柱层析法的原理

柱层析原理:柱层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而使各组分分离。一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附。当采用溶剂洗脱时,发生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的过程,吸附力较强的组分,移动的距离小,后出柱;吸附力较弱的组分,移动的距离大,先出柱。硅胶柱层析流动相:极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系统;拖尾可以加入少量氨水或冰醋酸一般都是利用极性相似相容原理,看流动相与固定相的极性,大部分是固定相的极性小于流动相,然后流动相的极性与所要洗脱的物质极性比较接近,从而将物质洗脱下来。......阅读全文

离心柱层析的概念

中文名称离心柱层析英文名称spun-column chromatography定  义将小型的层析柱置于离心管中以离心力代替重力进行小量样品的快速层析法。常用于小量样品凝胶过滤脱盐和吸附层析等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

柱层析技术特点

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

硅胶柱层析原理

硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离,一般情况下极性较大的物质易被硅胶吸附,极性较弱的物质不易被硅胶吸附,整个层析过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。[编辑本段]硅胶柱层析流动相极性小的用乙酸乙酯:石油醚系统;极性较大的用甲醇:氯仿系统;极性大的用甲醇:水:正丁醇:醋酸系

柱层析硅胶原理

  硅胶层析法分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离, 极性较大的物质与硅胶作用强,保留时间长,极性弱的物质与硅胶作用弱,保留时间短,物质在固定相与流动相间通过反复的吸附、解吸过程,得以分离。

柱层析技术简介

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

DEAE纤维素柱层析纯化酶蛋白实验——离子交换层析法

本实验目的是以柱层析的方法进一步纯化蔗糖酶蛋白,利用DEAE 纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验方法原理利用DEAE纤维素树脂作为离子交换剂进行柱层析分级分离。实验材料酶蛋白试剂、试剂盒DEAE纤维素NaOHHCLTris-HCl缓冲液NaCl仪器、耗材层析柱收集器磁力搅拌器搅拌子烧杯

不同分子量蛋白质的分离——凝胶管柱层析法

实验原理凝胶层析又称凝胶过滤,是一种按分子量大小分离物质的层析方法。该方法是把样品加到充满着凝胶颗粒的层析柱中,然后用缓冲液洗脱。大分子不能进入凝胶颗粒中的静止相中,只留在凝胶颗粒之间的流动相中,因此以较快的速度首先流出层析柱,而小分子则能自由出入凝胶颗粒中,并很快在流动相和静止相之间形成动态平衡,

离子交换柱层析分离核苷酸实验_离子交换层析法

本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法,掌握离子交换柱层析的分离原理和方法,熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离

柱层析技术的定义

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

柱层析分离技术简述

常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。              压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所

离子交换凝胶柱层析

原理 在植物生理生化的研究中,往往要从一个组分复杂的混合物中,将性质很相近的生物大分子分离,这是研究工作中一个很关键的问题,需要一种具有高度分辨力的技术,才能满足这一要求。离子交换层析就是这样的技术,能够分离只有很小差异的物质(例如仅有一个氨基酸不同的两种蛋白质),是分离生物大分子的一

硅胶柱层析的操作技术

硅胶柱层析的原理利用吸附原理,即利用硅胶对中药混合物中各种成分吸附能力的差异,而使混合物中各成分得以分离的色谱方法。硅胶柱层析的操作方法及注意事项 :装柱 操作要点:装柱前柱底要垫一层脱脂棉以防吸附剂外漏。 有干法装柱和湿法装柱两种方法(1)干法装柱:将硅胶通过漏斗装入柱内,中间不应间断,形成一细流

什么是柱层析技术?

  柱层析技术(chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。  柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中

柱层析的基本概念

柱层析操作时,先在圆柱管中填充不溶性基质,形成一个固定相。将样品加到柱子上,用特殊溶剂洗脱,溶剂组成流动相。在样品从柱子上洗脱下来的过程中,根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离。

简述硅胶柱层析惯用方法

  1.称量。200-300目硅胶,称30-70倍于上样量;如果极难分,也可以用100倍量的硅胶H。干硅胶的视密度在0.4左右,所以要称40g硅胶,用烧杯量100ml也可以。  2.搅成匀浆。加入干硅胶体积一倍的溶剂用玻璃棒充分搅拌。如果洗脱剂是石油醚/乙酸乙酯/丙酮体系,就用石油醚拌;如果洗脱剂是

柱层析的装柱方法

装柱子(添硅胶)时,有两种方法:即湿法装柱和干法装柱,二者各有优劣。不论干法还是湿法,硅胶(固定相)的上表面一定要平整,并且硅胶(固定相)的高度一般为15cm左右,太短了可能分离效果不好,太长了也会由于扩散或拖尾导致分离效果不好。湿法装柱是先把硅胶用适当的溶剂拌匀后,再填入柱子中,然后再加压用淋洗剂

粉防己生物碱的提取分离与鉴定——低压柱层析分离法

实验材料汉防已试剂、试剂盒硫酸石灰乳季胺碱乙醚静砂乙醇氯化钠蒸馏水改良碘化铋钾试剂盐酸丙酮洗脱剂苦味酸仪器、耗材渗漉桶索氏提取器水浴锅微波炉锥形瓶玻璃棒烘箱提取玻筒烧瓶硅胶滴管长颈漏斗滤纸片空压机玻璃蒸发器汉防己为防己科千金藤属物Stephania tetrandra S. Mcore的根,是祛风解

柱层析技术的技术特点

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

TLC柱层析中硅胶的使用

 硅胶的使用初做柱层析很容易把柱子装得长了或短了,有时还会有大量的硅胶剩余,浪费硅胶,这主要是对硅胶等固定相的使用的量没有掌握。柱层析用的硅胶一般是 100-200 目,100 毫升硅胶的质量在47 克左右,如果装一个直径是 2.8 厘米的柱子,可以装 18 厘高。为了避免浪费硅胶和溶剂,最初学习装

柱层析技术的主要原理

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

DEAE柱层析纯化多糖原理

DAEA:2-二乙氨基乙醇在柱层析中DAEA是作为洗脱剂的。由于糖类在水溶液中对有机物吸附能力很强,在有机溶剂中则较弱。所以用水和乙醇的溶液进行梯度洗脱。

三种柱层析的原理

在分离分析特别是蛋白质分离分析中,层析是相当重要、且相当常见的一种技术,其原理较为复杂,对人员的要求相对较高,这里只能做一个相对简单的介绍。 一、 吸附层析 1、 吸附柱层析 吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相,以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。 2、 薄层层析 薄层层析是以涂布于玻板或

TLC柱层析上样的技巧

上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸

离子交换柱层析原理

离子的半径电荷等差异会影响它在离子交换柱上的移动速度,进而实现层析。

柱层析分离技术的概述

  常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。  柱子可以分为:加压,常压,减压。  压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的

离心柱层析的概念和应用

中文名称离心柱层析英文名称spun-column chromatography定  义将小型的层析柱置于离心管中以离心力代替重力进行小量样品的快速层析法。常用于小量样品凝胶过滤脱盐和吸附层析等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

TLC柱层析过柱的技巧

过柱的技巧柱层析按过柱时的压力可以分为: 加压, 常压, 减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度, 减少产品收集的时间, 但是会减低柱子的塔板数。 所以其他条件相同的时候,常压柱是效率最高的, 但是时间也最长, 例如一些天然化合物的分离,有时一个柱子过几个月也有可能。减压柱能够减少硅胶的使用量,但是由于

柱层析原理及影响因素

  免疫亲和层析  原理:亲和色谱分离蛋白以一个蛋白与特异性配基配对到色谱基质上,且蛋白质与配基间具有可逆的相互作用作为基础。目标蛋白与配基之间的生物学相互作用,可以是由于静电学的相互作用或是分子间疏水的相互作用,也可以是范德华力或氢键结合力产生的。  影响因素:主要是亲和标签的完整程度,缓冲液的组

柱层析技术的功能介绍

柱层析技术(Column chromatography) 又称柱色谱技术,主要原理是根据样品混合物中各组分在固定相和流动相中分配系数不同,经多次反复分配将组分分离开来。

柱层析操作方法的选择

  目前 ,柱色谱分离的操作方式 ,主要包括常压分离、减压分离和加压分离 3种模式。常压分离是最简单的分离模式方便、简单 ,但是洗脱时间长。减压分离尽管能节省填料的使用量 ,但是由于大量的空气通过填料会使溶剂挥发 ,并且有时在柱子外面会有水汽凝结 ,以及有些易分解的化合物也难以得到 ,而且还必须同时