碱裂解法原理
碱裂解法是提取质粒的最常用也最有效的方法,是基于染色体DNA与质粒DNA的变性与复性的差异达到分离目的。原理:高pH使质粒DNA和染色体DNA变性,同时沉淀蛋白质。再将pH值调至中性,质粒DNA较小,很容易复性成双链。而染色体DNA较大,不会复性,缠结成网状不溶物质,从而可以通过离心除去。方法:依次加入下面三种溶液:溶液1:葡萄糖50mmol/L,EDTA100mmol/L,Tris-Cl25mmol/L,溶菌酶5mg/ml,pH8.0溶液2:NaOH0.2mol/L,SDS1%溶液3:5mol/LKAc60ml,冰乙酸11.5ml,重蒸水28.5ml其中溶液1作用主要是悬浮菌体,溶液2作用是裂解菌体,释放胞内物质,溶液3是沉淀染色体DNA......阅读全文
COD国标法和快速法谁更准确?
仲裁的方法还是回流滴定法。 实验室做,可以比较下,看不同方法的数据差别。 快速法的准确度和精确度还是不能和国标法比较
乳胶法和胶体金法的区别
二者在原理、应用和载体方面有所不同,具体如下:1、原理不同:普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或交联剂则操作过程繁琐、耗时。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼
细菌内毒素检查法(鲎试剂法)
细菌内毒素检查法系利用鲎试剂来检测或量化由革兰阴性菌产生的细菌内毒素,以判断供试品中细菌内毒素的限量是否符合规定的一种方法.细菌内毒素的量用内毒素单位(EU)表示。细菌内毒素检查包括凝胶法和光度测定法两种方法,前者利用鲎试剂与细菌内毒素产生凝集反应的原理来检测或半定量内毒素,后者包括浊度法和显色基质
气相色谱法分析法概述
气相色谱仪是用于分离复杂样品中的化合物的化学分析仪器。气相色谱仪中有一根流通型的狭长管道,这就是色谱柱。在色谱柱中,不同的样品因为具有不同的物理和化学性质,与特定的柱填充物(固定相)有着不同的相互作用而被气流(载气,流动相)以不同的速率带动。当化合物从柱的末端流出时,它们被检测器检测到,产生相应
内标法和外表法比较各有什么特点
内标法和外表法比较各有什么特点?如何应用? 答:内标法的优点是测定的结果较为准确,由于内标物与被测组分的峰面积的比值不受进样量波动影响,因而在一定程度上消除了操作条件等的变化所引起的误差。内标法的缺点是操作程序相对烦琐,每次分析时内标物和试样都要准确称量,有时寻找合适的内标物也有困难。 外标
磁性测量法及涡流测量法
涂层测厚仪的无损检测方法与原理:涂层测厚仪在现实测量中是一门理论上综合性较强,又非常重视实践环节的很有发展前途的学科。它涉及到材料的物理性质,产品设计,制造工艺,断裂力学以及有限元计算等诸多方面。 在化工,电子,电力,金属等行业中,为了实现对各类材料的保护或装饰作用,通常采用喷涂有色金属覆盖以及磷
乳胶法和胶体金法的区别
二者在原理、应用和载体方面有所不同,具体如下:1、原理不同:普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或交联剂则操作过程繁琐、耗时。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼
静脉采血法与皮肤采血法的区别
静脉采血:多采用位于体表的浅静脉,通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。皮肤采血法:曾称为毛细血管采血法,是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血,同时含细胞间质和细胞内液。皮肤采血缺点是易于溶血、凝血、混入组织液,而且局部皮肤揉擦、针刺深度不一、个体皮肤厚度差异等都影响检查结果,所以,皮肤采
静脉采血法与皮肤采血法的区别
静脉采血:多采用位于体表的浅静脉,通常采用肘部静脉、手背静脉、内踝静脉或股静脉。皮肤采血法:曾称为毛细血管采血法,是采集微动脉、微静脉和毛细血管的混合血,同时含细胞间质和细胞内液。皮肤采血缺点是易于溶血、凝血、混入组织液,而且局部皮肤揉擦、针刺深度不一、个体皮肤厚度差异等都影响检查结果,所以,皮肤采
免疫组化SABC法与SV法
实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中,分子量67000。是一种碱性蛋白质,具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和
粒子筛选实验室法和在线法
1、实验室法粒子色选实验室法有人工挑选法和粒子扫描设备法,以少量粒子试样的实验室分析数据预估实际生产情况。1.1、人工挑选法试验方法:取少量粒子试样,人工肉眼识别挑出带缺陷粒子。但是,人眼观察必然存在误差。人眼误判可能性高,不同人之间误差大,重复性差,人眼不能看到50微米以下的杂质,人眼几乎不能解决
外标法和标准曲线法的区别
外标法和标准曲线法的区别为:外标法:是与内标法相对,指按梯度添加一定量的标准品(对照品)于空白溶剂中制成对照样品,与未知试样平行地进行样品处理并检测。不同浓度的标准品进样,以峰面积为值绘制成标准曲线,从而推算出未知试样中被测组分浓度的定量方法。标准曲线法:也称外标法或直接比较法,是一种简便、快速的定
乳胶法和胶体金法的区别
二者在原理、应用和载体方面有所不同,具体如下:1、原理不同:普通聚苯乙烯乳胶和抗体的结合是无选择性的物理静电吸附,抗体很难结合到乳胶表面,即使致敏上的抗体也容易从乳胶微球上脱落或者变性失活,而使用多肽缩合剂或交联剂则操作过程繁琐、耗时。胶体金法是由氯金酸(HAuCl4)在还原剂如白磷、抗坏血酸、枸橼
吸附法纯化病毒实验——红细胞吸附法
实验方法原理用于某些可与红细胞吸附的病毒的浓缩,如正粘病毒和副粘病毒,由于红细胞吸附法是特异的,故可达到浓缩并纯化的目的。实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液鸡红细胞悬液仪器、耗材烧杯水浴锅实验步骤用作吸附病毒的红细胞一般选择适宜动物的红细胞,常用的是鸡红细胞。基本步骤为:① 1%~3% 鸡
关于电泳法—纸电泳法的操作介绍
(1) 纸电泳法— 电泳缓冲液 枸橼酸盐缓冲液(pH3.0)。取枸橼酸 (C6H8O7·H2O)39.04g与枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H2O)4.12g,加水4000ml,使溶解。 (2) 纸电泳法— 滤纸 取色谱滤纸置1mol/L甲酸溶液中浸泡过夜,次日取出,用水漂洗至洗液的pH值不
标准曲线法和标准加入法,如何区分
在分析化学中,特别是仪器分析实验中,经常用某物质已校正的标准曲线来求相应物质的未知浓度。标准曲线通常是一条过原点的直线,被测组分含量可从标准曲线上求得。以分光光度计法为例,某特定波长的光经过某物质,可以被该物质吸收、反射等,并且其浓度(c)与吸光度(A)之间在一定浓度范围内符合朗伯-比尔定律。但有时
双向扩散法—平板法的相关信息介绍
平板法是鉴定抗原抗体的最基本、最常见的方法之一。平板法的基本步骤是:先在平板玻璃上倾注一均匀的琼脂薄层,凝固后在琼脂板上打孔,孔径一般为3mm,孔间距通常在3~5mm,孔的排列可呈梅花形、双排形或三角形等。在相对的孔中加入抗原或抗体,放置湿盒37~C18—24h后,琼脂中各自扩散的抗原和相对应的
冲击高压闪络法简称冲闪法
当故障电阻降低,形成稳定电阻通道后,因设备容量所限,直流高压加不上去,此时需改用冲击电压测试。直流高压经球间隙对电缆充电直至击穿,仍用其形成的闪络电弧产生短路反射。在电缆输入端需加测量电感L以读取回波。电波在故障点被短路反射,在输入端被L反射,在其间将形成多次反射。因电感L的自感现象,开始由于
化学转染法DEAE葡聚糖法应用
DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。
气相色谱法的分析法
分析方法实际上是在某一特定的气相色谱分析中使用的一系列条件。建立分析方法实际上是确定对于某一分析的最佳条件的过程。 为了满足某一特定的分析的要求,可以改变的条件包括进样口温度,检测器温度,色谱柱温度及其控温程序,载气种类及载气流速,固定相,柱径,柱长,进样口类型及进样口流速,样品量,进样方式等
蛋白定量BCA法-VS-Bradford法实验分析
精-确的蛋白质定量是蛋白质相关实验所必需的,这些实验涉及分子生物学,细胞生物学,生物化学,发育生物学和神经科学的研究课题。依托不同的科学原理,目前已经发展出多种不同的蛋白测定方法,科研工作者广泛使用的方法比如紫外吸收法(UV),双缩脲法,考马斯亮蓝法(Bradford)、Folin-酚试剂法(Low
速测卡法(纸片法)测定农残
(1)原理 胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯(红色)水解为乙酸与靛酚(蓝色),有机磷或氨基甲酸酯类农药对胆碱酯酶有抑制作用,使催化、水解、变色的过程发生改变,由此可判断出样品中是否含有有机磷或氨基甲酸酯类农药的存在。 (2)试剂 ①速测卡:固化有胆碱酯酶和靛酚乙酸酯试剂的纸片(广州天河绿洲生
滴定分析法分类介绍碘量法
碘量法碘量法是以I2的氧化性和I-的还原性为基础的氧化还原滴定法。碘量法分为直接碘量法和间接碘量法。(1)直接碘量法 直接碘量法也称碘滴定法。它是利用I2的氧化性直接滴定一些还原性较强的物质,如和维生素C等。由于I2的氧化性较弱,所以直接碘量法不如间接碘量法应用广泛。(2)间接碘量法 间
知识分享:质粒提取实验步骤
实验原理 现在较常用的质粒提取方法有三种:碱裂解法、煮沸法和去污剂裂解法,前两种方法较为剧烈,适用于较小的质粒(<15Kb),而去污剂裂解法则比较温合,一般用于分子量较大的质粒(>15Kb)。 碱裂解法是一种最广泛使用的制备质粒DNA的方法。其原理为:染色体DNA远大于质粒DNA,且
色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别
一、使用不同:除了内标法和归一化法,常用的气相色谱方法还有外标法。与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与
色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别
一、使用不同:除了内标法和归一化法,常用的气相色谱方法还有外标法。与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与
蒸馏法、过滤法、沉淀法的适用范围和所起作用
1.蒸馏法一般用于体系溶剂较多,且较易除去时(大部分为稀溶液)。有时溶剂沸点较高,但是也用此法,这时用减压蒸馏。用于回收溶剂,或者得到浓缩的溶液2.过滤法一般用于有较多固体颗粒,过滤除去杂质、或者得到固体产品3.沉淀法用于除去杂质离子,如除去加入硝酸银氯离子,加入氯化钡除去硫酸根离子等。也用于离子的
蒸馏法、过滤法、沉淀法的适用范围和所起作用
1.蒸馏法一般用于体系溶剂较多,且较易除去时(大部分为稀溶液)。有时溶剂沸点较高,但是也用此法,这时用减压蒸馏。用于回收溶剂,或者得到浓缩的溶液2.过滤法一般用于有较多固体颗粒,过滤除去杂质、或者得到固体产品3.沉淀法用于除去杂质离子,如除去加入硝酸银氯离子,加入氯化钡除去硫酸根离子等。也用于离子的
色谱分析中归一化法、外标法、内标法的区别
一、使用不同:除了内标法和归一化法,常用的气相色谱方法还有外标法。与内标法相比,外标法不是把标准物质加入到被测样品中,而是在与被测样品相同的色谱条件下单独测定,把得到的色谱峰面积与被测组分的色谱峰面积进行比较求得被测组分的含量。外标物与被测组分同为一种物质但要求它有一定的纯度,分析时外标物的浓度应与
细胞活性测定方法介绍与使用探讨(MTT法、XTT法、CCK8法...
细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、3H放射性同位素掺入法、MTT法等。其中MTT法以其快速简便,不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但MTT法形成的Formazan为水不溶性的,需要加有机溶剂溶解,由于在去上清操作时会有可能带走小部分的Form