法介绍看护培养法

有些植物细胞,一旦分离出来,不仅不能分裂、增殖,还可能死亡。看护培养法是用一块愈伤组织来哺育单细胞,使其正常分裂和增殖的培养方法。用微量移液管或小勺,将来自悬浮培养物或愈伤组织的单细胞转移到漂浮的定量滤纸上,滤纸下是旺盛生长的愈伤组织。几天之后,在愈伤组织看护影响下,在一般培养基中沉寂的细胞开始分裂

单细胞培养培养方法介绍微室培养法

人工制造一个小室,将单细胞培养在小室中的少量培养基上,使其分裂、增殖形成细胞团的方法,称为微室培养法,亦称为双层盖玻片法。其操作是将携带1个细胞的1滴培养基置于无菌载玻片上,并用无菌矿物油包围培养基液滴。再分别在培养基液滴的两侧滴1滴矿物油,在每一矿物油滴上放一张盖玻片。然后,把第三张盖玻片放在培养

单细胞培养培养方法介绍细胞悬浮培养法

用液体培养基对保持良好的分散状态的单个细胞或小的细胞聚集体于摇床上进行培养的方法,称为细胞悬浮培养法(cell suspension culture)。依据培养目的不同,可分为浅层培养和深层培养。浅层培养是指使培养材料的一部分裸露于液体培养基表面,采用静止培养的方式,适用于各种器官和组织的培养。深层

细胞平板培养法的相关介绍

  将制备好的单细胞悬浮液,按照一定的细胞密度,接种于适当厚度的薄层固体培养基上进行培养的方法,称为平板培养。  等量的单细胞培养液与等量熔化(30~50℃)的琼脂培养基(0.6%~1%)混合,迅速铺板于培养皿中,琼脂冷却凝固后,细胞分布均匀地被固定在薄层(厚度大约1mm)培养基中。培养皿用石蜡膜封

特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法

实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排

固体培养基上细菌培养实验_铺平板法

实验方法原理通过铺平板分离单个菌落实验材料培养物仪器、耗材平板涂布棒培养箱实验步骤1.  吸取0.05~1 ml培养物至一只干的平板上。2.  用涂布棒作圆周运动将培养液涂布均匀,或用涂布棒的边缘在平板的表面画光栅图案(一系列平行线),然后转动平板并与已涂布的平行线成直角重复涂布。3.  于37 °

固体培养基上细菌培养实验_平板划线法

实验方法原理通过平板划线法分离单菌落试剂、试剂盒培养液仪器、耗材平板接种环牙签实验步骤1.  用接种环或无菌牙签将接种菌体从琼脂平板的一侧开始划线。2.  重新消毒接种环或用新的无菌牙签,从第一划线处将样品划线至平板的其余部分,重复划线至少一次。3.  于37 °C培养直至长出单菌落。如果要从很多的

细菌平板划线分离培养法实验

(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养基的

细菌平板划线分离培养法实验

实验步骤(1)曲线划线分离法:此法多用于含菌量不多的标本或培养咽拭、棉拭所取的培养物,将标本或咽拭、棉拭培养物直接涂布于培养基的 1/5 处,然后用接种环或直接用咽拭(棉拭)作曲线连续划线接种。(2)分区划线分离法:此法多用于含菌量较多的粪便等标本的细菌分离培养。先用接种环取粪便标本,将其涂布在培养

何为稀释混合平板法(细胞培养)

将已经培养好的细胞稀释数倍后,制作好装片,在显微镜下计数,然后按照稀释比例计算出溶液中的细胞数量。这样做的好处是,稀释后,数量减少,容易计算。医院里,利用这种方法,计算血细胞,可以检查出贫血等病。

啤酒酵母培养生产单细胞蛋白实验_菌种培养法

实验方法原理单细胞蛋白是通过培养单细胞微生物获得的菌体蛋白质。酵母菌、丝状真菌、微型藻类及非病源细菌等单细胞微生物均可用于生产单细胞蛋白,其中酵母菌是生产单细胞蛋白的主要单细胞微生物。多种原料可用于生产单细胞蛋白,如秸秆、薯干、石油、甲烷等,特别是一些工业废水、废渣可用来生产单细胞蛋白饲料,废物利用

厌氧菌培养的培养方法介绍

  1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。  2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)

单细胞培养的基本介绍

  单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现

特殊细胞培养实验_多孔塑料培养板单细胞克隆法

实验方法原理多孔塑料培养板克隆细胞的主要过程是1.  制备出1~2 细胞/毫升低密度的细胞悬悬液;2.  向多孔塑料培养板各孔中分别接种细胞悬液0.5~1 ml,则每孔平均含1 个细胞。3.  镜下检测每孔所含细胞数,标记下含单细胞的孔,置温箱培养,数日后凡在已标记的孔中有生长增殖的细胞群即为克隆细

悬浮培养法介绍

悬浮培养是使帖壁细胞呈悬浮状态生长。如所需培养的细胞本身属悬浮生长型,则无须做任何处理;在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养帖附型细胞时,必须进行干扰细胞不能帖附,方法有二:(1)用大培养瓶增加含有铁芯的无毒的聚苯乙烯棒,在培养中进行电磁搅拌,使细胞不能帖壁而成悬浮培养。(2

微生物固体培养实验——平板划线法

实验材料细菌仪器、耗材接种环培养皿实验步骤一、实验准备 1.  接种环 (1)灭菌,将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 (2)冷却,将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。二、实验步骤1.  采用无菌操作技术,用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。 2.  重新消毒接种环,从第一划线处

从培养组织中分离单细胞的方法介绍

从培养组织中分离单细胞指将愈伤组织反复继代培养,再转移至液体培养基振荡培养。这是获得单细胞使用最广泛的一种方法。将表面消毒后的植物器官新鲜切片放置在培养基(固体)上,培养基含适当比例的生长素和细胞分裂素,以保证组织培养的顺利进行。外植体切口处形成愈伤组织,逐渐生长扩展到外植体组织的整个表面。将愈伤组

有关厌氧菌培养的培养方法介绍

  1.厌氧缸法接种好标本的平板或液体培养基试管,可放入厌氧缸内培养,厌氧缸是普通的干燥缸,用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境,从而将厌氧菌培养出来。  2.厌氧袋(Bio-bag)即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。塑料袋透明而不透气,内装气体发生管(有硼氢化钠的碳酸氢钠固体以及5%柠檬酸安瓿)

细胞共培养的培养方法介绍

  细胞共培养就是两种不同的细胞共同培养。  细胞共培养技术最多应用于骨细胞和神经细胞。细胞共培养体系主要通过两种方法建立:  ① 直接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞同时或分别接种于同一孔中,不同种类的细胞之间直接接触;  ② 间接共培养体系,即将2种或2种以上的细胞分别接种于不同的载体上,然

病毒的培养方法实验——鸡胚培养法

病毒必须在易感的活细胞内才能增殖,因此,根据不同病毒选择敏感动物,离体组织细胞和鸡胚进行分离培养。实验方法原理鸡胚培养方法操作简便,适用于流感病毒,痘病毒,疱疹病毒和脑炎病毒等的培养。最常用的鸡胚接种方法有四种,即绒毛尿囊膜接种法,羊膜腔(羊水囊)接种法,尿囊腔接种法和卵黄囊接种法。根据不同病毒和不

平板培养基制作方法简介

  ① 将培养皿洗净、干燥,使各培养皿盖方向一致,用牛皮纸包好,或放入特制铁罐内,注明皿盖的方向。高压灭菌或干燥灭菌后备用。  ② 取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内,先左手持三角瓶,右手反转手掌用中指和无名指拨出棉塞或硅胶赛(或不翻转手掌用小指和手掌拨出棉塞) ,同时将三角瓶转换至

平板培养基的制作方法

平板培养基制作方法如下:① 将培养皿洗净、干燥,使各培养皿盖方向一致,用牛皮纸包好,或放入特制铁罐内,注明皿盖的方向。高压灭菌或干燥灭菌后备用。② 取刚灭菌后尚未凝固的培养基置于无菌箱或超净工作台内,略打开灭菌过的培养皿盖(露一小缝),倒入培养基(厚度为0.5cm),封盖、冷凝,倒置备用。

病毒的培养方法实验—组织培养法原代细胞单层培养

实验方法原理组织培养是目前培养病毒应用最广的一种培养方法,其优点是①经济适用,结果正确且敏感;②较实验动物易于控制。原代细胞单层培养法,是指动物(包括脊椎动物和无脊椎动物)的组织自机体取出后,经胰酶或其他细胞分散剂消化处理,得到单个细胞悬液。以一定量接种到特定容器中,加入细胞生长所必需的营养液,置合

盘基网柄菌的培养方法实验——细菌平板上的培养

实验材料盘基网柄菌稀释物试剂、试剂盒肉汤Sorensen's 磷酸缓冲液实验步骤1. 用任何营养丰富肉汤制备大肠杆菌 B/r 或产气克雷伯杆菌的过夜培养物。2. 用营养肉汤或 1X Sorensen's 磷酸缓冲液对盘基网柄菌进行一系列稀释,使其细胞密度为 500 个细胞/ml,以便

单细胞培养的方法有哪些

1.转瓶培养这个比较老的工艺,在逐步淘汰,不过投资少,技术含量低,人员经少量培训就可以操作。2.悬浮培养非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。细胞悬浮于培养基中生长或维持。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以子。深度超过5mm,需要搅动培养基,

传代培养法/组织块培养法/初代消化培养常规组织培养法

一、初代消化培养法 1、 准备:取各种已消毒的培养用品置于净化台面,紫外线消毒20分钟。开始工作前先洗手、75%酒精擦拭手至肘部。 2、 布局:点燃酒精灯,安装吸管帽。 3、处理组织:把组织块置于烧杯中,用Hanks液漂洗2~3次,去除血污;如怀疑组织可能污染,可先置于含有青链霉素的

单细胞培养的定义及介绍

  单细胞培养(single cell culture)是指从植物器官、愈伤组织或悬浮培养物中游离出单个细胞,在无菌条件下,进行体外生长、发育的技术。人们分离和培养植物单细胞的设想和实践都比较早,但成功地进行单细胞培养是随着更有效的培养基的发展以及从愈伤组织悬浮培养物分离单细胞的专门技术的建立才实现

病毒的培养方法实验——传代细胞培养法

实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上

完全培养基的培养方法介绍

  把诱变处理后的细胞接种在含有微量(