双向电泳法的基本原理

蛋白质首先在薄条凝胶中通过等电聚焦分离。然后将凝胶水平放置在第二个平板状凝胶上,通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质。水平分离反映了pI的差异;垂直分离反映了分子量的差异。因此,原始的蛋白质组成在两个维度上扩散。使用双向电泳技术可以分解数千种细胞蛋白质。可以从凝胶中切取出单个蛋白质点,并通过质谱进行鉴定。......阅读全文

双向电泳的操作步骤

第一向等电聚焦⒈ 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含IPG buffer)一小管(1ml/管),置室温溶解。⒉ 在小管中加入0.01g DTT, 0.5% 对应胶条pH范围的IPG buffer,充分混匀。⒊ 从小管中取出400微升水化上样缓冲液,加入100微升样品(

火焰光度法的基本原理

火焰光度计是根据被测元素的原子或离子受火焰激发后能发出其特征波长谱线和依据罗马金公式,对样品中的碱金属及碱土金属元素进行定量分析的仪器。

免疫比浊法的基本原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊

荧光分析法的基本原理

荧光分析法是材料元素分析的一种方法,它是利用一定波长的x射线照射材料,元素处于激发态,从而产激发出光子,形成一种荧光x射线。由于不同元素的激发态的能量大小不一样,所以产生的荧光x射线不同, 进而根据荧光x射线的波长和强度,得出元素的种类和含量。

免疫比浊法的基本原理

免疫比浊法(Turbidimetric inhibition immuno assay)是抗原抗体结合动态测定方法。其基本原理是:当抗原与抗体在特殊稀释系统中反应而且比例合适(一般规定抗体过量)时,形成的可溶性免疫复合物在稀释系统中的促聚剂(聚乙二醇等)的作用下,自液相析出,形成微粒,使反应液出现浊

荧光分析法的基本原理

荧光分析法是材料元素分析的一种方法,它是利用一定波长的x射线照射材料,元素处于激发态,从而产激发出光子,形成一种荧光x射线。由于不同元素的激发态的能量大小不一样,所以产生的荧光x射线不同, 进而根据荧光x射线的波长和强度,得出元素的种类和含量。

酶联免疫法的基本原理

①使抗原或抗体结合到某种固相载体表面,并保持其免疫活性。②使抗原或抗体与某种酶连接成酶标抗原或抗体,这种酶标抗原或抗体既保留其免疫活性,又保留酶的活性。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合

荧光分析法的基本原理

荧光分析法是材料元素分析的一种方法,它是利用一定波长的x射线照射材料,元素处于激发态,从而产激发出光子,形成一种荧光x射线。由于不同元素的激发态的能量大小不一样,所以产生的荧光x射线不同, 进而根据荧光x射线的波长和强度,得出元素的种类和含量。

核磁共振法的基本原理

核磁共振主要是由原子核的自旋运动引起的。不同的原子核,自旋运动的情况不同,它们可 以用核的自旋量子数I来表示。自旋量子数与原子的质量数和原子序数之间存在一定的关系,大致分为三种情况,如下表。分类质量数原子序数自旋量子数INMR信号I偶数偶数0无II偶数奇数1,2,3,…(I为整数)有III奇数奇数或

印迹法的基本原理及应用

印迹法(blotting)即转移电泳,是20世纪70年代发展起来的一种新方法。Southern于1975年建立了检测特异DNA片段的DNA-RNA杂交法,称作Southern印迹法。1977年Alwine等把此方法应用到RNA的研究方面,称作Nouthern印迹法。1979年Towbin等则把该方法

薄层色谱法的基本原理

薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离子交换层

荧光分析法的基本原理

荧光分析法是材料元素分析的一种方法,它是利用一定波长的x射线照射材料,元素处于激发态,从而产激发出光子,形成一种荧光x射线。由于不同元素的激发态的能量大小不一样,所以产生的荧光x射线不同, 进而根据荧光x射线的波长和强度,得出元素的种类和含量。

酶标法的基本原理简介

  酶标法的基本原理是将抗原或抗体与酶用胶联剂结合为酶标抗原或抗体,此酶标抗原或抗体可与固相载体上或组织内相应抗原或抗体发生特异反应,并牢固地结合形成仍保持活性的免疫复合物。当加入相应底物时,底物被酶催化而呈现出相应反应颜色,颜色深浅与相应抗原或抗体含量成正比。由于此技术是建立在抗原-抗体反应和酶的

水热法的基本原理简介

  水热法是利用高温高压的水溶液使那些在大气条件下不溶或难溶的的物质溶解,或反应生成该物质的溶解产物,通过控制高压釜内溶液的温差使产生对流以形成过饱和状态而析出生长晶体的方法。  自然界热液成矿就是在一定的温度和压力下,成矿热液中成矿物质从溶液中析出的过程。水热法合成宝石就是模拟自然界热液成矿过程中

免疫浊度法的基本原理

当可溶性抗原与相应抗体在两者比例合适时,抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,使反应液出现浊度,如形成的复合物增加,反应液的浊度随之增加,与一系列的标准品对照,即可计算出受检物的含量。按照仪器设计的不同,分为透射比浊仪测定法和散射比浊仪测定法。

DNA酶足迹法的基本原理

原理为:DNA和蛋白质结合以后便不会被DNAase分解,在测序时便出现空白区(即蛋白质结合区),从而了解与蛋白质结合部位的核苷酸对数目。在用酶移出与蛋白质结合的DNA后,又可测出被结合处DNA的序列。

薄层色谱法的基本原理

  薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法,它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同,使在流动相(溶剂)流过固定相(吸附剂)的过程中,连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附,从而达到各成分的互相分离的目的。  薄层层析可根据作为固定相的支持物不同,分为薄层吸附层析(吸附剂)、薄层分配层析(纤维素)、薄层离

火焰光度法的基本原理

火焰光度法是用火焰作为激发光源的原子发射光谱法.1859年由R.W.E.本生发明,1935年制成第一台火焰光谱光电直读光度计.该法系选择适当的方式将分析试样引入火焰中,依靠火焰(1800-2500℃)的热效应和化学作用将试样蒸发、离子化、原子化和激发发光.根据特征谱线的发射强度I与样品中该元素浓度之

免疫浊度法的基本原理

  当可溶性抗原与相应抗体在两者比例合适时,抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成抗原抗体复合物,使反应液出现浊度,如形成的复合物增加,反应液的浊度随之增加,与一系列的标准品对照,即可计算出受检物的含量。  按照仪器设计的不同,分为透射比浊仪测定法和散射比浊仪测定法。

荧光分析法的基本原理

荧光分析法是材料元素分析的一种方法,它是利用一定波长的x射线照射材料,元素处于激发态,从而产激发出光子,形成一种荧光x射线。由于不同元素的激发态的能量大小不一样,所以产生的荧光x射线不同,进而根据荧光x射线的波长和强度,得出元素的种类和含量。

沉淀法的基本原理介绍

   沉淀法的基本原理主要内容包括以下几点:  沉淀法是利用沉淀反应,将被测组分转化为难溶物,以沉淀形式从溶液中分离出来,并转化为称量形式,最后称定其重量进行测定的方法。沉淀法是重量分析法中最常用的一种分析方法。  沉淀法的操作步骤是:取样一溶解一加沉淀剂使其沉淀一过滤医|学教育网搜集整理一洗涤一干

火焰光度法的基本原理

火焰光度计是根据被测元素的原子或离子受火焰激发后能发出其特征波长谱线和依据罗马金公式,对样品中的碱金属及碱土金属元素进行定量分析的仪器。一、什么是火焰光度计?火焰光度计本身无法得出被测元素的绝对浓度值。必须首先制备标准溶液,进行 标定,绘制标准曲线,然后对未知溶液进行测量。获得仪器显示的读数后,再从

免疫印迹法的基本原理

与Southern或Northern杂交方法类似,但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶电泳,被检测物是蛋白质,“探针”是抗体,“显色”用标记的二抗。经过PAGE分离的蛋白质样品,转移到固相载体(例如硝酸纤维素薄膜)上,固相载体以非共价键形式吸附蛋白质,且能保持电泳分离的多肽类型及其生物学

简述旋光法的基本原理

  旋光性质为化合物的特性,可以用于鉴别和定量测定。为便于比较,通常将旋光度换算成比旋光度(又称旋光率),其定义为在一定温度下,一定波长的偏振光透过每毫升中含有1克旋光性物质的溶液1分米长时所旋转的角度。

亲和色谱法的基本原理

亲和色谱法是利用生物分子间所具有的专一亲和力而设计的层析技术。首先将载体在碱性条件下用溴化氰(CNBr)活化,再用化学方法将能与生物分子进行可逆性结合的物质(称为配基结合到某种活化固相载体上此过程称为偶联反应。将偶联反应得到的亲和吸附剂装入层析柱中而形成亲和柱,溶液样品通过亲和柱时,生物大分子和亲和

双向电泳操作步骤

  一、等电聚焦   1. 从冰箱中取-20℃冷冻保存的水化上样缓冲液(I)(不含DTT,不含Bio-Lyte)一小管(1ml/管),置室温溶解。   2. 在小管中加入0.01g DTT, Bio-Lyte 4-6、5-7各2.5ml,充分混匀。   3. 从小管中取出400ml水化上样缓冲

双向电泳操作步骤

双向电泳操作步骤 第一向凝胶 第二向凝胶 组织来源的蛋白质样品的溶解和制备             实验方法原理 双向电泳(two-dimensiona

双向电泳操作步骤

水化上样( 被动上样)1. 从冰箱中取出 IPG 胶条,室温放置 10min。2. 沿水化盘槽的边缘从左向右线性加入样品,槽两端各 1cm 左右不加样,中间的样品液一定要连贯。注意:不要产生气泡,否则会影响胶条中蛋白质的分布。3. 用镊子轻轻撕去 IPG 胶条上的保护层。注意:碱性端较脆弱,应小心操

双向电泳操作步骤

实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 ddH2O溴酚蓝指示剂矿物油丙烯酰胺乙醇MilliQ 水饱和正丁醇SDS琼脂糖仪器、耗材 样品水化盘冰箱厚滤纸摇床电泳槽电泳仪镊子二向电泳制冷仪手套实验步骤 1.  样品制备。2.  第一向等电聚焦。3.  第二向SDS电泳。4.  凝胶的染色。5.  凝胶扫描和分析

离子色谱法基本原理

离子色谱法基本原理是离子色谱法 (ion chromatography, IC) ,是高效液相色谱法的一种,是分析离子的一种液相色谱法。离子色谱法是以低交换容量的离子交换树脂为固定相对离子性物质进行分离, 用电导检测器连续检测流出物电导变化的一种色谱方法。阳离子色谱柱是高效液相色谱的一种,是分析阴阳