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操纵基因的鉴定方法

原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定DNA序列的化学法相似,测定操纵基因的基本原则是:如果一条DNA片段被放射性原子所标记,这条链中任何断裂部位从所产生的标记片段的大小即可推导出来。DNA片段的大小可以用高分辨的聚丙烯酰胺凝胶电泳所确定。这种方法称为足迹图法(foot-printing method),这是仿照用纸层析鉴定蛋白质的指纹图法(finger printing method)命名的。结合部位靠结合蛋白使核酸酶的酶切作用被保护而不被切割。靠这种方法可以了解蛋白质在何处与DNA的糖磷酸酯骨架上的碱基及磷酸进行特殊接触。......阅读全文

关于操纵基因的鉴定方法介绍

  DNA上蛋白质的结合部位,如一种操纵基因,如何能够鉴定出来呢?  原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,

简述操纵基因的基本结构

  有许多种操纵基因用足迹法定位并进行了DNA序列分析,将影响阻遏物结合的操纵基因突变的特性加以描述,它们最重要的特征是反向重复(inverted repeat)或毗邻重复(near repeat)。例如,用核酸酶消化DNA与lac阻遏物的复合体,分离得到一个乳糖操纵基因片段,由24bp组成,其中约

关于操纵基因的研究成果

  以X射线晶体学测定几种结合蛋白与DNA的三维结构,得出一些惊人的结果。它们表明调节蛋白(阻遏蛋白)与特异的DNA部位是如何结合的。第一个测定的结构是E.coli CAP蛋白的结构,随后不久,λCro蛋白、A阻遏物及噬菌体434的阻遏蛋白(λ的近亲)先后测定成功。有如晶体学家预测的那样,活性结合单

操纵基因和调节基因的鉴别

野生型的操纵子以被调节的方式进行表达,调节系统若发生突变可能使表达停止或者在没有诱导物存在时仍然表达。前者称为不可诱导性(uninducible)突变;后者对调节没有反应能力,无论诱导物是否存在都进行表达,故称为组成型突变(constitutive mutants)。操纵子调节系统的成份通过突变已被

ABO血型鉴定的鉴定方法

  生理盐水凝集法  ①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。  ②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。  红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗

关于操纵基因的基本信息介绍

  操纵基因是操纵子中的控制基因,在操纵子上一般与启动子相邻,通常处于开放状态,使RNA 聚合酶通过并作用于启动子启动转录。但当它与调节基因所编码阻遏蛋白结合时,就从开放状态逐渐转变为关闭状态,使转录过程不能发生。

分子遗传学词汇--操纵基因

中文名称:操纵基因外文名称:operatorgene;operator;operatorlocus定义:操纵基因是操纵子中的控制基因,在操纵子上一般与启动子相邻,通常处于开放状态,使RNA 聚合酶通过并作用于启动子启动转录。但当它与调节基因所编码阻遏蛋白结合时,就从开放状态逐渐转变为关闭状态,使转录

亲子鉴定的方法

  鉴定的方法主要有以下几种:  (1)血型鉴定。血型鉴定,就是根据血型的遗传规律对亲生关系的判定。ABO式的血型遗传是受A、B和O三个等位基因控制的。每个人都有其中任何两个基因,这两个基因可以是相同的。在两个染色体配对时,可组合有6种基因,即AA、AO、BB、BO、AB、OO,这6种基因就是决定生

显微鉴定的方法

制片 进行显微鉴定,首先根据观察的对象和目的,选择具有代表性的生药,制作不同的显微制片,包括组织制片、表皮制片和粉末制片 。组织制片的方法主要有徒手制片、滑走制片、冰冻制片及石蜡制片等。对植物类中药,如根、根茎、茎藤、皮、叶等类,一般制作横切片观察,必要时制纵切片;果实、种子类须制作横切片及纵切片

鉴定多糖的方法

1、方法提要食品中相对分子质量>1×104的高分子物质在80%乙醇溶液中沉淀,与水溶液中单糖和低聚糖分离,用碱性二价铜试剂选择性地从其他高分子物质中沉淀具有葡聚糖结构的多糖,用苯酚-硫酸反应以碳水化合物形式比色测定其含量,其显色强度与粗多糖中葡聚糖的含量成正比,以此计算食品中粗多糖含量。2、主要仪器