酶液的浓缩方法和步骤
提取的酶液为减少纯化操作容积,通常先进行浓缩。工业上可用真空减压浓缩、薄膜浓缩、冷冻浓缩和逆向渗透作用进行浓缩。对于少量酶液下述方法浓缩更合适:用葡聚糖凝胶(分子筛)浓缩:取相当于酶液量1/5的干葡聚糖凝胶G15或G25,分次加入酶液中,搅拌30 min,使凝胶吸水膨胀,进行吸滤。经重复数次操作即可在短时间内把酶液浓缩至所需的体积。也可将酶液装于透析袋内,埋入干凝胶中,袋内酶液也可得到浓缩。用聚乙二醇浓缩:将稀酶液装入透析袋内,袋外复以聚乙二醇,袋内水份被袋外的聚乙二醇所吸收,在短时间内可以达到浓缩的目的,得到所需的浓酶液。用超滤法浓缩:超滤技术在其可筛分范围内分离酶分子时不发生“相态”变化,可以避免酶蛋白变性,且分离度快,所以愈来愈被广泛采用。各种不同孔径的超滤膜,适用于实验室规模及一定工业规模的酶液浓缩。如国产二醋酸纤维素制成10~200埃孔径的超滤膜,用于实验室规模固氮酶液的脱盐和浓缩,效果良好。......阅读全文
蛋白质的浓缩方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂
水样富集与浓缩的方法
(一)湿式消解法 利用各种酸或碱进行消解1、硝酸消解法适用水样:较清洁水样2、硝酸-高氯酸消解法适用水样:含难氧化有机物的水样注:高氯酸能与羟基化合物反应生成不稳定的高氯酸酯,有发生爆炸的危险,故先加入硝酸,氧化水中的羟基化合物,稍冷后再加高氯酸处理.3、硝酸-硫酸(5∶2)消解法不适用水样:易生成
酶切的基本步骤
1) 成功酶切的关键是准备好模板DNA。DNA样品中不能含有有机溶剂(会使酶变性或产生星号货性),不能含有干扰酶活性的污染物质,不能含有高浓度的EDTA (TE中的EDTA浓度较低,对Mg的浓度影响较小);同时要对DNA甲基化程度及其对酶切效率的影响要做到心中有数。2) 选用合适的酶。根据酶切序列选
酶的分离纯化步骤
酶的分离纯化一般包括三个基本步骤: 即抽提、 纯化、 结晶或制剂。首先将所需的酶从原料中引入溶液, 此时不可避免地夹带着一些杂质, 然后再将此酶从溶液中选择性地分离出来, 或者从此溶液中选择性地除去杂质, 然后制成纯化的酶。
酶制备的基本步骤
酶的制备一般包括三个基本步骤,即提取、纯化和结晶(或制剂)。首先将所需要的酶从原料中引入溶液,此时不可避免地要夹带着一些杂质,而后再将酶从溶液中选择地分离出来,或者从酶溶液中选择地除去杂质,最后制成纯净的酶制剂。
液闪仪基本知识和操作步骤
液闪计数器基本工作过程1、样品在闪烁液中引起闪烁,把核辐射能转换成光子;2、探测光子的光电倍增管和前置放大器把光信号转换成电信号并初步放大;3、对电信号进行甄别、再放大、分析、记录。液闪计数器基本组成主要由光电倍增管、收光系统、放大器、脉冲幅度分析器、样品系统组成。光电倍增管——线性放大的,脉冲幅度
使得移液管时调节液面和放出溶液的步骤介绍
调节液面 左手另取一干净小烧杯,将移液管管尖紧靠小烧杯内壁,小烧杯保持倾斜,使移液管保持垂直,刻度线和视线保持水平(左手不能接触移液管)。稍稍松开食指(可微微转动移液管或吸量管),使管内溶液慢慢从下口流出,液面将至刻度线时,按紧右手食指,停顿片刻,再按上法将溶液的弯月面底线放至与标线上缘相切为
离子计的使用步骤和方法
一般以最简单的氢原子为模型来讨论这一概念。氢原子的基态对应的是氢原子中唯一的一个电子处于可能达到的最低的原子轨道(也就是波函数呈球形的1s轨道,它具有最小的量子数)。 当外界向该原子提供能量时(例如,吸收一个具有一定能量的光子),原子中的电子就可以提升到激发态(这时它的量子数比可能的最小的量子
得失电子守恒法的方法和步骤
1、标出发生变化的元素的氧化数,并确定氧化还原反应的配平方向。在配平时,需要确定先写方程式那边物质的计量数。有时先写出方程式左边反应物的计量数,有时先写出方程式右边生成物的计量数。一般遵循这样的原则:自身氧化还原反应→ 先配平反应物的计量数;部分氧化还原反应 → 先配平生成物的计量数;一般的氧化还原
正确冷冻保存细胞的方法和步骤
细胞越来越受广大科研者的喜爱,但细胞不像人们想象中那么强大,在培养复苏等过程中稍有不慎就不可能导致它的死亡。而且它必须是是在无污染的条件下培养,复苏才能保证实验效果。在此总结一下细胞的正确冷冻保存方法、保存详细步骤,相关注意事项如下: 一、保存方法(主要有两个): (1)传统方法:冷
“瘦肉精”的测定方法和步骤
1、测定原理测定的基本反应原理是抗原抗体反应。微孔板包被有针对兔 IgG(盐酸克伦特罗抗体)的羊抗体盐酸克伦特罗抗体被加入,经过孵育及洗涤步骤后,加入盐酸克伦特罗酶标记物标准或样品溶液。盐酸克伦特罗与盐酸克伦特罗酶标记物竞盐酸克伦特罗抗体,没有连接的盐酸克伦特罗酶标记物在洗涤步骤中被除去。将酶基质(
检验方法的验证和确认步骤
1、检验方法验证的基本内容 检验方法验证的基本内容包括方案的起草及审批,检测仪器的确认.适用性验证(包括准确度试验、精密度测定.线性范围试验、专属性试验等)和结果评价及批准四个欠的方面。它的基本内容可以用下图表示。 2、检验方法验证的基本步骤 首先是制定验证方案,然后对大
BOD5的检测方法和步骤
将预先选好量程并按量程范围量好体积的水样倒入培养瓶中,在主机搅拌器上连续搅拌。并将主机和培养瓶放入培养箱中。调节培养箱内温度为20C±1°,待样品恒温后进行五日培养。培养瓶中的水样在连续搅拌的情况下保证了足够的溶解氧供微生物进行生化反应。水样中的有机物经过生物氧化作用,转变成氮、碳和硫的氧化物。在这
斑点杂交技术的方法和步骤
斑点杂交是指将DNA或RNA样品直接点在硝酸纤维素滤膜上,然后与核酸探针分子杂交,以显示样品中是否存在特异的DNA或RNA。同一种样品经不同倍数的稀释,还可以得到半定量的结果。所以它是一种简便、快速、经济的分析DNA或RNA的方法,在基因分析和基因诊断中经常用到,是研究基因表达的有力工具。但由于目的
分光计的调节步骤和方法
1、认识分光计的组成 2、调节原则:保持平行光线 调节顺序:粗调-望远镜-载物台-平行光管 3、粗调: 1)、调节望远镜水平。 2)、调节平板下面的三个螺钉, 用眼睛粗略看两个平板之间的缝隙尽可能一致、均匀。 3)、调节平行光管水平。 调节望远镜: 4、目镜调焦:目的是使眼睛通过
土壤取样的具体步骤和方法
土壤取样的具体方法步骤: 1.布点:按照土壤类型和作物种植品种分布,按土壤肥力高、中、低分别采样。一般150-300亩(不同地区可根据情况确定)采取一个耕层混合样,每个示范村的主要农作土种至少采集3-4个混合农化土样。采样点以锯齿型或蛇型分布,要做到尽量均匀和随机。应用土壤底图确定采样地块和采样点,
实验室仪器定量平行浓缩仪的操作步骤
一、立柱的安装:将升降架插进工作槽后面的固定夹块,并旋转手柄紧固升降架。 二、吹针的检查:将每路的吹针插到底并旋紧,并将气管插进对应的旋塞阀中插到底,每路吹针都可以通过旋塞阀来调节大小抑或是关闭。 三、每路气流的调节:将每路的旋钮左右微微旋转,即可调节此气路的气体流量,根据液面波纹的大小,判
异相液相酶免疫测定的方法
主要用于检测样品中极微量的短肽激素和某些药物等小分子半抗原。酶标志物具有更好的稳定性,且无放射性污染。 1.平衡法:将待测样品抗原、酶标抗原及特异性抗体进行一次性温育,待反应达平衡后,测定离心沉淀物(酶标抗原抗体复合物)中加入酶底物液后的呈色吸光度值。 2.非平衡法:先将样品(或标准品)与抗
样品的浓缩和萃取仪器选取
在液相色谱和气相色谱中,涉及的样品若为液体,那么样品的浓缩或萃取是常用的样品处理技术。可以根据色谱分析的目的、样品的组成及其浓度水平、样品的物化性质等,决定应当采用的样品采集程序。1.浓缩采集的必要性浓缩采集方法在色谱分析中应用非常普遍。当原始样品浓度低于色谱的检出限时,或者色谱仪器测定的灵敏度不够
样品的浓缩和萃取仪器选取
在液相色谱和气相色谱中,涉及的样品若为液体,那么样品的浓缩或萃取是常用的样品处理技术。可以根据色谱分析的目的、样品的组成及其浓度水平、样品的物化性质等,决定应当采用的样品采集程序。 1.浓缩采集的必要性 浓缩采集方法在色谱分析中应用非常普遍。当原始样品浓度低于色谱的检出限时,或者色谱
样品的浓缩和萃取仪器选取
在液相色谱和气相色谱中,涉及的样品若为液体,那么样品的浓缩或萃取是常用的样品处理技术。可以根据色谱分析的目的、样品的组成及其浓度水平、样品的物化性质等,决定应当采用的样品采集程序。 1.浓缩采集的必要性 浓缩采集方法在色谱分析中应用非常普遍。当原始样品浓度低于色谱的检出限时,或者色谱
酶单位的使用条件和方法
国际生化协会酶委员规定,1分钟内将1微摩尔的底物转化为产物的酶量定为1个单位,称为标准单位。并规定了酶作用的条件,因标准单位在实际应用时不够方便,故生产上往往根据不同的酶制定各自的酶活力单位,例如蛋白酶以1分钟内能水解酪蛋白产生1微克酪氨酸的酶量为1个蛋白酶单位;液化型淀粉酶以1小时内能液化1克淀粉
酶的提取和分离纯化方法
许多酶都存在于细胞内。为了提取这些胞内酶,首先需要对细胞进行破碎处理。细胞破碎的方法很多,主要包括机械破碎法、物理破碎法、化学破碎法和酶学破碎法等。机械破碎法是指利用捣碎机、研磨器或匀浆器等将细胞破碎开来。物理破碎法是指利用温度差、压力差或超声波等将细胞破碎开来。化学破碎法是指利用甲醛、丙酮等有机溶
剥离力测试方法和试验步骤
剥离力测试设备是一款专业适用于胶粘剂、胶粘带、不干胶、医用贴剂、保护膜、离型纸、复合膜、人造革、编织袋、薄膜、纸张、线材、橡塑胶等相关产品的剥离、拉断等性能测试的拉力试验机。配合不同夹具,可进行拉伸、抗压、抗弯、剥离、持拉、持压、疲劳、压缩、剪切、撕裂等试验。 剥离力试验设备专业适用于凹版印刷
环境噪声监测方法和步骤
一、测量条件1.天气条件要求在无雨无雪的时间,声级计应保持传声器膜片清洁,风力在三级以上必须加风罩(以避免风噪声干扰),五级以上大风应停止测量。2.使用仪器是PSJ-2型声级计或其他普通声级计,原理见教材,使用方法参看附录。3.手持仪器测量,传声器要求距离地面1.2米。二、测定步骤1.将学校(或某一
旷场实验原理和方法步骤
【实验目的】观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。【实验器材】实验装置由旷场反应箱和数据自动采集和处理系统两部分组成,由上海欣软信息科技有限公司提供。大鼠旷场反应箱高30~40cm,底边长100cm,内壁涂黑,底面平均分为25个4cm×4cm小方格,正上方2 m处架一数码摄像头,其视
蛋白质的浓缩技术方法
蛋白质浓缩技术是免疫学中常用的手段,现介绍几种常用的浓缩技术。(一)透析袋浓缩法利用透析袋浓缩蛋白质溶液是应用最广的一种。将要浓缩的蛋白溶液放入透析袋(无透析袋可用玻璃纸代替),结扎,把高分子(6 000-12 000)聚合物如聚乙二醇(碳蜡)、聚乙烯吡咯、烷酮等或蔗糖撒在透析袋外即可。也可将吸水剂
真空浓缩仪的操作方法
真空浓缩仪主要用于浓缩液体或干燥样品,利用真空时溶剂可在低温中沸腾蒸发的原理达到快速浓缩的目的。由冷阱、泵、冷凝分离器、电磁阀、外置真空系统等部分组成。 操作前 1.操作时的环境温度应保持在 15-35 ℃之间 2.打开电源,浓缩仪盖子解锁,显示屏显示上次运行的参数 3.安装
蛋白质的浓缩技术方法
(一)浓缩胶浓缩法 浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被
蛋白质的浓缩技术方法
(一)浓缩胶浓缩法 浓缩胶是一种高分子网状结构的有机聚合物,具有很强的吸水性能。每克干胶可吸水120ml~150ml。它能吸收低分子量的物质,如水、葡萄糖、蔗糖、无机盐等,适宜浓缩10 000分子量以上的生物大分子物质。浓缩后,蛋白质的回收率可达80%~90%。比浓缩胶应用方便,直接加入被