高效液相色谱法使用的仪器高压泵的介绍
HPLC使用的色谱柱是很细的(1~6 mm)，所用固定相的粒度也非常小（几μm到几十μm)，所以流动相在柱中流动受到的阻力很大，在常压下，流动相流速十分缓慢，柱效低且费时。为了达到快速、高效分离，必须给流动相施加很大的压力，以加快其在柱中的流动速度。为此，须用高压泵进行高压输液。高压、高速是高效液相色谱的特点之一。HPLC使用的高压泵应满足下列条件： a. 流量恒定，无脉动，并有较大的调节范围（一般为1~10 mL/min)； b. 能抗溶剂腐蚀； c. 有较高的输液压力；对一般分离，60×10^5Pa的压力就满足了，对高效分离，要求达到150~300×10^5Pa。 ⑴往复式柱塞泵 当柱塞推入缸体时，泵头出口（上部）的单向阀打开，同时，流动相进入的单向阀（下部）关闭，这时就输出少量的流体。反之，当柱塞向外拉时，流动相入口的单向阀打开，出口的单向阀同时关闭，一定量的流动相就由其储液器吸入缸体中。这种泵的特点是不受整......阅读全文
高效液相色谱法为什么使用紫外检测器？
紫外检测器是一种光谱检测器，紫外光谱是最实用的检测方法大多数物质在溶液状态下都有紫外吸收，其吸收值与物质的量有很好的线性关系，其特异性也很好。具有可靠性强、通用性强、灵敏度高、使用方便、维护简单、设备生产成本低等特点。以下情况将用到其他检测器：1、全波长扫描光谱信息时使用二极管阵列检测器2、紫外光区
高效液相色谱法的适用范围
高效液相色谱法可对维生素、生物碱、激素、氨基酸、农药、核酸、香豆素、脂质等有机物质进行分析，也可测定一些无机离子及金属元素。
高效液相色谱法的组成及功能
高压输液泵功能驱动流动相和样品通过色谱分离柱和检测系统；性能要求流量稳定（±1)，耐高压(30～60Mpa)，耐各种流动相：例如：有机溶剂、水和缓冲液；种类往复泵和隔膜泵。色谱柱功能分离样品中的各个物质；尺寸10～30cm长，2～5mm内径的内壁抛光的不锈钢管柱；填料粒度5 ～10μm ，高效微粒固
高效液相色谱法的计算公式
高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用
高效液相色谱法的计算公式
高效液相色谱以经典的液相色谱为基础，是以高压下的液体为流动相的色谱过程。通常所说的柱层析、薄层层析或纸层析就是经典的液相色谱。所用的固定相为大于100um 的吸附剂（ 硅胶、氧化铝等）。这种传统的液相色谱所用的固定相粒度大，传质扩散慢，因而柱效低，分离能力差，只能进行简单混合物的分离。而高效液相所用
高效液相色谱法的计算方法
2(t－t) R＝ ──W＋W 式中 t为相邻两峰中后一峰的保留时间； t为相邻两峰中前一峰的保留时间； W及W为此相邻两峰的峰宽。 除另外有规定外，分离度应大于1.5。 (3) 拖尾因子 为保证测量精度，特别当采用峰高法测量时，应检查待测峰的拖尾因子(T)是否符合各品种项下的规定,
药典中的高效液相色谱法（一）
高效液相色谱法系采用高压输液泵将规定的流动相泵入装有填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。注入进样阀的供试品，由流动相带入柱内，各成分在柱内被分离，并依次进入检测器，由记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。采用微柱液相色谱系统可以减少溶剂的消耗并达到快速分离之目的。高效液相色谱法的主要分离机制有
高效液相色谱法的计算方法
楼主，您好。 高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。 1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料
高效液相色谱法的计算公式
给你个大原则，HPLC的方法学不是做了线性吗，就根据这个来就行。C对/A对=C样/A样C是浓度，A是峰面积，像含量计算，有按平均装量计算的，有按无水物计算的，公式稍微有点差别，自己可以导出来
高效液相色谱法的计算公式
[编辑本段]测定方法 定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时，须采用峰面积法。 面积归一化法 测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率
高效液相色谱法的计算方法
高效液相色谱法是用高压输液泵将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，经进样阀注入供试品，由流动相带入柱内，在柱内各成分被分离后，依次进入检测器，色谱信号由记录仪或积分仪记录。1.对仪器的一般要求 所用的仪器为高效液相色谱仪。色谱柱的填料和流动相的组分应
高效液相色谱法色谱柱的简介
在选定的条件下，注入供试品溶液或各品种项下规定的内标物质溶液，记录色谱图，量出供试品主成分或内标物质峰的保留时间t(R)和半高峰宽W(h/2)，按n=5.54[t(R)╱W(h/2)]^2计算色谱柱的理论板数，如果测得理论板数低于各品种项下规定的最小理论板数，应改变色谱柱的某些条件（如柱长、载体
有效的分离方法─高效液相色谱法
王俊玲的高效液相色谱仪分离方法有传统的蒸馏、结晶、萃取、萃取等。随着生命科学的兴起，出现了离心电泳离子交换膜技术和高效液相色谱仪技术等新的分离技术。近年来，高效液相色谱仪的发展引起了人们的特别关注。色谱法可以追溯到1906年。当俄罗斯的Zhiwuxuejiaci维持植物色素的分离时，他首先应用色谱法
高效液相色谱法的计算公式
[编辑本段]测定方法 定量测定时，可根据样品的具体情况采用峰面积法或峰高法。但用归一法或内标法测定杂质总量时，须采用峰面积法。 面积归一化法 测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率
高效液相色谱法的注意事项
1)．流动相均需色谱纯度，水用20M的去离子水。脱气后的流动相要小心振动尽量不引起气泡。2)． 柱子是非常脆弱的，第一次做的方法，先不要让液体过柱子。3)． 所有过柱子的液体均需严格的过滤。4)． 压力不能太大，最好不要超过150kgf/cm2 .5). 因为缓冲试剂遇有机溶剂，会结晶，有损色谱柱，
高效液相色谱法的定义、类型流程
在所有色谱技术中，液相色谱法（liquidchromatography，LC）是最早（1903年）发明的，但其初期发展比较慢，在液相色谱普及之前，纸色谱法、气相色谱法和薄层色谱法是色谱分析法的主流。 到了20世纪60年代后期，将已经发展得比较成熟的气相色谱的理论与技术应用到液相色谱上来，使液相
药典中的高效液相色谱法（二）
（2）分离度 定量分析时，为便于准确测量，要求定量峰与其他峰或内标峰之间有较好的分离度。分离度（R）的计算公式为：式中tR2为相邻两峰中后一峰的保留时间；tR1为相邻两峰中前一峰的保留时间；W1及W2为此相邻两峰的峰宽。除另有规定外，分离度应大于1.5。（3）重复性 取各品种项下的对照溶液，
高效液相色谱法的固定相的分类
高效液相色谱法的固定相的分类 ： (1)按固定相承受压力分：刚性固体：以二氧化硅为基质，可承受较高压力，表面可键合各种功能官能团---键合固定相，是目前应用最广泛的固定相。硬胶：主要用于离子交换色谱法和凝胶色谱法中，由聚苯乙烯与二乙烯基苯交联而成，可承受的压力较低。 (2)按孔隙深度分：表面多孔型
使用高效液相色谱法测定中药洗剂中苦参碱的含量
苦参总生物碱中含有苦参碱、氧化苦参碱、槐果碱等生物碱类成分，苦参碱的含量测定有报道用气相色谱法、高效液相色谱法(HPLC)，但样品处理方法较复杂。2006年采用HPLC法测定制剂中苦参碱的含量，该方法操作简便、快速、准确、重现性好，可用于妇得康洗剂的质量控制。1、仪器和试药高效液相色谱LC-6A(日
高效液相色谱法离子交换分离原理介绍
(Ion-exchange Chromatography) IEC是以离子交换剂作为固定相。IEC是基于离子交换树脂上可电离的离子与流 动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子以交换剂具有不同的亲和力而将它们分离。以阴离子交换剂为例，其交换过程可表示如下： X-（溶剂中） (
常用色谱法介绍高效液相色谱法
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
高效液相色谱法定量测定介绍外标法
外标法 测定供试品中含量按各品种项下的规定，精密称（量）取对照品和供试品，配制成溶液，分别精密取一定量，注入仪器，记录色谱图，测量对照品和供试品待测成分的峰面积（或峰高），按下式计算含量：A 含量(mx)=mr×-Ar式中各符号意义同上由于微量注射器不易精确控制进样量，当采用外标法测定供试品中某杂质
高效液相色谱法与经典液相色谱法的主要区别
一、类型不同1、高效液相色谱法1）吸附色谱法(Adsorption Chromatography)2）分配色谱法(Partition Chromatography)3）离子色谱法(Ion Chromatography)4）分子排阻色谱法/凝胶色谱法(Size Exclusion Chromatogr
高效液相色谱法使用流动相前为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。噪声增大，基线不稳，突然跳动。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来
高效液相色谱法使用流动相前为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。噪声增大，基线不稳，突然跳动。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来
高效液相色谱法使用流动相前为什么要脱气
HPLC所用流动相必须预先脱气，否则容易在系统内逸出气泡，影响泵的工作。气泡还会影响柱的分离效率，影响检测器的灵敏度、基线稳定性，甚至使无法检测。噪声增大，基线不稳，突然跳动。此外，溶解在流动相中的氧还可能与样品、流动相甚至固定相（如烷基胺）反应。溶解气体还会引起溶剂pH的变化，对分离或分析结果带来
高效液相色谱法特点归纳
高效液相色谱法是在经典色谱法的基础上，引用了气相色谱的理论，在技术上，流动相改为高压输送（最高输送压力可达4.9´107Pa）;色谱柱是以特殊的方法用小粒径的填料填充而成，从而使柱效大大高于经典液相色谱（每米塔板数可达几万或几十万）；同时柱后连有高灵敏度的检测器，可对流出物进行连续检测。特点：1．高
快速了解高效液相色谱法
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混
什么是高效液相色谱法？
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶
高效液相色谱法的面积归一化法测定方法介绍
测定供试品（或经衍生化处理的供试品）中各杂质及杂质的总量限度采用不加校正因子的峰面积归一法。计算各杂质峰面积及其总和，并求出占总峰面积的百分率。但溶剂峰不计算在内。色谱图的记录时间应根据各品种所含杂质的保留时间决定，除另有规定外可为该品种项下主成分保留时间的倍数。