双向电泳法的基本原理
蛋白质首先在薄条凝胶中通过等电聚焦分离。然后将凝胶水平放置在第二个平板状凝胶上，通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质。水平分离反映了pI的差异；垂直分离反映了分子量的差异。因此，原始的蛋白质组成在两个维度上扩散。使用双向电泳技术可以分解数千种细胞蛋白质。可以从凝胶中切取出单个蛋白质点，并通过质谱进行鉴定。......阅读全文
离子色谱法基本原理
离子色谱法基本原理是离子色谱法 (ion chromatography, IC) ，是高效液相色谱法的一种，是分析离子的一种液相色谱法。离子色谱法是以低交换容量的离子交换树脂为固定相对离子性物质进行分离, 用电导检测器连续检测流出物电导变化的一种色谱方法。阳离子色谱柱是高效液相色谱的一种，是分析阴阳
双向电泳的送样要求
1、 样品新鲜。说明：组织样本及细胞采样后应立即放入液氮中速冻或加入样品稳定剂，运输过程中血液、血清样品4℃保存，其它样品-20℃保存，不超过48小时（若外地邮寄，除血液、血清及细胞外请用干冰）。2、 样品蛋白的总量不少于1mg。说明：组织样本每份约250-500mg；细胞样品每份106—107细胞
双向电泳完整的操作步骤
（一）第一向等电聚焦 1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。 2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。 3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100
双向电泳完整的操作步骤
（一）第一向等电聚焦1.从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT,不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管）,置室温溶解.2.在小管中加入0.01g DTT,Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀.3.从小管中取出400ml水化上样缓冲液,加入100ml样品,充分
双向电泳的原理和特点
双向电泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pH分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心。双向电泳由
光声光谱法的基本原理
用一束强度可调制的单色光照射到密封于池中的样品上，样品吸收光能，并以释放热能的方式退激，释放的热能使样品和周围介质按光的调制频率产生周期性加热,从而导致介质产生周期性压力波动,这种压力波动可用灵敏的压电陶瓷检测，并通过放大得到。若入射单色光波长可变，则可测到随波长而变的图谱，这就是光谱。若入射光是聚
质谱分析法的基本原理
质谱分析方法是利用质谱仪测定各种元素的同位素质量和相对丰度的方法。质谱仪由离子源、分析器和收集器三部分组成。样品先在气体放电管内被加热形成离子，之后样品离子通过几道狭缝进行速度筛选。通过最后一道狭缝的离子均具有恒定的速度。具有恒定速度的离子进入分析器后受到外加磁场的作用，它们将作圆周运动。由于各种同
离子色谱法的基本原理介绍
用离子交换树脂为固定相，电解质溶液为流动相。以电导检测器为通用检测器，为消除流动相中强电解质背景离子对电导检测器的干扰，设置了抑制柱。试样组分在分离柱和抑制柱上的反应原理与离子交换色谱法相同。 以阴离子交换树脂（R-OH）作固定相，分离阴离子（如Br-）为例。当待测阴离子Br-随流动相（NaO
关于电阻检测法的基本原理介绍
电阻检测法的基本原理是：在待测液体中置一微孔，在微孔的两端各加一定电压的电极，当液体中的颗粒巾进经过微孔时，电极间的电阻就会产生训瞬间的变化，以因而产生电脉冲，对这种电脉冲进行计数就可得到颗粒的数量，脉冲幅度的大小表示颗粒的体积的大小，经过对各种细胞所产生脉冲的大小的电子的选者择，可以区分出不同
液相色谱法的基本原理介绍
色谱法作为一种分离分析方法，其最大的特点在于能将一个复杂的混合物分离为各个有关的组成，然后一个个地检测出来。一般色谱过程中不同组分在相对运动、不相混溶的两相间进行交换，相对静止的一相称为固定相，另一相对运动的相称为流动相，利用吸附、分配、离子交换、亲和力或分子大小等性质的微小差别，经过连续多次在
质谱分析法的基本原理
质谱分析方法是利用质谱仪测定各种元素的同位素质量和相对丰度的方法。质谱仪由离子源、分析器和收集器三部分组成。样品先在气体放电管内被加热形成离子，之后样品离子通过几道狭缝进行速度筛选。通过最后一道狭缝的离子均具有恒定的速度。具有恒定速度的离子进入分析器后受到外加磁场的作用，它们将作圆周运动。由于各种同
免疫沉淀法的基本原理
RIP 实验基本原理：1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。2. 防止非特异性的RNA的结合。3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。4.结合的RNA序列通过microarray（RIP-Chip），定量RT-PCR或高通量测序（RIP-Seq）方
酶联免疫法的基本原理简介
①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面，并保持其免疫活性。 ②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体，这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性，又保留酶的活性。在测定时，把受检标本（测定其中的抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原
免疫沉淀法的基本原理
1. 用抗体或表位标记物捕获细胞核内或细胞质中内源性的RNA结合蛋白。2. 防止非特异性的RNA的结合。3. 免疫沉淀把RNA结合蛋白及其结合的RNA一起分离出来。4.结合的RNA序列通过microarray（RIP-Chip），定量RT-PCR或高通量测序（RIP-Seq）方法来鉴定。
紫外光谱法的基本原理
紫外光谱法是一种常用的分析化学方法，广泛应用于药物、化学、食品等领域。它的基本原理是利用物质分子中电子的跃迁来确定分子的结构和浓度。在紫外光谱法中，光源通过具有狭缝的单色仪，产生单色光线。这些光线通过待测物质产生吸收，从而产生吸收光谱。吸收光谱是一种描述物质吸收光线强度的图形，通常以波长为横轴，吸光
免疫印迹法的基本原理介绍
与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳，被检测物是蛋白质，“探针”是抗体，“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品，转移到固相载体（例如硝酸纤维素薄膜）上，固相载体以非共价键形式吸附蛋白质，且能保持电泳分离的多肽类型及其生
分子荧光分析法的基本原理
分子荧光的发生主要包括三过程：1、分子的激发；2、分子去活化；3、荧光的发生。分子的激发主要包括单线激发态和三线激发态，大多数分子含有偶数电子，在基态时，这些电子成对地存在于各个原子或分子轨道中，成对自旋，方向相反，电子净自旋等于零：S=½+(-½)=0，其多重性 M=2S+1=1 (M 为磁量子数
色谱法的基本原理是什么
色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着非常广泛的应用。色谱法利用不同物质在不同相态的选择性分配，以流动相对固定相中的混合物进行洗脱，混合物中不同的物质会以不同的速度沿固定相移动，最终达到分离的效果。
概述薄层色谱法的基本原理
薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。 薄层层析可根据作为固定相的支持物不同，分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离
分配色谱法的基本原理
分配色谱利用固定相与流动相之间对待分离组分溶解度的差异来实现分离。分配色谱的固定相一般为液相的溶剂，依靠图布、键合、吸附等手段分布于色谱柱或者担体表面。分配色谱过程本质上是组分分子在固定相和流动相之间不断达到溶解平衡的过程。 分配色谱的狭义分配系数表达式如下： K=\frac=\frac{X
关于比浊法的基本原理简介
比浊法的主要依据是悬浊液中的颗粒对光线的散射的性质。当一束光线通过悬浊液时，液体中颗粒的大小若小于入射光相应减弱。在一定条件下散射光的程度（或透射光减弱的程度）和悬浊液中颗粒的数量成比例关系。 其中，I为透射光强度，为入射光强度，b为光径，为浊度。上式和比尔定律公式相似，故比色的程度方法，标准
化学发光法的基本原理介绍
化学发光（ChemiLuminescence ，简称为CL）法是分子发光光谱分析法中的一类，它主要是依据化学检测体系中待测物浓度与体系的化学发光强度在一定条件下呈线性定量关系的原理，利用仪器对体系化学发光强度的检测，而确定待测物含量的一种痕量分析方法。化学发光与其它发光分析的本质区别是体系产生发
液液色谱法的基本原理
液液色谱法按流动相和固定相的物态分类时，流动相和固定相均为液体的 方法称为液液色谱法、液体固定相与流动相不溶，通常涂渍在惰性载体仁使用。液液色谱法的分离机制通常为溶解作用，属于分配色谱法。 使用将特定的液态物质涂于担体表面，或化学键合于担体表面而形成的固定相，分离原理是根据被分离的组分在流动相
关于极谱法的基本原理介绍
极谱法的基本装置如图1所示，发生电解的为滴汞电极，此电极的上端为一贮汞瓶，瓶中的汞通过塑料管进入毛细管（内径约0.05mm），然后有规则地滴入电解池的溶液中，使滴汞电极表面不断更新，以获得良好的重现性和准确度。另一电极多用饱和甘汞电极（SCE），偶用Ag-AgCl电极。由直流电源B、可变电阻R和
色谱法的基本原理是什么
色谱法基本原理是指在填充色谱柱中，当组分随流动相向柱出口迁移时，流动相由于受到固定相颗粒障碍，不断改变流动方向，使组分分子在前进中形成紊乱的类似涡流的流动。色谱法（chromatography）又称色谱分析、色谱分析法、层析法，是一种分离和分析方法，在分析化学、有机化学、生物化学等领域有着
关于纸层析法的基本原理介绍
纸层析法依据极性相似相溶原理，是以滤纸纤维的结合水为固定相，而以有机溶剂作为流动相。由于样品中各物质分配系数不同，因而扩散速度不同，从而达到分离的目的。 试样经层析后可用比移值（Rf）表示各组成成分的位置（比移值=原点中心至色谱斑点中心的距离与原点中心至流动相前沿的距离之比），由于影响比移值的
紫外光谱法的基本原理
紫外光谱法是一种常用的分析化学方法，广泛应用于药物、化学、食品等领域。它的基本原理是利用物质分子中电子的跃迁来确定分子的结构和浓度。在紫外光谱法中，光源通过具有狭缝的单色仪，产生单色光线。这些光线通过待测物质产生吸收，从而产生吸收光谱。吸收光谱是一种描述物质吸收光线强度的图形，通常以波长为横轴，吸光
荧光光谱法的基本原理
原子外层电子吸收光子后，由基态跃迁到激发态，再回到较低能级或者基态时，发射出一定波长的辐射，称为荧光。(1)激发光谱 是指发光的某一谱线或谱带的强度随激发光波长(或频率)变化的曲线。横坐标为激发光波长，纵坐标为发光相对强度。 激发光谱反映不同波长的光激发材料产生发光的效果。即表示发光的某一谱
关于比浊法的基本原理的介绍
比浊法的主要依据是悬浊液中的颗粒对光线的散射的性质。当一束光线通过悬浊液时，液体中颗粒的大小若小于入射光相应减弱。在一定条件下散射光的程度（或透射光减弱的程度）和悬浊液中颗粒的数量成比例关系。其变化可用下式表示：[3] 其中，I为透射光强度，为入射光强度，b为光径，为浊度。上式和比尔定律公式相
双向电泳完整操作步骤
（一）第一向等电聚焦1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液（I）（不含DTT，不含Bio-Lyte）一小管（1ml/管），置室温溶解。2. 在小管中加入0.01g DTT， Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml，充分混匀。3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲液，加入100ml样