全血中提取白细胞的方法

中性粒细胞分离的方法1、 标准方法:Ficoll-泛影钠(Ficoll-Hypaque)密度梯度及红细胞裂解法1) 取一50ml聚乙烯管,无菌采集人外周静脉血,加4.4ml3.8%或5%的柠檬酸盐液定容至40ml。上述全血300gX20min,离心,室温。2) 吸出富含血小板的上清,2500gX15min,制备无血小板血浆(platelet-poor Plasma, PPP)。3) 余下的沉降全血加入5ml 6%Dextran (分子量500,000,用无菌生理盐水配制),并用生理盐水(0.9%)调节最终体积至50ml,轻轻、彻底混匀。室温沉降30min。4) 吸出富含白细胞的上层液,275gX6min。5) 沉淀的细胞用8mlPPP-生理盐水(1:4)重悬,并移到15ml离心管中。6) 悬液细胞上面加入3mlFicoll-Hypaque(密度1.077),750gX5min,室温。7) 吸取富含中性粒细胞和红细胞层,用0.15......阅读全文

白细胞计数法(试管法)

1 原理 用稀乙酸将血液稀释20倍,使红细胞全部溶解,滴入白细胞计数池中,在显微镜下计数,求得每立方毫米血液中的白细胞数。2 器材和试剂2.1 器材生物显微镜、Neubauer氏血细胞计数池、0.02ml吸管、小试管、刺血针、2ml吸管。2.2 试剂白细胞稀释液:采用3%乙酸溶液。3 稀释液的配制采

白细胞的基本信息

白细胞(leukocyte,white blood cell,WBC)是血液中的一类细胞。白细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞、淋巴细胞。前三种因其胞质内含有嗜色颗粒,故称为粒细胞。在显微镜下可以看到,血细胞中体积比较大、数量比较少。具有细胞核。其主要作用是吞噬细菌、防御疾病。

白细胞计数的检测方法

  (1)取小试管1支,加白细胞稀释液0.38ml。  (2)用血红蛋白吸管准确吸取末梢血20μl。  (3)擦去管尖外部余血,将吸管插入盛0.38ml稀释液的试管底部,轻轻吹出血液,并吸取上清液洗涮3次,注意每次不能冲混稀释液,最后用手振摇试管混匀。  (4)充液,将计数池和盖玻片擦净,盖玻片盖在

什么是人类白细胞抗原?

人类白细胞抗原是诊断强直性脊柱炎的重要参考指标之一,在强直性脊柱炎的患者中,人类白细胞抗原的阳性率可以高达90%以上,但是,也有的强直性脊柱炎患者检查这项指标是阴性,所以这项指标的阳性并不代表一定就是强直性脊柱炎。在正常人群中也有少部分人会出现这项指标的阳性,而在这些人群中只有10%-20%的人,最

白细胞的形态检查(3)

3 .中性粒细胞胞核形态的异常( 1 )巨多核中性粒细胞:成熟中性粒细胞胞体增大,核分叶过多,常为 5 ~ 9 叶,甚至 10 叶以上,各叶大小差别很大,核染色质疏松,见于巨幼细胞性贫血和应用抗代谢药物治疗后,在一些恶性血液病中偶尔可见。( 2 )巨杆状核中性粒细胞和过分叶核中性粒细胞:前者胞体可大

白细胞检验基础知识

白细胞计数和白细胞分类(White blood cell count and differential count)  (一)原理 将全血用稀酸溶液稀释一定倍数并破坏红细胞后充入血细胞计数池内,显微镜下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升血液内的白细胞数。  (二)方法 显微镜计数法  (三)参

白细胞的结构和分类

白细胞(英文名:leukocyte,white blood cell,简称:WBC)是一类无色、球形、有核的血细胞。正常成人白细胞总数为(4.0~10.0)x 109/L,可因每日不同时间和机体不同的功能状态而在一定范围内变化。白细胞不是一个均一的细胞群,根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类:粒

白细胞分类技术的进展

最早进行白细胞分类的设备仅根据白细胞的体积分布情况将淋巴细胞单独划分出来。在1970 年起Coulter 公司开始设计对白细胞进行分类的仪器,并首先推出了二分类的S-PLUS 系列仪器,然后在1980 年又推出了T 系列,都是可进行白细胞二分群的仪器,大家比较熟悉的SysmexF800 和F82

白细胞常见的病理形态

(一)中性粒细胞的病理形态大小不均(anisocytosis) 指中性细胞体积大小悬殊的情况而言。常见于一些病程较长的化脓性炎症。其发生机理可能是在内毒素等作用下骨髓内中性粒细胞的前细胞发生顿挫性不规则分裂的后果。2.中毒颗粒(toxic guanulation) 中性粒细胞胞质中出现的粗大而分布不

苦参的升白细胞作用

  氧化苦参碱可防止小鼠因MMC、环磷酰胺所致小鼠白细胞减少症,静脉注射或肌肉注射30mg/kg苦参总碱和100mg/kg氧化苦参碱对正常家兔外周血白细胞数有明显的升高作用,而且氧化苦参碱对正常家兔升白作用的显效时间、维持时间和白细胞计数峰值与苦参总碱相比,在给药后的18天内基本是一致的,升白效果优

白细胞分类计数的概述

  白细胞分类计数是将血液中的白细胞分类统计的一种方法,白细胞分为中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、淋巴细胞和单核细胞共五种。其中中性粒细胞占全部白细胞总数的50%~70%,因此中性粒细胞的增减必然影响到白细胞总数的增减。它们都有各自的特殊功能。  (1)中性粒细胞增多:急性化脓感染、粒细胞白

白细胞基础检验学概述

 白细胞计数和白细胞分类(White blood cell count and differential count)  (一)原理 将全血用稀酸溶液稀释一定倍数并破坏红细胞后充入血细胞计数池内,下计数一定体积内的白细胞数,经换算求出每升内的白细胞数。  (二)方法 显微镜计数法  (三)参考值  

巨噬细胞和单核白细胞

·         Lymphocyte Transformation (Donis-Keller lab)Lymphocytes are transformed to establish cell lines. Mononuclear cells (lymphocytes) from antico

白细胞的分类计数小结

一、简介 在白细胞总数中,有一半以上存在于血管外的细胞间隙内,有30%以上贮存在骨髓内,其余的才是在血管中流动的。这些白细胞凭借血液的运输,从它们生成的器官,即骨髓和淋巴组织,到达发挥作用的部位。人体内白细胞总数和种类白细胞的百分比是相对稳定的。当机体发生炎症或其他疾病时,可引起白细胞总数及各种白细

白细胞的生理功能

 (1)中性粒细胞参考值:50%~70%。中性粒细胞增多与减少和白细胞总数升高降低情况类似。需要指出的是在某些情况下如老年人,因机体反应性降低故白细胞数在某些病理情况下并不升高,但白细胞分类中的中性粒细胞明显升高,此时也可参考白细胞升高的临床诊断。  (2)中性杆状核粒细胞参考值:1%~5%。这类细

白细胞的形态检查(2)

(二)外周血异常白细胞形态(瑞-姬染色情况下)1 .中性粒细胞的毒性变化在严重化脓性细菌感染、败血症、恶性肿瘤、急性中毒、大面积烧伤等病理情况下,中性粒细胞可发生一系列形态改变,它们可各自单独出现,也可同时出现。 观察中性粒细胞的毒性变化,对估计疾病的预后有一定帮助。(1) 大小不均 (anisoc

白细胞分类计数的简介

  血液离心时表层为灰白色,这部分的细胞即称为白细胞。它是一组形态、功能和在发育与分化阶段不同的非均质性混合细胞的统称,依据形态、功能和来源而分为粒细胞、淋巴细胞、单核细胞三类。仅以白细胞计数判定临床意义有一定局限性,应结合白细胞分类计数分析病情,较为确切。  中性粒细胞:杆状核1%-5%(0.04

人外周血白细胞DNA制备

实验概要本实验从人外周血中制备了白细胞DNA,介绍了制备基本原理及操作步骤。实验原理从全血制备白细胞DNA,可用非离子去污剂Triton   X-100直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜,释出血红蛋白及细胞核,在反应体系中含一定浓度蔗糖,维护核膜内外的渗透压,以防止核膜破裂,通过离心等手段即可获得白

动物RNA提取实验——Trizol试剂提取法

实验方法原理Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

多克隆抗体提取实验——批量提取法

由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。主要用于(1)批量提取多个抗体(2)为进一步验证抗体的作用进行基础操作。实验方法原理由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗

核酸提取-基因组DNA的提取

   DNA是遗传信息的载体,是最重要的生物信息分子,是分子生物学研究的主要对象,因此DNA的提取也应是分子生物学实验技术中的最重要、最基本的操作,如不能有效的完成DNA提取方面的工作,那就根本谈不上进行分子生物学方面的实验。在DNA提取过程中应做到1,根据不同研究需要,保证结构的相应完整性;2,尽

组织破碎提取法的提取方法比较

提取方法优点缺点煎煮法经济、安全、易行选择性差、成分易破坏、后期处理困难回流法选择性好、收率高受热长、效率低、成分易破坏浸泡法简单、投资小、安全效率低、耗时长、易变质蒸馏法选择性强、处理方便适用范围窄、需要专用设备渗漉法室温、简单、节能费时、有污染连续回流法省溶剂、效率高受热长、规模小、成分易破坏超

粗脂肪提取—索氏(Soxhlet)提取法

原理本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量。该法适用于固体和液体样品,通常将样品浸于脂肪溶剂,如乙醚或沸点为30-60度的石油醚,借助于索氏提取管进行循环抽提。本法提取的脂溶性物质为脂肪类似物的混合物,其中含有脂肪,游离脂肪酸,磷脂,酯,固醇,芳香油,某些色素及有机酸等,因此,称为粗脂肪。用该

常用的溶剂提取样品提取方法

  同一溶剂中,不同物质具有不同的溶解度。利用混合物中各物质溶解度的不同将混合物组分完全或部分分离的过程称为萃取,也称提取。  常用方法有以下几种:  1.浸提法:  浸提法又称浸泡法。用于从固体混合物或有机体中提取某种物质,所采用的提取剂,应既能大量溶解被提取的物质,又要不破坏被提取物质的性质。为

蛋白质提取(水溶液提取法和有机溶剂提取法)

蛋白质的提取工作是将经过处理或破碎的细胞,置于一定的条件和溶液中,让被提取物充分释放出来的过程。影响提取的因素主要是被提取物质在提取的溶液中溶解度的大小及由固相扩散到液相的难易程度。某一物质在溶剂中溶解度大小与该物质的分子结构及溶剂理化性质有关,一般遵守“相似相溶”的原则。扩散作用对蛋白质的提取有一

关于香菇多糖的提取的提取方法介绍

  香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键

脂肪检测—索式提取器提取法详解

原理样品经前处理后,放入圆筒滤纸内,将滤纸筒置于索式提取管中,利用YM或石油醚在水浴中加热回流,使样品中的脂肪进入溶剂中,回收溶剂后所得到的残留物,即为脂肪(粗脂肪)。采用这种方法测出游离态脂,此外还含有磷脂、色素、蜡状物、挥发油、糖脂等物质,所以用索氏提取法测得的脂肪为粗脂肪。适用范围与特点索氏提

溶剂提取法提取白藜芦醇的介绍

  溶剂提取法是一种国内外应用最广泛的提取方法。常用的溶剂提取法主要包括3种:渗漉法、浸提法和回流法。回流提取白藜芦醇的常用溶剂有甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯等,其中以60%~90%乙醇水溶液对白藜芦醇原植物进行回流提取最为常用,其他溶剂由于效率低或毒性相对较大,故很少使用。

提取实验中提取率及含量的计算

提取率(%)=(C×V×10-6)W

超声提取-台式恒温超声波提取机

超声提取这一技术在被发现50多年后真正走向产业化应用。在基础上,不断完善配套系统,开发出药材物料输送及控制系统、提取溶媒流量及温度控制系统、药渣挤干及烘干处理系统、提取药液渣液分离系统、提取管段搅拌系统、提取管段加热保温系统、在线清洗(WIP)系统、集中电气操作控制等系统,构成一套功能齐全的机电一体