多克隆抗体提取实验——批量提取法

由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。主要用于(1)批量提取多个抗体(2)为进一步验证抗体的作用进行基础操作。实验方法原理由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗体就是多克隆抗体;除了抗原决定簇的多样性以外,同样一类抗原决定簇,也可刺激机体产生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五类抗体。实验材料血清试剂、试剂盒DEAE纤维素磷酸盐缓冲液仪器、耗材烧杯布氏滤斗滤纸实验步骤1. 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。2. 将水分抽干,或用布氏滤斗(内放两层滤纸)过滤,收集湿纤维素,以降低其离子强度。按1 ......阅读全文

多克隆抗体提取实验——批量提取法

由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体。主要用于(1)批量提取多个抗体(2)为进一步验证抗体的作用进行基础操作。实验方法原理由多种抗原决定簇刺激机体,相应地就产生各种各样的单克隆抗体,这些单克隆抗体混杂在一起就是多克隆抗体,机体内所产生的抗

多克隆抗体纯化实验_辛酸提取法

辛酸提取法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。实验材料动物血清样品试剂、试剂盒正辛酸醋酸缓冲液PBS仪器、耗材透析袋高速低温离心机实验步骤一、材料和试剂 1.   正辛酸 2.  60 mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS 3.  透析袋 4.  高

辛酸提取法纯化多克隆抗体

该法可用于分离提取人、兔、小鼠血清中的Ig及杂交瘤诱生的腹水和培养上清液中McAb。  【材料和试剂】   (1)正辛酸。   (2)60mmol/L,pH4.0醋酸缓冲液,PBS。   (3)透析袋。   (4)高速低温离心机。   【操作步骤】  (1)将待提取样品用60mmol/L,pH4.0

多克隆抗体提取实验

实验材料 血清试剂、试剂盒 DEAE纤维素磷酸盐缓冲液仪器、耗材 烧杯布氏滤斗滤纸实验步骤 1.  称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50 g,置于1 000 ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05 mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡

DEAE纤维素提取法纯化多克隆抗体

该法提取IgG简便,既可小量提取,也可大量制备。 1.批量提取法 称取DEAE-纤维素(DE32或DE52)50g,置于1000ml烧杯中,先以蒸馏水漂浮除去细颗粒,再经酸碱处理后,用0.01~0.05mol/L,pH8.0左右的磷酸盐缓冲液(PB)平衡。将水分抽干,或用布氏滤斗(内放两层

DEAESephadex-A50提取法纯化多克隆抗体

DEAE-Sephadex A-50(简称A-50)为弱碱性阴离子交换剂,经过NaOH处理将Cl-型转为OH-型后,可吸附酸性蛋白。γ1球蛋白属中性蛋白,等电点为pH6.85~7.5,其余均属酸性蛋白。在溶液为pH8.0时,酸性蛋白均被A-50 吸附。从而可分离纯化IgG。     1. 批

动物RNA提取实验——Trizol试剂提取法

实验方法原理Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA则分布在上层的水相中,最后用异丙醇沉淀水相中的RNA,并用70

关于索氏提取法抽提试剂的选择介绍

  索氏提取法利用相似相溶规律,农产品中脂肪极性一般较小,可采用石油醚或乙醚作为抽提试剂。常见实验室用石油醚有低沸程(30~60℃)和高低沸程(60~90℃)两种,一般选用低沸程石油醚为抽提溶剂有利于缩短提取时间。若选择乙醚为抽提试剂,则必须十分注意乙醚的安全使用。抽提室内应严禁有明火存在或用明火加

总RNA提取实验——氯化锂提取法

实验方法原理用高浓度尿素变性蛋白并抑制RNA 酶,用氯化锂选择沉淀RNA ,其特别适合于从大量样品中提取少量组织RNA ,具有快速简洁的长处,但也存在少量DNA的污染及RNA 得率不高,小RNA 片断丢失的缺陷。实验材料微生物动物细胞植物组织试剂、试剂盒氯化锂尿素Tris-HCLEDTASDS仪器、

抽提萃取法展望

展望编辑萃取作为分离和提纯物质的重要单元过程,今后还会得到进一步的发展,其主要发展方向是:(1)研究新的萃取体系和新的萃取工艺;(2)合成和筛选高效萃取剂;(3)研究与发展新型萃取设备,重点应放在设备的自动化、连续化上;(4)开展萃取机理及理论的研究。 [2] 

总RNA提取实验——试剂盒快速提取法

总RNA提取可以:(1)获得高纯度、高质量的总RNA;(2)可以满足生物学下游实验Northern Blot、核酸酶保护实验、RT-PCR、qRT-PCR 和阵列分析所需。实验方法原理一些公司推出的总RNA 提取试剂盒,可以用来制备高质量的可用于建库的RNA 。该总RNA 纯化系统采用两种著名的RN

蛋白质提取(水溶液提取法和有机溶剂提取法)

蛋白质的提取工作是将经过处理或破碎的细胞,置于一定的条件和溶液中,让被提取物充分释放出来的过程。影响提取的因素主要是被提取物质在提取的溶液中溶解度的大小及由固相扩散到液相的难易程度。某一物质在溶剂中溶解度大小与该物质的分子结构及溶剂理化性质有关,一般遵守“相似相溶”的原则。扩散作用对蛋白质的提取有一

索氏提取法

索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方

索氏提取法

索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经典方

索氏提取法

  索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。

索氏提取法

索氏提取法,又名连续提取法、索氏抽提法,是从固体物质中萃取化合物的一种方法。索氏提取法,用于粗脂肪含量的测定。脂肪广泛存在于许多植物的种子和果实中,测定脂肪的含量,可以作为鉴别其品质优劣的一个指标。目前国内外普遍采用抽提法,其中索氏抽提法(Soxhlet extractor method)是公认的经

组织破碎提取法

组织破碎提取法是在室温液体溶剂中利用高速破碎、高速研磨、高速搅拌和超分子渗透技术,数分钟内对药材进行组织破碎、研磨至细微颗粒,从而达到快速提取的效果。

动物RNA提取实验——SV总RNA试剂盒提取法

动物RNA提取可用于:(1)研究生物体基因调控机制;(2)分子克隆和基因表达以获得该性状基因;(3)可以对特定的基因表达进行定量的检测,从分子水平精确的了解细胞生命活动的规律。实验方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养

索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全

索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成,抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥,提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中,连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶,由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3,在水浴上加热,使乙醚或石油醚不断的回流,一般抽提6~8h,至抽提

索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全

索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成,抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥,提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中,连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶,由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3,在水浴上加热,使乙醚或石油醚不断的回流,一般抽提6~8h,至抽提

索氏提取法食品脂肪质量时如何判断抽提是否完全

索氏抽提取器是由回流冷凝管、提脂管、提脂烧瓶三部分所组成,抽提脂肪之前应将各部分洗涤干净并干燥,提脂烧瓶需烘干并称至恒量④抽提将滤纸筒放入索氏抽提器中,连接已干燥至恒重的脂肪接收瓶,由冷凝管上端加入无水乙醚或石油醚至接收瓶体积的2/3,在水浴上加热,使乙醚或石油醚不断的回流,一般抽提6~8h,至抽提

索氏提取法和超声波提取法有什么不同

  超声法:将样品至于玻璃容器中(不可用铁质或者金属容器),加溶剂,置于超声波仪器中,打开超声,一段时间后,取出过滤得到滤液。需要超声波仪器。  优点  1.提取效率高:超声波独具的物理特性能促使植物细胞组织破壁或变形,使中药有效成分提取更充分,提取率比传统工艺显著提高达50—500%;  2.提取

菌脂多糖的制备实验——热酚提取法

实验方法原理原理是将细菌悬液加于热酸——水混合液中,冷却,离心混合液可分为水溶液层,内含水溶性脂多糖及核酸等及酸层、内含蛋白质。近年来发现在酸层中也含糖类。经离心后沉淀含细胞残体。实验材料细菌浓悬液试剂、试剂盒热酚盐水仪器、耗材离心机培养箱透析膜实验步骤1.   细菌浓悬液用盐水经2500转/分,2

索氏提取法应用

应用编辑适用范围适用于商品粮食、油料中粗脂肪含量的测定。原理试剂无水乙醚(A.R)海砂仪器设备分析天平:感量0.0001 g索氏抽提器一套(各部件必须洗净,用105℃温度烘干,其中抽提瓶烘至恒重);试样制备禾谷类粮食和豆类(花生除外)分取除去杂质的净试样30~50 g,磨碎通过直径1.0 mm圆孔筛

索氏提取法原理

原理编辑利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细,以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,放置于萃取室中。如图安装仪器。当溶剂加热沸腾后,蒸汽通过导气管上升,被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时,即发生虹吸现象

索氏提取法原理

原理编辑利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细,以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,放置于萃取室中。如图安装仪器。当溶剂加热沸腾后,蒸汽通过导气管上升,被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时,即发生虹吸现象

索氏提取法原理

  利用溶剂回流和虹吸原理,使固体物质每一次都能为纯的溶剂所萃取,所以萃取效率较高。萃取前应先将固体物质研磨细,以增加液体浸溶的面积。然后将固体物质放在滤纸套内,放置于萃取室中。  当溶剂加热沸腾后,蒸汽通过导气管上升,被冷凝为液体滴入提取器中。当液面超过虹吸管最高处时,即发生虹吸现象,溶液回流入烧

组织破碎提取法的提取方法比较

提取方法优点缺点煎煮法经济、安全、易行选择性差、成分易破坏、后期处理困难回流法选择性好、收率高受热长、效率低、成分易破坏浸泡法简单、投资小、安全效率低、耗时长、易变质蒸馏法选择性强、处理方便适用范围窄、需要专用设备渗漉法室温、简单、节能费时、有污染连续回流法省溶剂、效率高受热长、规模小、成分易破坏超

粗脂肪提取—索氏(Soxhlet)提取法

原理本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量。该法适用于固体和液体样品,通常将样品浸于脂肪溶剂,如乙醚或沸点为30-60度的石油醚,借助于索氏提取管进行循环抽提。本法提取的脂溶性物质为脂肪类似物的混合物,其中含有脂肪,游离脂肪酸,磷脂,酯,固醇,芳香油,某些色素及有机酸等,因此,称为粗脂肪。用该

多克隆抗体提取实验——TrisCl离子交换层析法

实验材料免疫血清杂交瘤腹水饱和硫酸铵粗提品试剂、试剂盒DE32或DE52纤维素Tris-ClNaClNaOHHCl仪器、耗材层析柱透析袋紫外分光光度计实验步骤一、材料和试剂 1.  DE32或DE52纤维素。 2.  HCl;NaOH;0.01~0.05 mol/L,pH8.0 PB;0.01 mo