关于异硫氰酸胍的提取介绍
异硫氰酸胍法提取制备模板核酸此法主要用于RNA的提取.标本为组织细胞及血清等. 1、异硫氰酸胍消化液 异硫氰酸胍4mol/L 柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸钠0.5% β-巯基乙醇0.1mol/L 2、消化方法:用50~100ul细胞悬液及血清,加等体积的异硫氰酸胍消化液振混匀后,或65℃1小时,或室温放置数分钟,然后加1/10体积的3mmol/LpH5.2的醋酸钠缓冲液,再加等体积的酚:氯仿,用力振摇约10s,10000r/min,离心5min,取上清加等体积异丙醇-20℃放置3h后,14000r/min离心15min,沉定用75%冰冷乙醇离心洗涤1~2次,真空干燥,沉淀用TE缓冲液溶解即可用于逆转录PCR扩增,或放-20℃保存。......阅读全文
关于异硫氰酸胍的提取介绍
异硫氰酸胍法提取制备模板核酸此法主要用于RNA的提取.标本为组织细胞及血清等. 1、异硫氰酸胍消化液 异硫氰酸胍4mol/L 柠檬酸钠(PH7.0)25mmol/L 十二烷基肌酸钠0.5% β-巯基乙醇0.1mol/L 2、消化方法:用50~100ul细胞悬液及血清,加等体积的异硫氰
用异硫氰酸胍和有机溶剂提取RNA
收集细胞,离心5000r/min ,5分钟,弃上清,加入异硫氰酸胍变性液(异硫氰酸胍4mol/L;柠檬酸钠25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol/L)500ml,混匀,振荡10秒,加2 mol/L醋酸钠50ml,水饱和酚500m l和氯仿/异戊醇(49:1)100m l
用异硫氰酸胍(guanidinium-isothiocyanate)和有机溶剂提取RNA
收集细胞,离心5000r/min ,5分钟,弃上清,加入异硫氰酸胍变性液(异硫氰酸胍4mol/L;柠檬酸钠25mmol/L,Sarkosy10.5%,β-巯基乙醇0.1mol /L)500ml,混匀,振荡10秒,加2 mol/L醋酸钠50ml,水饱和酚500m l和氯仿/异戊醇(49:1)1
异硫氰酸胍的基本信息介绍
简称 GITC 外观:白色结晶 熔点:115-120℃ PH(4%水溶液):4.5-7.0 紫外吸收(300nm,6M):≤0.1 abs unit 紫外吸收(410nm,6M):≤0.05abs unit 干燥失重:≤0.5% 用途:用于变性裂解细胞;提取RNA和DNA。无RNA
动物组织细胞总RNA的提取(异硫氰酸胍法和TRIzol法)1
一、实验原理RNA是基因表达的中间产物,存在于细胞质与核中。对RNA进行操作在分子生物学中占有重要地位。获得高纯度和完整的RNA 是很多分子生物学实验所必需的,如Northern杂交、cDNA合成及体外翻译等实验的成败,在很大程度上取决于RNA的质量。由于细胞内的大部分RNA是以核蛋白复合体的形
动物组织细胞总RNA的提取(异硫氰酸胍法和TRIzol法)2
(二)TRIzol试剂提取RNA1.取新鲜动物组织0.1~0.2g置于组织匀浆器中,加入预冷的Trizol液 1ml 于玻璃匀浆器中,在冰浴中迅速匀浆15~30s,以充分研碎组织。然后将细胞悬浮液吸入另一1.5ml Ep管中,于室温下静置5min。2.加入200μl氯仿,剧烈振摇15s混匀后,室温静
关于香菇多糖的提取的提取方法介绍
香菇多糖属于极性大分子化合物,其特定的结构与免疫活性密切相关。一般认为:增加多糖溶解度有利于提高其生理活性;中等相对分子质量多糖的活性超过过高的或过低的相对分子质量多糖;可溶于热水的多糖被证实有抗肿瘤活性。目前香菇多糖的提取多采用热水及稀碱溶液,避免在强酸、碱溶液中进行,否则极易造成多糖中糖苷键
关于碳醇提取的要求和提取介绍
1、碳-醇提取的要求: 质量能保证的纯工业用醇,可用于提取乙醇。如没有乙醇,也可以用试剂纯的甲醇。要取1升溶剂蒸馏并蒸干,来检查它的杂质含量。只要残渣小于5毫克,这种溶剂就可以用。 2、碳-醇提取的乙醇提取: 从碳中除去残存的氯仿的方法,是往碳上吹入已预净化的温热空气(在索氏提取器内)并通
关于溶剂提取法的介绍
一般指从 中草药中提取有效部位的方法,根据中草药中各种成分在溶剂中的 溶解性,选用对活性成分溶解度大、对不需要溶出成分溶解度小的溶剂,而将有效成分从药材组织内溶解出来的方法叫溶剂提取法。当溶剂加到中草药原料中时,溶剂由于扩散。 渗透作用通过细胞壁透入细胞内,溶解可溶性物质,而造成细胞内外的浓度差
关于核蛋白的提取方法介绍
细胞和动物组织核蛋白的提取方法 产品组成 310001 310002 规格 50 assays 100 assays Buffer A (Cytoplasmic Extraction Reagent) 10ml 20ml Buffer B (Nuclear Extraction Reag
关于超声提取法的优点介绍
1、超声提取法— 提取效率高 超声波独具的物理特性能促使植物细胞组织破壁或变形,使中药有效成分提取更充分,提取率比传统工艺显著提高达50—500%; 2、超声提取法— 提取时间短 超声波强化中药提取通常在24—40分钟即可获得最佳提取率,提取时间较传统方法大大缩短2/3以上,药材原材料处理
关于碳醇提取的内容介绍
碳-醇提取,用碳吸收法测量水中总有机污染物,当大量水样在一定条件下通过活性碳装置后,取出含有吸附物的活性碳,干燥后用氯仿提取,再用蒸馏法除去氯仿后称量污染物残渣,此值称为碳—氯仿提取物(CCE)。在氯仿提取以后再用乙醇提取,然后蒸馏除去乙醇、称重,可测得另一些有机物,此值叫碳—醇提取物(CAE)
关于蔗糖酶的提取方法介绍
1、酵母提纯 酵母离心(8 000 r/min)15 min后收集菌体。将收集到的菌体用蒸馏水洗涤,离心,再洗涤,重复数次,直到菌体呈白色,倾出上清液,将不含杂质的干净的酵母保存待用。 2、粗酶液的制备 准确称取离心分离后的酵母10 g,加入60 mL 0.5 mmol/L的SDS溶液溶
关于叶黄素的提取方法介绍
1、干燥法 有一种新型的滚筒烘干机,烘干和重击金盏花和叶黄素。当摆锤的波动率在70%~90%时,叶黄素的含量由干燥时长决定;当干燥的时长一致时,70℃下所得叶黄素的量要比60℃干燥条件下少 。 2、有机溶剂抽提法 有机溶剂抽提法是应用最多的提取叶黄素方法。存在于万寿菊中的叶黄素在乙醇中溶解
关于黄芩苷的提取工艺介绍
将黄芩投入12倍(8倍)热水中煮沸30分钟,合并两次煎液,用盐酸调节pH l~2,在80℃下保温30分钟,放置,过滤,收集沉淀,加95%乙醇洗2~3次.抽滤,60℃下干燥,得黄芩甙粗品。将粗品混悬予10倍量水中,40%氢氧化钠调节pH至6.5-7.0,加活性炭,80℃保温30分钟,加等量乙醇,抽
关于索氏提取器的优点介绍
从固体物质中萃取化合物的一种方法是,用溶剂将固体长期浸润而将所需要的物质浸出来,即长期浸出法。此法花费时间长、溶剂用量大、效率不高。 在实验室多采用脂肪提取器(索氏提取器)来提取。脂肪提取器(如图1《索氏提取器》所示) 就是利用溶剂回流及虹吸原理,使固体物质连续不断地被纯溶剂萃取,既节约溶剂,
关于柠檬酸的提取过程介绍
发酵结束后,要对发酵醛进行处理。表面发酵要即时把菌盖和发酵液分开,再用少量水洗涤菌盖和浅盘,发酵液和洗水合并;固体发酵中的柠檬酸要用水浸出,水温80℃,浸出2~3次,浸水合并。发酵酸用压滤机过滤,滤液和洗水合并,打入滤液槽。柠檬酸与钙盐和钙碱反应生成柠檬酸钙从液相中沉淀出来,与可溶性杂质分开。酸
关于鱼精蛋白的提取和纯化介绍
1、鱼精蛋白的提取: 成熟精巢组织——均浆——硫酸酸解——NACL溶液提取——四层纱布过滤——加乙醇沉淀杂蛋白——离心——上清液——加TCA溶液沉淀——离心——鱼精蛋白硫酸盐 [1] 2、鱼精蛋白的纯化: 分离提取后的鱼精蛋白必须纯化。利用鱼精蛋白的电荷和分子大小,分别采用聚丙烯酰胺等电聚
关于磁珠法核酸提取的介绍
磁珠法核酸提取试剂盒,是生物科学和纳米材料科学二者合一的高新技术产品,是我国核酸提取纯化技术的一次大的突破,它彻底的解决了我国核酸提取纯化长期依赖进口的局面。 自沃森、克里克的DNA双螺旋模型诞生,生物学进入到了一个全新的时代,在生物学界言必DNA,论必中心法则,对DNA的提取成为生物医药领域
关于人参皂苷的提取方法介绍
一、一般取法 水提取法,有机溶剂提取法,渗漉法,蒸馏法,超声浸渍法。 二、萃取法 超临界流体萃取技术是近代化工分离中的一种新型分离技术,超临界CO2萃取是采用CO2作溶剂,超临界状态下的CO2流体密度和介电常数较大,对物质溶解度很大,并随压力和温度的变化而急剧变化,因此,不仅对某些物质的溶
关于虾青素的提取方法介绍
目前虾青素的生产主要有化学合成和天然提取两种方式,化学合成的虾青素不仅价格昂贵,而且分子结构生物学功能、应用效果及生物安全性能方面和天然虾青素存在显著差异,进而促使天然虾青素的提取逐渐占据主导地位。 随着对虾青素提取方法研究不断深入,虾青素生产工艺得到不断优化和升级,尤其是在虾青素的分离和提纯
关于胶原蛋白的碱法提取的介绍
碱法提取即利用一定浓度的碱在一定的外界条件下提取胶原蛋白,碱处理法中常用的处理剂为石灰、氢氧化钠、碳酸钠等,用氢氧化钠浸提时效果较好。一般的是把样品匀浆后,用碱溶液多次溶胀后,再离心提取。但由于易引起蛋白质变性,如胶原肽键水解,含羟基、疏基的氨基酸全部被破坏;所得产物等电点pH值较低,天冬酞胺和
关于柚皮苷的提取方法的介绍
柚苷易溶于酒精和碱液,也能溶于热水,根据这一特性,通常采用碱法和热水法提取。其生产工艺流程如下:柚皮→粉碎→浸石灰水或热水浸提→过滤→冷却沉淀→分离→干燥和粉碎→成品。 1、热水法 热水法提取过程如下:柚皮粉碎后,加3~4倍的水,加热煮沸30min,压榨得滤液。此步骤可重复2~3次。将滤液浓
关于青蒿素的提取纯化的介绍
分离纯化工艺主要有溶剂外加能量协助提取法、提取重结晶法、超临界CO2萃取法和溶剂提取层析法。 溶剂提取重结晶法一般采用的溶剂汽油法,乙醇法和碱水提取酸沉淀法进行生产,此类方法明显增加了青蒿素植物的有效利用率。 碱水提取酸沉淀法:取一定量的青蒿枝叶干粉加入乙醇搅拌浸提,得到乙醇提取液,减压干燥
关于甾体皂甙的提取分离的介绍
皂甙是一类极性较强的大分子化合物,不容易结晶,易溶于水和醇,难溶于有机溶剂,而且在同一植物中往往有很多结构相近的皂甙共存,更增加了分离纯化的困难。一般采取先用甲醇或含水乙醇提取,然后将醇浸膏悬浮于水,用水饱和的正丁醇萃取,即得到总皂甙。粗皂甙的分离除使用常规的正相硅胶柱层析外,还可选用反相硅胶、
组织和细胞RNA的制备——(异硫氰酸胍法)
[试剂主要]1.CSB缓冲液:42mM柠檬酸钠;0.83% N-lauryl sarcosine(十二烷基,N甲基甘氨酸钠);0.2 mM β-巯基乙醇。2.变性液:异硫氰酸胍(终浓度 4 M)25g、CSB缓冲液 33ml,混合直至完全溶解,可在65℃助溶。4℃保存备用。3.2 M乙酸钠:pH 4
关于索氏提取器的应用举例介绍
索氏提取器应用举例:萃取法提取粗咖啡因。具体步骤如下: 用滤纸制作圆柱状滤纸筒,称取10g茶叶,用研钵捣成茶叶末,装入滤纸筒中,将开口 端折叠封住,放入提取筒中,将150mL圆底烧瓶安装于电热套上,放入2粒沸石,安装好索氏提取装置,从仪器上部的回流冷凝管中加入够两次虹吸量的95 %乙醇(当流入
关于提取胡萝卜素的鉴定介绍
1、制备滤纸条:取18cm×30cm滤纸条,于距底端2cm处划基线,取ABCD四个点。 2、点样:用最细注射器针头分别吸取标准样品和提取样品在A、D和B、C点样,吹干。 3、层析:将滤纸卷成筒状并固定,放到盛有1cm深石油醚的密封容器中层析。 4、观察:取出滤纸条,使石油醚充分挥发后观察层
关于酵母葡聚糖的其他提取法介绍
传统的酸碱处理制备酵母葡聚糖的方法,酸碱用量大,工艺繁琐,劳动强度大。在提取中用到酸碱,容易引起多糖的降解,而且影响到葡聚糖的生理活性。
关于超声波提取法的特点介绍
超声波提取法是采用超声波辅助溶剂进行提取,声波产生高速、强烈的空化效应和搅拌作用,破坏植物药材的细胞,使溶剂渗透到药材细胞中,缩短提取时间,提高提取率。 1、可作生物和植物细胞破碎; 2、可作生物和植物有效成份萃取; 3、可作中草药有效成份的低温提取; 4、可作BCR元素形态萃取; 5