TUNEL检测的基本信息介绍
基因组DNA断裂时,暴露的3’-OH可以在末端脱氧核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上荧光素 (FITC) 标记的dUTP (fluorescein-dUTP) ,从而可以通过荧光显微镜或流式细胞仪进行检测,这就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法检测细胞凋亡的原理。......阅读全文
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和方法
细胞凋亡中染色体DNA的断裂是个渐进的分阶段的过程,染色体DNA首先在内源性的核酸水解酶的作用下降解为50-300kb的大片段。然后大约30 ﹪的染色体DNA在Ca ² 和Mg² 依赖的核酸内切酶作用下,在核小体单位之间被随机切断,形成180~200bp核小体DNA多聚体。
TUNEL细胞凋亡检测试剂盒说明
TUNEL (TdT mediated dUTP Nick End Labeling)是检测细胞凋亡的经典方法。本试剂盒采用TUNEL法,应用高活性的基因重组末端脱氧核糖核苷酸转移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT)在凋亡细胞断裂的DNA 3’-
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
TUNEL分析实验
组织切片的 TUNEL 染色 TUNEL 染色的流式细胞计量术分析 贴壁细胞的 TUNEL 染色 实验材料 组织
Detection-by-TUNEL-labeling
In Situ Cell Death (Apoptosis) Detection by TUNEL labelingby Boehringer Mannheim (Catalog No. 1684809), modified by Josiah N. Wilcox,José C. Rodriguez
TUNEL分析实验——TUNEL-染色的流式细胞计量术分析
实验材料悬浮细胞试剂、试剂盒PBS甲醛柠檬酸钠溶液仪器、耗材流式细胞计量仪实验步骤1. 凋亡诱导之后,200 g 离心 5 分钟收集 1X106 悬浮细胞,用冷的 PBS 洗 2 次,重复离心。2. 用 2 ml 2% 的甲醛 PBS 溶液固定细胞沉淀,室温下在水平摇床上孵育 30 分钟。3. 20
TUNEL-PROCEDURE-IN-BOVINE-EMBRYOS
Materials 8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go h
TUNEL-PROCEDURE-IN-BOVINE-EMBRYOS
Materials 8% (w/v) paraformaldehyde stock solution: Dissolve 8 g of powdered paraformaldehyde in 100 ml water. Heat and stir (55-60 C – do not go h
关于睾酮检测的基本信息介绍
睾酮(Testo)是人体内主要性激素之一。男性睾酮90%左右来自睾丸间质细胞,其余部分在肾上腺皮质和其他组织生成;女性体内的睾酮,由卵巢间质细胞和门细胞与肾上腺皮质网状带合成的约占50%,其余50%主要由雄烯二酮在肝脏、脂肪、皮肤等组织转换而来,是卵巢内雌二醇合成的前体,对女性性腺功能的维持有一
血清IGE检测的基本信息介绍
IgE和IgG4(以下只用IgE代表)是介导Ⅰ型变态反应的抗体,因此检测血清总IgE和特异性IgE对Ⅰ型变态反应的诊断和过敏原的确定很有价值。 正常情况下血清IgE仅在ng/ml水平,用常规测定IgG或IgM的凝胶扩散法检测不出IgE,必须用高度敏感的放射免疫测定法及酶联免疫测定法进行检测。
2-TdT原位凋亡检测(TUNEL法)试剂盒说明
DNA断裂是细胞凋亡的重要特征,在凋亡初期,DNA可断裂形成200-250kb或30-35kb 的大片段;晚期则可进一步在核小体间断裂,形成180-200bp的DNA断裂碎片。TUNEL(TdT mediated dUTP Nick End Labeling,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUT
TUNEL法检测细胞凋亡实验原理和经验总结
一、TUNEL法的实验原理细胞凋亡中, 染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3'-OH末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶(TdT)的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3'-末端,从而可进行凋亡细胞的检测,这类方法称为脱
Apoptosis-TUNEL-Assay-(frozen-sections)
Protocol for Frozen Sections:Warm 150ml 4% Paraformaldehyde/1x PBS to RT. Fix slides in it, 20 min., RT.1x PBS rinse, 2 times.1x PBS, 30 min., RT. Beg
Apoptosis-TUNEL-assay-(Paraffin-Sections)
Protocol for Paraffin Sections:Dewax paraffin sections:Incubate slides, 55°C, 30 min.Xylenes, 2 times, 2 min. each100% EtOH, 2 times, 2 min. each95% E
感染免疫检测的基本信息介绍
人的免疫力随结核分支杆菌或其成分在体内存在而存在,故被称为感染免疫,或称有菌免疫,一旦体内结核分支杆菌或其成分全部消失,免疫力也随之消失。因此要进行感染免疫检测。 只要采用各种免疫学方法,和化学发光法结合,需要时还会进行粪便和尿的检测。一般是血清的测定,利用凝集法和免疫学法结合。
关于抗体检测的基本信息介绍
特异性抗体检测的目的首先是协助临床诊断,在某些疾病中亦是观察疗效及预后的一个指标,预防接种效果的观察,以及传染病流行病学调查中,特异性抗体的检测也具有特殊的、重要的意义。 在免疫应答中,细胞免疫和体液免疫是两个密切相关、互为调节的生理过程,对这两种免疫反应都有许多检测方法,但迄今为止,在临床检
热导检测器的基本信息介绍
热导检测器(TCD)又称热导池或热丝检热器,是气相色谱法最常用、最早出现和应用最广的一种检测器。热导检测器的工作原理是基于不同气体具有不同的热导率。 影响热导池灵敏度的因素主要有桥路电流、载气性质、池体温度和热敏元件材料及性质。
关于血清钾检测的基本信息介绍
人体内98%的钾离子存在于细胞内,2%的钾离子存在于细胞外液。细胞外液钾含量虽然比例很低,但对维持人体的正常生理功能却极为重要。人体内的钾离子主要来自于食物中的钾盐,每日摄取的钾90%由尿排出。人体内的钾保持着动态平衡,钾参与保持机体的正常渗透压和酸碱平衡,参与糖及蛋白质的代谢,保证神经肌肉的正
tunel和dapi双染的意义
为维持内环境稳定,能够与DNA强力结合的荧光染料。1、细胞凋亡是指为维持内环境稳定,生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。2、DAPI,即4',6-二脒基-2-苯基吲哚,是一种能够与DNA强力结合的荧光染料,常用于荧光显微镜观测
凋亡聚焦:选择合适的TUNEL分析
考虑检测方法 TUNEL分析一般采用显色法或荧光检测法。每一种都有其各自的优缺点,因此选择哪一种取决于您的需求。荧光检测感更为灵敏,但难以保留信号。由于成像时的光漂白,且随着时间的流逝,荧光信号会逐渐丧失。荧光信号也会有更高的背景问题,这要取决于组织类型。显色分析适用于组织切片,因为可以使
TUNEL检测出现非特异性荧光标记的原因
a. 有些细胞或组织,例如平滑肌细胞或组织,nuclease或polymerase的酶活性水平较高,易导致出现非特异性的荧光标记。解决方法是,取细胞或组织后立即固定并且要充分固定,以阻止这些酶导致假阳性。b. 使用了不适当的固定液,例如一些酸性固定液,导致出现假阳性。建议采用推荐的固定液。c. TU
关于rohs检测仪的基本信息介绍
RoHS检测仪就是欧盟RoHS测试标准的检测仪器。简单的说就是测试铅Pb,镉Cd,汞Hg,六价铬Cr6+,多溴二苯醚PBDE,多溴联苯PBB六种有害物质的仪器。 rohs指令是国家刚颁布的《电子电气设备中限制使用某些有害物质指令 》的简称。顾名思义,RoHS检测仪是一种检测ROHS的检测仪,原
关于免疫学检测的基本信息介绍
免疫学检测是机体识别“自身”与“非己”抗原,对自身抗体形成天然免疫耐受,对“非己”抗原产生排斥作用的一种生理功能的检测。正常情况下,这种生理功能对机体有益,可产生抗感染、抗肿瘤等维持机体生理平衡和稳定的免疫保护作用。在一定条件下,当免疫功能失调时,也会对机体产生有害的反应和结果,如引发超敏反应、
关于衣原体检测的基本信息介绍
衣原体是一种既不同于细菌也不同于病毒的一种微生物,属于原核生物,即细胞内没有形成核膜的细胞核。衣原体是惟一的具有两阶段繁殖周期的严格的细胞内寄生的原核生物。分为代谢不活跃的细胞外期和增殖性细胞内期两阶段。依其抗原性质、形态和所含糖原的不同分为:沙眼衣原体、鹦鹉热衣原体、肺炎衣原体、兽类衣原体(对
Whole-mount-TUNEL-analysis-of-Xenopus-embryos
Fixation and pretreatmentDejelly albino embryos carefully in 2% Cystein (pH 7.8).Remove the vitellin membrane with two pairs of tweezers (or c
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的
TUNEL染色凋亡细胞是什么颜色的(1)石蜡包埋的组织切片预处理:将组织切片置于染色缸中,用二甲苯洗两次,每次5min.用无水乙醇洗两次,每次3min.用95%和75%乙醇各洗一次,每次3min.用PBS洗5min 加入蛋白酶K溶液(20ug/ml),于室温水解15min,去除组织蛋白.用蒸馏水洗4
关于抗精子抗体检测的基本信息介绍
抗精子抗体(anti-spermatzoon antibody,AsAb)有IgG、IgA、IgM、IgE四种类型,可存在于血清、精浆、宫颈黏液或精子的表面。血清中以IgG、IgM为主,而精浆中以IgA、IgG为主。 对精子的作用分为凝集性、结合性和制动性三类。作用机制有: ①精子与凝集性抗
局部放电检测仪的基本信息介绍
电气设备产生局部放电时,会产生电磁波,电磁波在向外传播时会生成一个暂态的对地电压信号。这个信号的大小与局部放电的激烈程度及放电点的远近有直接关系。可以利用专门的探测器进行检测,这种探测器就是局部放电检测仪。