TLC柱层析上样的技巧
上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸附后将一团脱脂棉塞至接近硅胶表面。然后就可以放心地加入大量洗脱剂, 而不会冲坏硅胶表面。很多样品在上柱前是粘乎乎的, 一般没关系。有的时候上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现, 是因为硅胶对样品的吸附饱和, 而样品本身又是比较好的固体才会析出, 这就需要先重结晶样品, 得到大部分的产品后剩余的产品再柱分。如果不能重结晶也没关系,直接过柱就行, 样品会随着淋洗剂流动而慢慢溶解, 最后随着洗脱剂流出。有些样品溶解性差,能溶解的溶剂又不能上柱(比如 DMF,DMSO等, 会随着溶剂一起走, 显色是一个很长的脱尾) , 这......阅读全文
TLC柱层析上样的技巧
上样的技巧上样也有湿法和干法之分: 湿法一般用淋洗剂溶解样品, 也可以用二氯甲烷、 乙酸乙酯等, 但溶剂越少越好。再用胶头滴管转移得到的溶液,沿着层析柱内壁缓慢地均匀加入。在不用海沙的情况下, 尽量不要破坏硅胶面。加样后, 打开柱底活塞, 让固定相充分地吸附所加样品。然后再加入一些洗脱剂,再充分地吸
进样的技巧
多做色谱分析工作的新手常常会不小心把注射器的针头和注射器杆弄弯,原因是:1.进样口拧的太紧,室温下拧的太紧当汽化室温度升高时硅胶密封垫膨胀后会更紧,这时注射器很难扎进去。2.位置找不好针扎在进样口金属部位。3.注射器杆弯是进样时用力太猛,进口色谱带一个进样器架,用进样器架进样就不会把注射器杆弄弯。4
进样的技巧
很多做色谱分析工作的新手常常会不小心把注射器的针头和注射器杆弄弯,原因是:1.进样口拧的太紧,室温下拧的太紧当汽化室温度升高时硅胶密封垫膨胀后会更紧,这时注射器很难扎进去。2.位置找不好针扎在进样口金属部位。3.注射器杆弯是进样时用力太猛,进口色谱带一个进样器架,用进样器架进样就不会把注射器
阀进样技巧
在气相色谱分析中,进样是定量分析误差的主要来源之一。因为进样系统的原理、结构、使用材料、进样时的温度、进样量、进样快慢、进样用的工具等都会对气相色谱分析的定性定量的重复性和准确性产生直接影响。常压气体样品就有六通阀气体进样或注射针筒进样两种。以下我们仅以气体样品六通阀进样技术与技巧归纳总结几点,
简述干法上样和湿法上样的优缺点
一、湿法施工优缺点:1、砂浆经过几次冻融循环和风化易产生渗漏,甚至脱落;经雨水冲刷,潮湿的碱性环境,长时间作用于瓦体会降低瓦的颜色等性能;2、瓦片安装性能差,屋面的平整度不易控制,施工进度慢,易受天气影响工期不易保证;3、砂浆污染屋面影响整体立面效果;4、容易产生热桥效应,不利于节能。二、干法施工优
SPE上样
目的:以适当的流速上样,最大限度地提高分析物在固定相中的保留率。典型流速为 1mL/min。高流速会导致萃取不一致。
化学中湿法上样和干法上样区别
溶解度不同:干法上样要求待分离物要与硅胶充分混合,所以制样的时候要完全溶解,加硅胶后要尽量旋干。上样简单很多,只要均匀地铺满一层不要太厚就可以。湿法上样,分离的东西常温下就是液体,或者说东西不溶解。样品溶解性非常不好,样层不溶解,拿甲醇全冲下来回收剩下未溶解的。不过干法还是很好用的,适用于极性不太小
WB-上样前如何制样
WB 是实验室常见实验之一,蛋白定量后,上样之前,还需要哪些步骤制样呢?1. 蛋白含量测定后,Invent 建议大家把各个样品稀释到某一固定浓度(稀释可使用 PBS,水或裂解液),等体积等质量上样,计算上样体积时需包含 loading buffer 的体积。例如:把所有蛋白浓度都稀释到 2ug/ul
固相萃取装置正压上样和负压上样
固相萃取装置是利用固体吸附剂将液体样品中的目标化合物吸附,与样品的基体和干扰化合物分离,然后再用洗脱液洗脱或加热解吸附,达到分离和富集目标化合物的目的(即样品的分离,净化和富集),目的在于降低样品基质干扰,提高检测灵敏度,其应用于各类食品安全检测、农产品残留监控、医药卫生、环境保护、商品检验、自
装柱时如何确定上样液的浓度与上样量
上样量根据树脂饱和吸附量换算,上样液的浓度当然是自己算了
进样针使用小技巧
进样针的分类按照进样针针头的外观,可分为圆椎形针头进样针、斜面针头进样针、平头进样针。圆椎型针头,用于隔垫进样,可减小对隔垫的损坏,经受多次进样,主要用于自动进样器上;斜面针头,可用在进样隔垫上,易于进样操作,其中26s–22的针头是最适宜使用在气相色谱中进样隔垫上;平头进样针,主要用于高效液相色谱
薄层色谱的上样技术
上样是薄层色谱分析开始操作的第一步,也是最关键的一步。它既关系到能否得到可以重现的分离度好的可鉴别性的薄层色谱,更关系到定量测定结果的准确,因为上样是最主要的误差来源。(一)如果在上样后和分离前不对原点的样品采取“浓集”处理,在薄层板上样品容积的负荷量是极为有限的,工作范围很窄(表一)。如上样容积过
顶空进样器的使用技巧
1、设置参数并放置样品。设置“样品”、“ 阀箱”、“ 管路”温度。样品为50度,阀箱130度,管路140度。温度稳定后放入样品,平衡30分钟后进行下面的操作。 2、进样前吹洗。设置吹洗压力为0.2-0.3Mpa。按吹洗键,约30s后关闭。 3、准备进样。先将取样管扎入相应的瓶内,再将
简介色谱进样针的使用技巧
1.扎针时感觉进样垫较紧, 则注样后拔针可快;若扎针时感觉进样垫较松, 则注样后拔针可慢点;一般教学时要求三快;但熟练后自己掌握。 2.马上拔出。进样量要少,可以保证峰形好看些。注意进样器中不要留有气泡,慢吸,快打,将气泡排出; 3.进样前多抽吸几次排尽气泡,进样时快进快出,针扎进去的位置去
关于湿法、干法上样
湿法省事,一般用淋洗剂溶解样品,也可以用二氯甲烷、乙酸乙酯等。。。但溶剂越少越好,不然溶剂就成了淋洗剂了。很多样品在上柱前是粘乎乎的,一般没关系。可是有的上样后在硅胶上又会析出,这一般都是比较大量的样品才会出现,是因为硅胶对样品的吸附饱和,而样品本身又是比较好的固体才会发生,这就应该先重结晶,得到大
湿法上样改进综述
工业级大规模正相硅胶纯化制备生产上现在大多是干法拌样上样,每天需要处理大量的粗品,费时费力,产量提不上去,同时会产生大量的粉尘影响身体健康和造成环境的污染,导致各方面的损失和伤害。本文采用工业级的中低压制备液相色谱仪(利穗科技(苏州)有限公司)可以优化干法上样为湿法上样,将样品通过合适的纯化系统和层
日常实验小技巧.清除仪器上的特殊污垢
在回流操作或浓缩溶液时,经常会有结晶析出在液面上方的烧瓶内壁上,且附着牢固,不仅不能继续参加反应,有时还会因热稳定性差而逐渐分解变色。遇此情况,可轻轻振摇烧瓶,以内部溶液浸润结晶,使其溶解。如果装置活动受限,不能振摇烧瓶时,可用冷的湿布敷在烧瓶上部,使溶剂冷凝沿器壁流下时,溶解析出的结晶。
如何确认PTLC上样量?
以20cm*20cm*1mm规格为例:若上样带宽是0.5cm,板两边空出0.5cm边际,其中1mm厚的硅胶板负载量不要超过5mg/cm3,上样量约为0.5*19*5=47.5mg,以此类推。
WB上样量应为多少
>这要根据你做的蛋白表达量多少,一般是用DAB显色要50-100μg,用ecl曝光上样量为20-40μg。但根据你蛋白表达量的不同目标蛋白绝对量DAB法至少50pg,ecl法至少20pg。我也用组织作过western,蛋白浓度的确很高。通常我上50-100ug,足够了。如果蛋白浓度太高导致上样过小,
收藏!色谱进样针使用小技巧
色谱进样针虽小但却不可或缺,进样针是连接样品和分析仪器的渠道,有了进样针,样品才能进入色谱柱,经检测器,进行连续谱图分析,所以,进样针的维护和清洗是分析人员日常需要关注的重点,否则不仅会影响工作效率,还会对仪器产生伤害,本文主要介绍关于进样针的小知识。 进样针的分类 按照进样针针头的外观,可
色谱进样针使用小技巧大全
色谱进样针虽小但却不可或缺,进样针是连接样品和分析仪器的渠道,有了进样针,样品才能进入色谱柱,经检测器,进行连续谱图分析,所以,进样针的维护和清洗是分析人员日常需要关注的重点,否则不仅会影响工作效率,还会对仪器产生伤害,本文主要介绍关于进样针的小知识。 进样针的分类 按照进样针针头的外观,
使用横格式分样器进行园林苗木种子的分样技巧
随着当前市场对于优质苗木的需求量不断增加,苗木市场的竞争压力也在不断加强,因此在这种背景下,苗木基地要提高效率,获得更好的收益,必须要培育出更加优良的苗木品质,在此过程中做好苗木种子的检测工作是至关重要的,而横格式分样器的应用,可以帮助种子检测人员获得更有代表性的种子样品,提高种子品质检测的
6×碱性凝胶上样液的配制
6×碱性凝胶上样液(室温贮存)成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.3 N 氢氧化钠6 mmol/L EDTA18%聚蔗糖(400型)0.15%溴甲酚绿0.25%二甲苯青FF水300ul 10N 氢氧化钠120ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)1.8g15mg25mg补足到10ml
6×蔗糖凝胶上样液的配制
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA40%聚蔗糖水1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)4g 补足到10ml
6×甘油凝胶上样液的配制
成分及终浓度配制10ml溶液各成分用量0.15%溴酚蓝0.15%二甲苯青FF5 mmol/L EDTA50%甘油水1.5ml 1%溴酚蓝1.5ml 1%二甲苯青FF100ul 0.5mol/L EDTA(pH8.0)3ml 3.9ml
柱层析的上样方式及其特点
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴
DNA测序技术的上样及电泳
关闭电泳仪,用移液枪吸缓冲液清洗样品孔,去除在预电泳时扩散出来的尿素,然后立即用毛细管进样器吸取样品,加入样品孔中。上样顺序一般为G、A、 T、C。加样完毕后,立即电泳。开始可用30V/cm进行电泳,5分钟后可提高至40-60V/cm,并保持恒压状态。一般来说,一个55cm长, 0.2mm厚的凝
DNA测序上样及电泳的介绍
关闭电泳仪,用移液枪吸缓冲液清洗样品孔,去除在预电泳时扩散出来的尿素,然后立即用毛细管进样器吸取样品,加入样品孔中。上样顺序一般为G、A、T、C。加样完毕后,立即电泳。开始可用30 V/cm进行电泳,5分钟后可提高至40~60 V/cm,并保持恒压状态。一般来说,一个55 cm长,0.2 mm厚
柱层析技术的上样方法
上样也有干法和湿法之分:干法就是把待分离的样品用少量溶剂溶解后,在加入少量硅胶,拌匀后再旋去溶剂。如此得到的粉末再小心加到柱子的顶层。干法上样较麻烦,但可以保证样品层很平整。湿法上样就是用少量溶剂(最好就是展开剂,如果展开剂的溶解度不好,则可以用一极性较大的溶剂,但必须少量)将样品溶解后,再用胶头滴
谈谈气相色谱进样阀的使用技巧
在气相色谱中,进样是定量分析误差的主要来源之一,因为进样系统的原理,结构,材料,温度,体积,速度和工具会直接影响气相色谱定性和定量分析的重复性和准确性,大气气体样品有六通阀气体注入或注射器注入。下面谈谈气相色谱进样阀的使用技巧。 1、分析并了解您的六通阀的工作原理,结构和样品直接接触阀材料,以