消减杂交的定义

利用不同组织、细胞或不同状态下组织、细胞基因表达的差异性,并结合核酸杂交建立的克隆差异表达基因的技术。一般是将一种细胞的互补DNA(cDNA)或信使核糖核酸(mRNA)与第二种细胞cDNA或mRNA相互杂交,其不被杂交的部分就代表了两种细胞基因表达的差异,可用于差异表达基因的克隆。差示筛选、消减探针、消减文库的建立等都是该技术的具体实施。......阅读全文

关于染色质消减的基本介绍

  在细胞分裂过程将部分染色质放于核外而失掉的过程  chromatin diminution  指向体细胞分化的细胞,在细胞分裂过程将部分染色质放于核外而失掉的过程。某种蛔虫在卵裂过程中放出复合染色体的末端部分,产生了染色质消减,对将来可成为生殖细胞的细胞则无此消减现象。仅生殖细胞所保持的染色质,

如何筛选和鉴定生物标本中差异表达的蛋白分子

目前筛选差异表达基因的方法主要有差异显示PCR方法 (differentialdisplayRT PCR ,DDRT PCR)、消减杂交法 (subtractivehybridization ,SH )、基因芯片技术 (DNAchiptechnique)和基因表达的系统分析 (serialanaly

我国真菌毒素在线消减研究获突破

  “粮食收储加工过程中真菌毒素在线消减技术及装备”科技成果评价会,日前在江南大学召开,着重介绍了清理分级、刷光剥离、臭氧脱毒和在线检测四项技术及装备构成的真菌毒素在线消减技术及装备的研发工作与重大技术创新。   课题组负责人、江南大学粮食发酵工艺与技术国家工程实验室陈正行教授介绍,针对当前粮食中真

植物真的能消减PM2.5吗?

  “滴水观音除灰尘,君子兰释放氧气,橡皮树除有害物,文竹灭细菌,银皇后净化空气,铁线蕨和常春藤吸甲醛,吊兰吸空气中的一氧化碳和甲醛,芦荟是空气清洁器,棕竹除重金属污染和二氧化碳,龟背竹夜间吸收二氧化碳,发财树化烟的废气,仙人掌减电磁辐射……”据介绍,这是网上流传的绿植对空气的影

用检测和驱动-DNA-探针进行差异杂交实验

下面 4 个探针用于差异筛选杂交。1. 检测者特异性消减探针(正向消减探针)。2. 驱动者特异性消减探针(反向消减探针)。3. 从检测者 mRNA(或检測者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。4. 从驱动者 mRNA(或驱动者基因组 DNA) 直接合成的 cDNA 探针。本实验来源于 PC

污染物排放目标消减速度放缓

  近日,《河南省2013年主要污染物总量减排计划实施方案》出炉,2013年我省污染物减排目标确定,四项主要污染物排放目标消减速度较2012年有所放缓。   根据实施方案,2013年我省将加速淘汰老旧汽车和2005年以前注册运营的“黄标车”,全面实行机动车环保标志管理制度,制定机动车准入规定,严格

重污染天将开展人工消减雾霾

  据新华社电记者昨天从中国气象局获悉,气象部门《贯彻落实〈大气污染防治行动计划〉实施方案》日前正式印发。根据该方案,到2015年,气象与环保部门联合开展的省、市级重污染天气预警将覆盖全国所有省(区、市),并在重污染天气条件下能够组织开展人工影响天气消减雾霾。   方案提出,气象部门将逐步建立以重

如何消减气相色谱仪分流歧视?

一、气相色谱仪分流歧视的概念 分流歧视,是指在一定分流比条件下,不同样品组分的实际分流比与原来设定(或测定)的分流比是不同的,这就会造成进入色谱柱的样品组成与原来的样品组成有差异,从而影响定量分析的准确度。在分流进样中,常常存在分流歧视。 二、影响分流歧视的主要原因 a.样品组分的

消减-cDNA-或基因组-DNA-文库的制备实验

一次双向消减,需要总量为 2ug 的基因组 DNA 或 cDNA。大多数分离 RNA 和基因组DNA 的方法都适用于本实验(Sambrooketal.1989;ChomczynskiandSacchi1987;Farrell1993)。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试

消减-cDNA-或基因组-DNA-文库的制备实验

            试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂 酶和酶缓冲液 核酸和寡核苷酸 放射性化合物 酚 仪器、耗材

消减-cDNA-或基因组-DNA-文库的制备实验

试剂、试剂盒 缓冲液、溶液和试剂酶和酶缓冲液核酸和寡核苷酸放射性化合物酚仪器、耗材 热循环仪水浴箱琼脂糖凝胶电泳所需的试剂与设备实验步骤 第1阶段:RNA和DNA的分离一次双向消减,需要总量为2ug的基因组DNA或cDNA。大多数分离RNA和基因组DNA的方法都适用于本实验(Sambrooketal

分子杂交技术Northern杂交的简介

  Northern杂交与Southern杂交很相似。主要区别是被检测对象为RNA,其电泳在变性条件下进行,以去除RNA中的二级结构,保证RNA完全按分子大小分离。变性电泳主要有3种:乙二醛变性电泳、甲醛变性电泳和羟甲基汞变性电泳。电泳后的琼脂糖凝胶用与Southern转移相同的方法将RNA转移到硝

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

体细胞杂交的杂交实验

不同种植物的原生质体可在人工诱导条件下融合,所产生的杂种细胞,即异核体经过培养可再生新壁,分裂形成愈伤组织,进而分化产生杂种植株。由于进行融合的原生质体来自体细胞,故该项技术也叫体细胞杂交。原生质体融合能使有性杂交不亲合的植物种间进行广泛的遗传重组,因而在农业育种上具有巨大的潜力。在植物遗传操作研究

杂交育种的杂交方式介绍

单杂交即两个品种间的杂交(单交)用甲×乙表示,其杂种后代称为单交种,由于简单易行、经济,所以生产上应用最广,一般主要是利用杂种第一代。复合杂交即用两个以上的品种、经两次以上杂交的育种方法。如果单交不能实现育种所期待的性状要求时,往往采用复合杂交,其目的在于创造一些具有丰富遗传基础的杂种原始群体,才可

southern杂交与northern杂交的区别

研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA。Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段转移至尼龙膜或其他固相支持物上。

杂交育种的杂交类型介绍

品种内杂交同一品种不同生态型间的杂交。品种间杂交(种内杂交)品种间杂交是指两个遗传基础不同的品种间、自交系间、自交不亲和系间或雄性不育系与恢复系间的杂交。种间杂交(属内杂交)同一属不同物种间的杂交。渐渗杂交将一些基因从一个物种转移到另一个物种的基因组中被称为“渐渗杂交”  。同一属或同一科不同属的不

关于Southern杂交的预杂交的介绍

  将固定于膜上的DNA片段与探针进行杂交之前,必须先进行一个预杂交的过程。因为能结合DNA片段的膜同样能够结合探针DNA,在进行杂交前,必须将膜上所有能与DNA结合的位点全部封闭,这就是预杂交的目的。预杂交是将转印后的滤膜置于一个浸泡在水浴摇床的封闭塑料袋中进行,袋中装有预杂交液,使预杂交液不断在

分子杂交技术的几种常见的杂交

分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上,然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交,经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象,分子杂交基本可分为以下几大类:(1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探针杂交。

河南污染物排放目标消减速度放缓

  近日,《河南省2013年主要污染物总量减排计划实施方案》出炉,2013年我省污染物减排目标确定,四项主要污染物排放目标消减速度较2012年有所放缓。   根据实施方案,2013年我省将加速淘汰老旧汽车和2005年以前注册运营的“黄标车”,全面实行机动车环保标志管理制度,制定机动车准入规定,严格

奥运开幕式人工消减雨备受媒体关注

    中国气象报通讯员杨晋辉报道  8月10日,北京国际新闻中心举行了“北京气候特点和赛事期间天气展望”主题新闻发布会。北京市气象局副局长、新闻发言人王建捷,北京气象台台长、新闻发言人郭虎和北京市人工影响天气办公室常务副主任张蔷向中外记者就其关心的问题进行了交流。     在新闻发布会上,多名境

分子杂交技术Southern杂交的操作步骤

  (1) 约50μl体积中酶切10pg-10μg的DNA, 然后在琼脂糖凝胶中电泳12-24小时(包括DNA分子量标准物)。  (2) 500ml水中加入25μl 10mg/ml溴化乙锭,将凝胶放置其中染色30分钟, 然后照相。  (3) 依次用下列溶液处理凝胶,并轻微摇动: 500ml 0.2m

分子杂交技术Northern杂交的操作步骤

  (1)RNA经变性电泳完毕后,可立即将乙醛酰RNA转移至硝酸纤维素滤膜上。转移方法与转移DNA的方法相似。  (2)转移完毕后 ,以6×SSC溶液于室温浸泡此膜5分钟,以除去琼脂糖碎片。  (3)将该杂交膜夹于两张滤纸中间,用真空烤箱于80℃干燥0.5-2小时。  (4) 用下列两种溶液之一进行

概述分子杂交技术常见的杂交分类

  分子杂交是通过各种方法将核酸分子固定在固相支持物上,然后用放射性标记的探针与被固定的分子杂交,经显影后显示出目的DNA或RNA分子所处的位置。根据被测定的对象,分子杂交基本可分为以下几大类:  (1) Southern杂交:DNA片段经电泳分离后,从凝胶中转移到硝酸纤维素滤膜或尼龙膜上,然后与探

杂交育种的杂交过程介绍

选择父母本父母本的选择取决于育种的目标和目的。亲本植物必须从当地挑选,并被认为是最适合当地条件的。去雄这是植物杂交的第二个步骤。自交系材料在正常条件下生长的,需要去雄。去雄就是将雌亲本的雄蕊在其开裂并散落花粉之前去除。单性生殖的植物不需要去雄,但双性生殖或自花授粉植物需要去雄 。套袋套袋是植物杂交的

分子杂交技术Southern杂交的相关介绍

  Southern杂交可用来检测经限制性内切酶切割后的DNA片段中是否存在与探针同源的序列,它包括下列步骤:  (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶切片段,然后使DNA原位变性。  (2) 将DNA片段转移到固体支持物(硝酸纤维素滤膜或尼龙膜)上。  (3)预杂交滤膜,掩盖滤膜上非特异性位点。 

杂交的原理

杂交是通过不同稻种相互杂交产生的,而水稻是自花授粉作物,对配制杂交种子不利。要进行两个不同稻种杂交,先要把一个品种的雄蕊进行人工去雄或杀死,然后将另一品种的雄蕊花粉授给去雄的品种,这样才不会出现去雄品种自花授粉的假杂交。可是,如果用人工方法在数以万计的水稻花朵上进行去雄授粉的话,工作量极大,实际并不

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段

Northern杂交、Southern杂交和Western杂交有什么区别

区别:研究的对象不同。southern主要的对象是DNA,northern研究的对象是RNA,而western研究的对象为蛋白质。1、Southern印迹杂交是进行基因组DNA特定序列定位的通用方法。一般利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的DNA片段,将胶上的DNA变性并在原位将单链DNA片段