PCR污染的监测方法
1.阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好,经各种鉴定是该产物的标本,如以重组质粒为阳性对照,其含量宜低不宜高(100个拷贝以下),但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本,其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR试剂经自己使用稳定,检验人员心中有数时,在以后的实验中可免设阳性对照。2.阴性对照:每次PCR实验务必做阴性对照。它包括①标本对照:被检的标本是血清就用鉴定后的正常血清作对照;被检的标本是组织细胞就用相应的组织细胞作对照。②试剂对照:在PCR试剂中不加模板DNA或RNA,进行PCR扩增,以监测试剂是否污染。3.重复性试验。4.选择不同区域的引物进行PCR扩增。......阅读全文
PCR污染的监测方法
1.阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好,经各种鉴定是该产物的标本,如以重组质粒为阳性对照,其含量宜低不宜高(100个拷贝以下),但阳性对照尤其是重组
PCR污染的监测
一个正规的实验室,要时刻注意监测实验室的污染情况。了解实验室有无污染,污染原因,污染程度,以便采取有效措施,防止和消除污染。一般通过阴阳性对照检测污染情况。1、阴性对照: 不将模板DNA或RNA加入到PCR试剂中,进行PCR扩增,对试剂是否污染进行监测。阴性水样参与核酸提取和扩增监测整个试验
PCR污染及防止污染的方法
污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 (二)PCR试剂的污染:主
PCR污染的防止方法
(一)合理分隔实验室:将样品的处理、配制PCR反应液、PCR循环扩增及PCR产物的鉴定等步骤分区或分室进行,特别注意样本处理及PCR产物的鉴定应与其它步骤严格分开。最好能划分①标本处理区;②PCR反应液制备区;③PCR循环扩增区;④PCR产物鉴定区。其实验用品及吸样枪应专用,实验前应将实验室用紫外线
PCR污染问题怎么监测和预防
这两天正好看到一个“2012年全国公安司法及血液中心标准DNA实验室装备展览会”的宣传文章说这个问题,复制来给你看看吧。PCR室污染监测及防御2012年全国司法及血液中心国际标准DNA实验室观摩会将在明年6月于青岛国际会展中心举行,这次观摩会秉着打造全球顶尖展会的理念,将展示具有世界一流水平,符合国
利用PCR技术对污染的监测的内容
一个好的实验室,要时刻注意污染的监测,考虑有无污染是什么原因造成的污染,以便采取措施,防止和消除污染。 对照试验 一、阳性对照:在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照,它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中
生物污染的主要监测方法
(1)光谱分析法(可见-紫外分光光度法,红外分光光度法 ,原子吸收分光光度,发射光谱法 ,“X”射线荧光光谱)(2)色谱分析法(薄层层析法,气相色谱法 ,高效液相色谱法) 可用于测定多种农药,含汞、砷、铜或酚类杀虫剂,芳香烃、共轭双键等不饱和烃,以及某些重金属和非金属(如氟、氰等)化合物等 。
解决PCR实验室污染的方法
(1)开窗通风:如在短时间内要消除实验室污染,开窗通风促进实验室内空气流通,使停留在室内的核酸排放到室外。 (2)紫外灯照射:将实验室内好生物安全柜内物品平铺,打开离心机内盖,然后将紫外等打开照射12-24小时,通风12小时以上。 (3)消毒液降解核酸:及时用1%-2%的次氯酸钠擦拭操作
大气污染监测的方法
大气污染监测是指对大气中的污染物进行系统、持续的观测、测定和分析,以了解大气污染的状况、来源、变化趋势以及对环境和人类健康的影响。其主要包括以下几个方面:监测指标:常见的监测污染物有颗粒物(PM2.5、PM10)、二氧化硫(SO₂)、氮氧化物(NOₓ)、一氧化碳(CO)、臭氧(O₃)、挥发性有机物(
PCR仪反应液污染处理方法
PCR仪是一种利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。因而,在PCR仪使用时对于环境要求很高,为了避免实验未完成前可能出现的任何污染反应液的情况,应该了解关于反应液受到污染时,反应液处理方法: l 紫外照射法:未加模板
PCR仪反应液污染处理方法
PCR仪是一种利用DNA聚合酶对特定基因做体外或试管内InVitro的大量合成,基本上它是利用DNA聚合酶进行专一性的连锁复制。因而,在PCR仪使用时对于环境要求很高,为了避免实验未完成前可能出现的任何污染反应液的情况,应该了解关于反应液受到污染时,反应液处理方法: l 紫外照射法:未加模板
生物污染监测方法介绍
生物污染监测采用物理、化学方法,通过对生物体所含环境污染物的分析,对环境质量进行监测。它不同于以生物学、生态学方法对环境质量进行跟踪性检测的“生物监测”。前者的监测重点是生物体内环境污染物,而后者则是利用生物个体、种群或群落的状况和变化及其对环境污染或变化所产生的反应,阐明环境污染状况。
PCR实验室的防污染方法
按照实验室的安全工作制度或安全标准操作程序,所有操作符合《实验室生物安全通用要求》(GB19489-2008)。1、严格执行各区功能划分:试剂储存和准备区:贮存试剂的制备、试剂的分装和扩增反应混合液的准备,以及离心管、吸头等消耗品的贮存和准备。标本制备区:核酸(RNA、DNA)提取、贮存及其加入至扩
PCR实验室的污染应急处理方法
1、若核酸样本溢出:立即用布或纸巾覆盖,由外围向中心倾倒10%的次氯酸消毒剂,约30分钟后,清除污染物品,再用次氯酸消毒剂擦拭,并用75%酒精喷洒,移动紫外车定点照射1小时。2、其他不明情况污染:1、暂停所有实验操作;2、清理实验室内所有物品,寻找污染来源;3、加大实验室的通风;4、对实验室内所有表
大气污染物的监测方法
监测方法分类及优缺点:1、烟尘监测子系统 烟尘在线自动监测采用的原理主要有激光透射法、激光散射法、β射线法和电荷法等。 激光透射法:根据烟尘对光吸收符合朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律原理研制而成。根据光检测器与光源位置不同,可分为单光程和双光程; 优点:成熟可靠,与国标法一致性好;缺点:
大气污染物的监测方法
监测方法分类及优缺点 :1、烟尘监测子系统 烟尘在线自动监测采用的原理主要有激光透射法、激光散射法、β射线法和电荷法等。 激光透射法:根据烟尘对光吸收符合朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律原理研制而成。根据光检测器与光源位置不同,可分为单光程和双光程; 优点:成熟可靠,与国标法一致性好;缺点
大气污染物的监测方法
大气环境监测站即微型空气质量在线监测系统,集成多类环境检测传感器,实现实时监测气象参数(温度、湿度、大气压、风速、风向)与空气八因子(PM2.5、PM10、CO、NOx、SO2、O3、VOC、可定制气体)指数。本监测站使用太阳能电池供电,并使用锂电池进行能源储备,保证数据采集全天候进行。大气环境监测
浅谈PCR方法中常见的污染问题及对策
浅谈RT-PCR实验方法中常见污染问题及对策 河南出入境检验检疫局技术中心 李轲 反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)是一种体外核酸扩增技术,它具有特异、敏感、快速、简便、重复性好、易自动化等突出优点,能在几个小时内完成从一根毛发、一滴血、甚至一个细胞中扩增出足量的目的产物供分析研究和检测鉴定,所以
提高水污染监测技术的方法
提高水污染监测技术的创新能力可以从以下几个方面入手:一、加大研发投入政府支持政府应增加对水污染监测技术研发的资金投入。可以设立专项科研基金,鼓励高校、科研机构和企业开展相关研究。例如,国家自然科学基金可以设立水污染监测技术专项,为创新性研究提供资金支持。制定税收优惠政策,鼓励企业加大研发投入。例如,
大气重金属污染监测的方法
监测的方法通常包括以下几种:直接采样分析法:使用专门的大气采样设备收集大气中的颗粒物或气体,然后在实验室进行化学分析,确定其中的重金属含量。在线监测法:利用实时监测仪器,如电感耦合等离子体质谱仪(ICP-MS)等,实现对大气重金属的连续监测。生物监测法:通过分析特定植物或生物体内积累的重金属含量来间
水污染监测的内容和方法
水污染监测是对水体中的污染物进行检测、分析和评估的过程,目的是了解水体的污染状况,为水污染防治和水资源管理提供科学依据。一、监测内容物理指标温度:水温的变化会影响水中生物的生长和代谢,也会影响水体的物理和化学性质。色度:色度是衡量水体颜色的指标,过高的色度可能表明水中存在有机物、重金属等污染物。浊度
PCR污染的处理(一)
前言 一滴残留在裙子上的精液使得美国总统Bill Clinton不得不坦承他与白宫实习生有不正当的关系。因为他知道现在的生物科技就连一个精子也能被用来做为证据。这种将极微量的生物标本化为可供鉴定的现代技术正是PCR(Polymerase chain reaction)--聚合酶链式反应具有的特色之一
PCR污染的处理(三)
(二)反应液污染 可采用下列方法之一处理:1. DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室温反应30 min后加热灭活,然后加入模板和Taq聚合酶进行正常PCR扩增。该方法的优点是不需要知道污染DNA的序列;2. 内切酶法:选择识别4个碱基的内切酶(如M
PCR的污染与对策
一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于 密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶 或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染. (二)P
PCR污染的处理(二)
PCR污染及解决对策 PCR检测微量感染因子时,一定要注意产物残留污染的问题。 一. 污染的预防进行PCR操作时,操作人员应该严格遵守一些操作规程,最大程度地降低可能出现的PCR污染或杜绝污染的出现。(一)划分操作区:目前,普通PCR尚不能做到单人单管,实现完全闭管操作,但无论是否能够达到单人单管,
PCR的污染有哪些?
(1)PCR 反应前污染主要是样品 DNA 的交叉污染。提取 DNA 使用的仪器上残留的杂质 DNA 或反应管中残留的 PCR 产物、PCR 操作者皮肤或头发等均可引起样品污染。其中 PCR 产物的污染,也称残留污染(carryover),是引起样品交叉污染的主要因素。明胶、Taq DNA 聚合酶等
PCR污染的主要污染源介绍
(一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样枪污染导致标本间污染;有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散,导致彼此间的污染。 (二)PCR试剂的污染:主要是由于
PCR技术(四):PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污 染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生.一、污染原因 (一)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于 密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提 取过程中,由
PCR产物污染诱因
PCR反应的zui大特点是不仅具有较大扩增能力而且还有着极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生。污染原因(1)标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,
PCR污染与对策
PCR反应的最大特点是具有较大扩增能力与极高的灵敏性,但令人头痛的问题是易污染,极其微量的污染即可造成假阳性的产生. 一、污染原因 1、标本间交叉污染:标本污染主要有收集标本的容器被污染,或标本放置时,由于密封不严溢于容器外,或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染;标本核酸模板在提取过程中,由于吸样