免疫组化SABC法与SV法
实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中，分子量67000。是一种碱性蛋白质，具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和素是一种从链霉菌(Streptomyces Avidinii)培养物中所提取的蛋白质，分子量47000，不含糖链，等电点IP=6.0-6.5。和亲和素一样，也有四个生物素结合位点，亲和力高达10-15M。和亲和素相比，链霉亲和素更为完美。现在经过改进的亲和素等电点IP可以达到7.0，明显地消除了原碱性蛋白特征所引起的非特异性吸附。生物素是一种水溶性维生素(即维生素H)，分子量244。生物素活化后，可以标记抗体和酶而不影响其活性。链霉亲和素—酶复合物可以起到放大信号的作用，这是SABC具有高度敏感性的基础。SV(Super ......阅读全文
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC温箱中，将多聚赖氨
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 ℃温箱中，将多聚赖
免疫组化SABC法操作流程
1、洗载玻片将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中，目的是为了是载玻片上的硅胶等除去，同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整，便于组织吸附，然后置于清水中清洗，除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4（大约冲一个小时左右），再将载玻片浸泡于酒精之中， 然后放到架子上，置于37 oC温箱中，将多
免疫组化SABC法与SV法
实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中，分子量67000。是一种碱性蛋白质，具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和
免疫组化SABC法与SV法
实验概要本文介绍了免疫组化SABC法与SV法。实验原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法。亲和素(Avidin)存在于鸡蛋中，分子量67000。是一种碱性蛋白质，具有对生物素近乎于共价键的结合力。链霉亲和
免疫组化染色方法（SP法和SABC法）
SP法1）脱蜡、水化；2）PBS洗2～3次各5分钟；3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室温静置10分钟；4）PBS洗2～3次各5分钟； 5）抗原修复；6）PBS洗2～3次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗50μl，室温静置1小时或者4℃过夜或者
免疫细胞化学SP法与SABC法的区别
免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。免疫组织化学的方法有多种，其实都大同小异，不同点只是在于显色基团！SP法1）脱蜡、水化；2）PBS洗2～3次各5分钟；3）3%H2O2（80%
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法，它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质，相对分子质量60000，不含
SABC法亲和素与生物素系统的操作流程
实验概要本实验介绍了SABC法亲和素与生物素系统的操作步骤。实验原理SABC法或称S-P法、LSAB法，它是采用生物素标记的第二抗体与结合有HRP或AKP酶的链霉亲和素(streptavidin)连接来测定细胞及组织中的抗原。链霉亲和素是一种从链霉菌培养物中提取的蛋白质，相对分子质量60000，不含
免疫组化的二抗还有区别的么！要怎么选？
免疫组化大家基本上都做过，你知道有二抗，也应该知道免疫组化的原理就是一抗结合到目标蛋白，再有二抗来进行信号放大，大概是这样： 但是你知道二抗的信号放大实际上有多种方法……这就需要你进行二抗标记方法的选择，最简单的二抗标记方法是直接法： 就是直接在二抗上标记酶，比如HRP，来进行显色，这样的二
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
凋亡相关基因－Bax的表达产物的检测
操作： 1、 培养细胞（96孔板，每组3正常、3损伤、3损伤恢复） 2、 PBS洗，5min X 3次 (小心) 3、 甲醇固定10min 4、 PBS洗，5min X 3次 5、 加入封闭液（1:10） 25µl，37 ℃，30min，吸去上清液，滤纸吸干 6、 加一抗（1
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
小鼠脑片免疫组织化学（ABC法）实验——免疫组化法
实验方法原理通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位，还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料冷冻切片试剂、试剂盒一抗；二
小鼠脑片免疫组织化学（ABC法）实验
实验方法原理 通过特异的抗原抗体反应标记上可见的显示物系统来检查细胞及组织上原位抗原或抗体成分的方法。在光学显微镜、荧光显微镜或电子显微镜下观察其性质定位，还可以利用细胞分光光度计、图像分析仪、共聚焦显微镜等进行细胞原位半定量测定。免疫组织化学的显著特点是特异性强。实验材料 冷冻切片试剂、试剂盒 一
石蜡切片免疫组化实验4
实验方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法，是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法：一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC（链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素）+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从
Bovine－Ig(Total－Immunoglobulin)－ELISA－Kit使用说明（二）
Note: Samples to be used within 5 days can be stored at 4°C, besides that, samples must be stored at -20°C (assay ≤1 month) or -80°C(assay≤2 month
DNA荧光组织化学染色的方法
一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫荧光组织
石蜡切片免疫组化实验
实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头
双重染色法免疫荧光组织化学染色步骤
1．一步双染色法先将两种荧光标{己抗体按适当比例混合(A+B)，按直接法进行染色。2．二步双染色法先用TRITC标记的A抗体进行免疫荧光染色，再用FITC标记的B抗体染色，根据两种抗体的动物种属不同，可用直接法也可用间接法，结果A抗原呈现橘红色荧光，而B抗原呈现黄绿色荧光。在应用中，常用的方法是免疫
免疫组化(ICC)原理和IHC/ICC实验方法2
3、操作流程（1）脱蜡和水化脱蜡前，应将组织芯片在室温中放置60分钟或60℃恒温箱中烘烤20分钟。1）组织芯片置于二甲苯中浸泡10分钟，更换二甲苯后再浸泡10分钟；2）无水乙醇中浸泡5分钟；3）95%乙醇中浸泡5分钟；4）70%乙醇中浸泡5分钟；（2）抗原修复用于福尔马林固定的石蜡包埋组织芯片。1）
免疫细胞化学方法
1、细胞爬片；2、PBS洗3次×5min；3、4%多聚甲醛固定30min（4度冰箱中）；4、3%H2O2 封闭内源性过氧化物酶，室温下10min；5、PBS洗3次×5min；6、10%动物血清封闭，室温下10min；7、甩去血清（不洗），一抗4℃ ；细胞8、PBS洗3次×5min；9、二抗室温下1h
免疫组化主要步骤
免疫组化主要步骤1. 洗载玻片:将载玻片置于重铬酸钾和浓H2SO4混合液中,目的是为了是载玻片上的硅胶等除去,同时使一些肉眼看不见的凹凸不平的表面变平整,便于组织吸附,然后置于清水中清洗,除去残余的重铬酸钾和浓H2SO4(大约冲一个小时左右),再将载玻片浸泡于酒精之中, 然后放到架子上
细胞免疫组化不着色的原因
下面是我们做细胞免疫组化的大致步骤，给楼主做一下参考吧：1、将爬有细胞的盖玻片，PBS洗3次，每次3分钟。2、加入4％多聚甲醛，固定10分钟，PBS洗3次。3、用含0.2％TritonX-100 的PBS溶液透化固定后的细胞3分钟，PBS洗涤细胞3次。4、在Parafilm膜上滴加5％BSA封闭液5
免疫组化操作规程
（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅 （二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化操作规程
免疫组化操作规程（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅（二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化实验原理和步骤（一）
实验原理：抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部
免疫组化操作规程
（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅 （二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。
免疫组化的实验试剂及实验步骤
一、试剂（1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。（2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。（3）0.
免疫组化操作规程
（一）、仪器设备 1）18cm不锈钢高压锅或电炉或医用微波炉； 2）水浴锅（二）、试剂 1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。 2）0.01mo