操纵基因的鉴定方法
原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定DNA序列的化学法相似,测定操纵基因的基本原则是:如果一条DNA片段被放射性原子所标记,这条链中任何断裂部位从所产生的标记片段的大小即可推导出来。DNA片段的大小可以用高分辨的聚丙烯酰胺凝胶电泳所确定。这种方法称为足迹图法(foot-printing method),这是仿照用纸层析鉴定蛋白质的指纹图法(finger printing method)命名的。结合部位靠结合蛋白使核酸酶的酶切作用被保护而不被切割。靠这种方法可以了解蛋白质在何处与DNA的糖磷酸酯骨架上的碱基及磷酸进行特殊接触。......阅读全文
操纵基因的鉴定方法
原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定DNA序列的化学法相似,测定操纵基因的基本原则是:如果一条DNA
操纵基因的鉴定方法
DNA上蛋白质的结合部位,如一种操纵基因,如何能够鉴定出来呢? 原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,与测定
关于操纵基因的鉴定方法介绍
DNA上蛋白质的结合部位,如一种操纵基因,如何能够鉴定出来呢? 原来操纵基因是靠阻遏物的专一结合以免除核酸酶(nuclease)的攻击的,通过DNA片段的分离与序列测定,即可确定其结构。但是这是一件极吃力的工作。利用限制性内切酶可以确切分离出蛋白质所接触的部位的片段,就可以鉴定操纵基因的结构,
操纵基因的基本结构
有许多种操纵基因用足迹法定位并进行了DNA序列分析,将影响阻遏物结合的操纵基因突变的特性加以描述,它们最重要的特征是反向重复(inverted repeat)或毗邻重复(near repeat)。例如,用核酸酶消化DNA与lac阻遏物的复合体,分离得到一个乳糖操纵基因片段,由24bp组成,其中约有1
操纵基因的基本结构
有许多种操纵基因用足迹法定位并进行了DNA序列分析,将影响阻遏物结合的操纵基因突变的特性加以描述,它们最重要的特征是反向重复(inverted repeat)或毗邻重复(near repeat)。例如,用核酸酶消化DNA与lac阻遏物的复合体,分离得到一个乳糖操纵基因片段,由24bp组成,其中约有1
操纵基因的结构特点
操纵基因是操纵子中的控制基因,在操纵子上一般与启动子相邻,通常处于开放状态,使RNA 聚合酶通过并作用于启动子启动转录。但当它与调节基因所编码阻遏蛋白结合时,就从开放状态逐渐转变为关闭状态,使转录过程不能发生。
简述操纵基因的基本结构
有许多种操纵基因用足迹法定位并进行了DNA序列分析,将影响阻遏物结合的操纵基因突变的特性加以描述,它们最重要的特征是反向重复(inverted repeat)或毗邻重复(near repeat)。例如,用核酸酶消化DNA与lac阻遏物的复合体,分离得到一个乳糖操纵基因片段,由24bp组成,其中约
操纵基因的定义和功能
操纵基因是操纵子中的控制基因,在操纵子上一般与启动子相邻,通常处于开放状态,使RNA 聚合酶通过并作用于启动子启动转录。但当它与调节基因所编码阻遏蛋白结合时,就从开放状态逐渐转变为关闭状态,使转录过程不能发生。
ABO血型鉴定的鉴定方法
生理盐水凝集法 ①玻片法:操作简单,适于大量标本检查,但反应时间长;被检查者如血清抗体效价低,则不易引起红细胞凝集,因此,不适于反向定型。 ②试管法:由于离心作用可加速凝集反应,故反应时间短,而且,借助于离心力可以使红细胞接触紧密,促进凝集作用,适于急诊检查。 红细胞亚型抗原性弱,如抗A抗
关于操纵基因的研究成果
以X射线晶体学测定几种结合蛋白与DNA的三维结构,得出一些惊人的结果。它们表明调节蛋白(阻遏蛋白)与特异的DNA部位是如何结合的。第一个测定的结构是E.coli CAP蛋白的结构,随后不久,λCro蛋白、A阻遏物及噬菌体434的阻遏蛋白(λ的近亲)先后测定成功。有如晶体学家预测的那样,活性结合单