高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm),所用固定相的粒度也非常小(几μm到几十μm),所以流动相在柱中流动受到的阻力很大,在常压下,流动相流速十分缓慢,柱效低且费时。为了达到快速、高效分离,必须给流动相施加很大的压力,以加快其在柱中的流动速度。为此,须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件: a. 流量恒定,无脉动,并有较大的调节范围(一般为1~10 mL/min); b. 能抗溶剂腐蚀; c. 有较高的输液压力;对一般分离,60×10^5Pa的压力就满足了,对高效分离,要求达到150~300×10^5Pa。 ⑴往复式柱塞泵 当柱塞推入缸体时,泵头出口(上部)的单向阀打开,同时,流动相进入的单向阀(下部)关闭,这时就输出少量的流体。反之,当柱塞向外拉时,流动相入口的单向阀打开,出口的单向阀同时关闭,一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整......阅读全文
高效液相色谱法的主要类型有哪些
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。 1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法) 固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。 ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中
离子对高效液相色谱法的简介
离子对色谱法是将一种 ( 或多种 ) 与溶质分子电荷相反的离子 ( 称为对离子或反离子 ) 加到流动相或固定相中,使其与溶质离子结合形成疏水型离子对化合物,从而控制溶质离子的保留行为。其原理可用下式表示:X水相Y-水相 === X Y-有机相 式中:X 水相--流动相中待分离的有机离子(也可是
反相高效液相色谱法的缺点有哪些
反相高效液相色谱是由非极性固定相和极性流动相所组成的液相色谱体系,它正好与由极性固定相和弱极性流动相所组成的液相色谱体系(正相色谱)相反。 影响溶质保留值的三个因素 烷基键合固定相对每种溶质分子缔合作用和解缔作用能力之差,就决定了溶质分子在色谱过程的保留值。以下简述影响溶质保留值的三个因素:
简述高效液相色谱法的应用领域
HPLC的出现不过三十多年的时间,但这种分离分析技术的发展十分迅猛,应用十分广泛。其仪器结构和流程多种多样。典型的高效液相色谱仪结构和流程可用下列方框图表示(See Fig.3-4)。高效液相色谱仪一般都具备贮液器、高压泵、梯度洗提装置(用双泵)、进样器、色谱柱、检测器、恒温器、记录仪等主要部件
高效液相色谱法用于霉菌毒素的检测
每年霉变粮食的量占据了总粮食产量的很大一部分,这不仅对国家经济造成了损失,若霉变的粮食被人畜食用,还会引发中毒、癌症等症状。霉菌毒素主要有黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮等,尤其是黄曲霉毒素,被列为诱发癌症的高危因素。而某些初步霉变的粮食,其感官上的变化并不明显,因此,对霉菌毒素的检测尤为重要。HPLC 可
高效液相色谱法检测可卡因的原理简介
高效液相色谱法,高效液相色谱的原理与气相色谱相对,可对热不稳定、不易挥发、具有大分子量的各种毒品进行分离检测,常用的检测器有紫外检测器、二极管阵列检测器、荧光检测器等。色谱/质谱联用分析法,使用GC/MS或者HPLC/MS进行毒物和药物的鉴定巳经成为国际上公认的标准方法,也是向法庭提供鉴定结果的
高效液相色谱法的主要类型有哪些
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。 1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法) 固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。 ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中
高效液相色谱法中的校正因子
定性依据的是保留时间。 定量依据的是与对照品的比对。 HPLC中常用的定量方法(主要以峰面积为基础),有:外标一点法,外标两点法,外标标准曲线,内标一点法,内标两点法,内标标准曲线;归一化法在一定的条件下也可以用作定量。
高效液相色谱法用于含量测定的原理
高效液相色谱仪(高效液相色谱法)原理是物质(的官能团)在特定波长下具有吸收,并且物质的浓度与峰面积成比例,也就是说,样品a/对照a =样品C/对照cC是浓度,可以理解为C=质量(毫克)*纯度(%)/稀释倍数(毫升)。因此,当标准品用于含量校准时,标准品的纯度是已知量,称量一定量的标准品,然后以恒定体
高效液相色谱法用于含量测定的原理
原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比.即:A样品/A对照=C样品/C对照C,为浓度,可以理解成C=质量(mg)*纯度(%)/稀释倍数(ml)所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是已知的量,称取一定量标准品后进行定容稀释.进样分析后,峰面积可从图谱
—高效液相色谱法测定腺苷的方法计算
方法名称灵芝子珍珠口服液—腺苷的测定—高效液相色谱法应用范围本方法采用高效液相色谱法测定灵芝子珍珠口服液中腺苷的含量。本方法适用于灵芝子珍珠口服液。方法原理取供试品加甲醇,超声处理,放置待沉淀完全,滤过,取许滤液蒸干,残渣加水溶解,以水饱和的正丁醇提取,正丁醇提取液蒸干,残渣加50%甲醇溶解并定容,
高效液相色谱法出现负峰的原因
有可能是你们的流动相用的甲醇不好,甲醇里有强紫外吸收物质,所以会有负峰有时流动相与配样溶剂不一样也会引起负峰流动相和样品的溶剂不一样,样品中的杂质没有紫处吸收或吸收很小,而流动相紫外吸收大,如用甲醇时波长设定在220nm以下时,常出现这种现象.
高效液相色谱法的应用是什么?
高效液相色谱法又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实
高效液相色谱法的特点和优缺点
高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点: ①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。 ②高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。 ③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在
高效液相色谱法用于含量测定的原理
原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比。即:A样品/A对照=C样品/C对照C,为浓度,可以理解成C=质量(mg)*纯度(%)/稀释倍数(ml)所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是已知的量,称取一定量标准品后进行定容稀释。进样分析后,峰面积可从图谱
阿魏酸的测定—高效液相色谱法
方法名称:阿魏酸的测定—高效液相色谱法应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量。方法原理:供试品水浴蒸至近干,加甲醇进行热回流提取,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,以稀盐酸调pH=1~2,煮沸,放冷,移至分液漏斗中,用乙醚提取,乙醚提取液再用2%碳酸钠提取,碳酸钠提取液用乙酸乙酯洗涤,弃去洗
高效液相色谱法对色谱柱的要求!
反相色谱系统使用非极性填充剂,常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶,以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用,辛基硅烷键合硅胶和其他类型的硅烷键合硅胶(如氰基键合硅烷和氨基键合硅烷等)也有使用。正相色谱系统使用极性填充剂,常用的填充剂有硅胶等。离子交换色谱系统使用离子交换填充剂;分子排阻色谱系统使用凝胶或高分子多
苯并(a)芘的高效液相色谱法测定
方法提要利用正己烷-液-液萃取、固相萃取C18柱-二氯甲烷淋洗等提取水样中苯并[a]芘,提取液经硅胶柱净化、浓缩、定容后,高效液相色谱-紫外-荧光检测器串联分离检测,外标法定量。方法适用于地下水、地表水、饮用水及污水等水样中苯并[a]芘的分析,其中固相萃取适用于洁净水分析。方法检出限随仪器灵敏度和样
高效液相色谱法的分类及其分离原理
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。1.液-固色谱法(液-固吸附色谱法)固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。①液-固色谱法的作用机制吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中的溶质分子X(液相)
高效液相色谱法HPLC实验结果的分析
高效液相色谱和气相色谱法(包括测定方法和计算方法)的定性和定量分析是相同的。定性分析采用纯物质控制的色谱鉴别方法,非色谱鉴别方法结合化学分析或其他仪器分析方法采集组分;定量分析采用峰高或峰面积内标法、外标法或归一化法进行定量,并与计算机结合作为现代分析方法对。定性分析色谱方法的定性分析的目的是确定每
高效液相色谱法的主要类型有哪些
高效液相色谱法分为:液-固色谱法、液-液色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法。 1、液-固色谱法(液-固吸附色谱法) 固定相是固体吸附剂,它是根据物质在固定相上的吸附作用不同来进行分配的。 ①液-固色谱法的作用机制 吸附剂:一些多孔的固体颗粒物质,其表面常存在分散的吸附中心点。 流动相中
高效液相色谱法用于含量测定的原理
原理是该物质(的官能团)在某一特定波长下有吸收,并且,该物质浓度和峰面积成正比.即:A样品/A对照=C样品/C对照C,为浓度,可以理解成C=质量(mg)*纯度(%)/稀释倍数(ml)所以在使用标准品进行含量标定的时候,标准品的纯度是已知的量,称取一定量标准品后进行定容稀释.进样分析后,峰面积可从图谱
吡哆素的测定—高效液相色谱法
应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定维生素B6(C8H10NO5P)的含量。该方法适用于维生素B6。方法原理:供试品制成流动相溶液,进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用紫外吸收检测器,于波长291nm处检测维生素B6吸收值,计算出其含量。试剂:1. 甲醇2. 0.04%戊烷磺酸钠溶液(用冰醋酸调节p
高效液相色谱法的应用领域详解
高效液相色谱仪的应用远远大于气相色谱仪。它广泛用于合成化学、石油化学、生命科学、临床化学、药物研究、环境监测、食品检验及法学检验等领域。 1 在食品分析中的应用①食品营养成分分析:蛋白质、氨基酸、糖类、色素、维生素、香料、有机酸(邻苯二甲酸、柠檬酸、苹果酸等)、有机胺、矿物质等。②食品添加剂分析:甜
高效液相色谱法的特点和优缺点
高效液相色谱法有“三高一广一快”的特点:①高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。②高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。③高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。④应
阿魏酸的测定—高效液相色谱法
方法名称:阿魏酸的测定—高效液相色谱法应用范围:该方法采用高效液相色谱法测定阿魏酸的含量。方法原理:供试品水浴蒸至近干,加甲醇进行热回流提取,滤过,滤液蒸干,残渣加水溶解,以稀盐酸调pH=1~2,煮沸,放冷,移至分液漏斗中,用乙醚提取,乙醚提取液再用2%碳酸钠提取,碳酸钠提取液用乙酸乙酯洗涤,弃去洗
高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别在哪里
高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相(常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作
高效液相色谱法与经典液相色谱法的区别在哪里
高效液相色谱法包括正相高效液相色谱法和反相高效液相色谱法.正相高效液相色谱法中流动相的极性小于固定相的极性,也就是以及性键合相为固定相(常以氨基、氰基键合相等作为固定相).反相高效液相色谱法中流动相的极性大于固定相的极性,也就是以非极性键合相为固定相(常以十八硅烷C18、辛烷C8、甲基C1、苯基等作
实验室分析仪器高效液相色谱法对流动相的要求
流动相不与色谱柱发生不可逆化学变化,以保持柱效或柱子的保留性质较长时间不变;对待测样品有足够的溶解能力;与所用检测器相匹配;粘度尽可能小,以获得较高的柱效;流动相纯度要高,价格便宜,毒性小。
关于高效液相色谱法的色谱柱填料和流动相的组分介绍
应按各品种项下的规定,常用的色谱柱填料有硅胶和化学键合硅胶。后者以十八烷基硅烷键合硅胶最为常用辛基键合硅胶次之,氰基或氨基键合硅胶也有使用;离子交换填料用于离子交换色谱;凝胶或玻璃微球等,用于分子排阻色谱等。注样量一般为数微升。除另有规定外,柱温为室温,检测器为紫外吸收检测器。 在用紫外吸收检