双向电泳的常见问题解析
重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电泳。为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后会减少，暴露出了胶条的背面？通常情况下，等点聚焦中体系内除了蛋白质还会存在少量带电小分子，当这些带电小分子在电场中向两极运动时，会带动胶条中的水分子运动，水分子运动会带动附近的覆盖油移动，当样品质量不高，带电小分子较多时，会导致覆盖油移动严重溢出胶条槽，此时，通常会伴随胶条的酸性端胶条厚度增加。当发生覆盖油溢出或胶条暴露时，应及时补加覆盖油。为了防止这个现象的发生，应从样品制备时严格控制样品质量，尽量减少带电小分子如盐离子的含量。同时可以在相邻的空电泳槽里，也加入适量（80 %满）的覆盖油。跑第一向时，为什么要设定一个电流的最大值电压......阅读全文
双向电泳的常见问题解析
重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电泳。为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后
双向电泳仪的常见问题
重泡胀后的胶可以不用转移到另一个电泳槽，直接跑 2D 的一向吗？一般情况下是可以的。但当上样量特别大时，可能会有一部分蛋白质没有被胶条吸收，这样跑完 1D 和 2D 胶后，会有很多横向条纹。所以在这种情况下，最好在重泡胀后，将胶条转移到另外一个电泳漕中进行电泳。为什么我在等电聚焦前加的矿物油在聚焦后
双向电泳常见问题解答
1. 出现垂直拖尾是什么原因？ 答：有可能是蛋白没有被SDS充分包裹，适当延长平衡时间可以解决这个问题；另外也有可能是多余的DTT或者灰尘所致。 2. 为什么出现横向条纹？ 答：有可能是聚焦不完全，需要根据胶条长度和PH范围以及上样量选择合适的聚焦时间；另外也有可能是样品提取及溶解和水化不完全的缘
双向电泳常见问题解答
随着人类基因组草图完成，蛋白质组研究全面展开。作为经典蛋白质组学分离技术，双向电泳越来越被科研人员所熟知。但要想得到漂亮的双向电泳谱图，却并不那么容易。我们将针对双向电泳过程中常出现的问题进行总结，希望能给您的实验带来帮助。 本期我们重点关注双向电泳图谱中常出现的水平条纹。双向电泳水平条纹的产生主要
水质分析常见问题解析
水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢？01、BOD缓冲剂液化了还能用吗?答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。02、我们测氨氮，是以氮元素计还是以铵根离子计?答:氨氮是指水中以游离氨和铵根离子形式存在的
引物合成常见问题解析
Q1.引物是如何合成的？ 目前引物合成基本采用固相亚磷酰胺三酯法。DNA合成仪有很多种,无论采用什么机器合成，合成的原理都相同，主要差别在于合成产率的高低，试剂消耗量的不同和单个循环用时的多少。 (1) 去保护：加入Deblocking脱去碱基上5'- OH的保护基团DMT，获得游离
水质分析常见问题解析
水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢？ 01、BOD缓冲剂液化了还能用吗? 答：BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象，这是正常情况，不影响使用。 02、我们测氨氮，是以氮元素计还是以铵根离子计? 答:氨氮是指水中以游离氨和铵根离子形
血培养的临床常见问题解析
血流感染（BSI）是指病原微生物侵入血流，随血行播散的感染，可以表现为菌血症、真菌血症、病毒血症和脓毒症。血流感染是一种全身性感染疾病，严重者可引起休克、弥散性血管内凝血和多脏器功能衰竭。导管相关性血流感染（CRBSI）是指带有血管内导管或者拔除血管内导管48小时内，患者出现菌血症或真菌血症，并伴有
酸度计的常见问题解析
1、控制器无显示？ 解决方法：检查电源线是否接对，电源是否供上。 2、显示数字上、下乱跳？ 解决方法：检查周围有无变频器等干扰设备，注意要远离这些干扰设备 或者做好屏蔽措施。 3、PH仪表不能校准？ 解决方法：标准溶液配制不正确或者电极损坏。 4、经过标准液PH4.00、PH6.86
水质分析常见问题解析三
请问做氨氮实验时，为什么加入N3试剂出现大量白色浑浊，加入N2试剂后 下层红色上层青色 不断有小气泡上升？答：钙镁离子高，应做絮凝沉淀预处理。 水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质，影响氨氮的测定。因此，在分析时需做适当的处理。对较清洁的水，可采用絮凝沉淀发；对污染严重的水或工业废水，则用蒸馏法
电泳槽常见问题解析
故障一、手工粘接电泳槽的铂金电极孔处漏液 该处可能是因为电泳槽工作时间较长所至，对此应使用堵漏胶（稠合液）进行封堵即可。 故障二、模具水平电泳槽电极孔处漏液 检查电极下的密封圈是否被螺丝拧紧在正确位置或已经损坏。如有损坏需更换密封胶圈。 故障三、电泳槽有机板粘接处漏液或开胶 有机板开胶
水质分析常见问题解析四
含氯酸钠废水COD如何检测？ 答：含氯酸钠废水的COD检测水样的原水COD很高，用户使用了氯酸钠来处理，氯酸钠具有氧化性，能降低COD，但这种废水，使用正常方法无法检测，经过查找资料及连华技术人员的建议，我们进行了方法测试，找到解决方案。 1）取2.5ml水样，加入4.8ml的E试剂，注意速度
水质分析常见问题解析二
请问bod营养盐有黄色不溶物正常吗？答：正常，营养盐配好是淡黄色不完全溶解的溶液，用前需摇匀。 请问n2试剂前一天配出来没什么问题，为什么放一天后变棕黄色变浑？答：n2试剂配好后应转移到聚乙烯瓶中密封、避光、低温储存。如果放到矿泉水瓶内，时间稍长会出现变质。如果未密封保存，空气中的有机气体也会让试剂
水质分析常见问题解析五
测定cod用密封管消解行不行？答：可以的，但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧，在颠倒摇匀的时候，可能会让溶液洒出，导致测值结果不准，甚至可能会造成人身伤害；部分水样在消解时会释放大量的气体，此种水样不可密封消解，如水里的次氯酸根太高，消解时会释放出大量氯气，密封消解会导致消解管内压
凝胶过滤层析常见问题解析
样品和选择的填料不匹配待分离的样品中目标物质和其它杂质的分子量小于2倍且都在选择的填料的排阻极限之外或者之内。若样品中目标物质的分子量和其它杂质的分子量小于2倍时，建议尝试其它方法分离，反之选择凝胶过滤层析时，填料的选择应根据样品中目标分子的大小选择最接近（大或小都可以）目标分子排阻极限的填料进行分
水质分析常见问题解析六
近COD检测结果较以前低了很多，大概是什么原因？答：1、被污染，蒸馏水被污染导致偏高，此时需要更换蒸馏水。 2、比色皿或反应管被污染，导致样偏高，此时需重新清洗反应管与比色皿。 3、曲线值被修改，出厂时曲线值为1505，用户可通过恢复出厂设置，或按照说明书重新校正仪器。 4.水样本
载体构建实验常见问题大解析
大家是否在实验中经常遇到载体构建的各种问题，浪费大量的时间和精力，各种各样的问题让人头疼，海创科业小编作为科研老司机特意为各位科研君整理了载体构建实验常见问题及解决方法，希望能够帮助到大家。1. PCR载体构建大部分时候都要通过PCR的方法获取目的片段，扩增PCR的时候大家尽量选用高保真
双向电泳
蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心. 双向电泳由O’Farrell’s于1975年首次建立并成功地分离约1 000个E.coli蛋白，并表明蛋白质谱不是稳定的，而是随环境而变化. 双向电泳原理简明，第一向进行等电聚焦，蛋白质沿pH梯度分离，至各自的等电点；随后，再沿垂直的方向进行分子量
双向电泳
实验概要本实验介绍了双向电泳技术，先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到二维分布的蛋白质图。实验原理双向凝胶电泳的原理是第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离，第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离，把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上
双向电泳操作步骤——双向电泳操作步骤
实验方法原理双向电泳（two-dimensional electrophoresis）是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pI分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。实验材料细胞样品试剂、试剂盒ddH2O溴酚蓝指示剂
氮吹仪的几个常见问题解析
1、氮吹仪氮气源应用是怎样的? 如使用量较大的话建议买一个氮气发生器; 检测某些项目时氮吹仪是*的，使用高纯氮气便可; 气象的氮气一般都是99.99%以上，氮气使用2-3个便可。 2、氮吹仪的四大优势 氮吹仪也叫自动快速浓缩仪，氮气吹干仪等。目前，氮吹仪已经代替传统的旋转蒸发仪。
凝胶成像分析系统的常见问题解析
大家在使用凝胶成像分析系统的过程中，会遇到一些疑问，有些是比较常见的，也就是大家普遍比较关心的问题，下面托普云农就就这些常见的问题来一一进行解答。 1.如何调节焦距、聚焦、光圈以获得高质量的图片？ 凝胶成像分析系统上三个最重要的可调参数分别是焦距、聚焦和光圈。其中焦距调节清晰度，
有关熔融指数仪常见问题的解析
温度的准确性 国标规定，温度稳定允差0.5℃，仪器尽管采用了电脑软件控温，消除了许多不稳定因素，但随时间的流逝，传感器及电子电路总有些许变化使稳定显示值偏差。因此，要经常用专用校正温度计进行校对。当实际温度偏低时，熔体流动性变差，试验值变小，但在正常情况下，如果偏离值不大（如小于0.5℃），对
双向电泳的定义
双向电泳（two-dimensional electrophoresis,2-DE）是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合，即先进行等电聚焦电泳（按照pH分离），然后再进行SDS-PAGE（按照分子大小），经染色得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。蛋白质组研究的发展以双向电泳技术作为核心。双向电泳由
双向电泳的原理
蛋白质首先在薄条凝胶中通过等电聚焦分离。然后将凝胶水平放置在第二个平板状凝胶上，通过SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离蛋白质。水平分离反映了pI的差异；垂直分离反映了分子量的差异。因此，原始的蛋白质组成在两个维度上扩散。使用双向电泳技术可以分解数千种细胞蛋白质。可以从凝胶中切取出单个蛋白质点，并通过质谱
电导率仪常见问题解析
电导率仪，是实验室测量水溶液电导率仪必备的仪器，它广泛地应用于石油化工、生物医药、污水处理、环境监测、矿山冶炼等行业及大专院校和科研单位。若配用适当常数的电导电极，还可用于测量电子半导体、核能工业和电厂纯水或超纯水的电导率。 电导率的测量原理其实就是欧姆定律测定平行电极间溶液部分的电阻。但是，当电
电导率仪常见问题解析
电导率仪，是实验室测量水溶液电导率仪*的仪器，它广泛地应用于石油化工、生物医药、污水处理、环境监测、矿山冶炼等行业及大专院校和科研单位。若配用适当常数的电导电极，还可用于测量电子半导体、核能工业和电厂纯水或超纯水的电导率。 电导率的测量原理其实就是欧姆定律测定平行电极间溶液部分的电阻。但是，当电
旋转蒸发器常见问题解析
旋转蒸发器的电动升降功能重要吗?电动升降功能对旋蒸是锦上添花的效果。采购者从性价比、安全性、故障率等各方面综合考虑的话大多数还是选手动升降，特别是有防爆要求顾客的几乎不考虑电动升降。哪种真空泵适合我的旋蒸?真空泵是旋转蒸发器必备的配套产品，蒸发低沸点有机溶剂通常真空度要求不高(一般来说低于0.4K
光纤熔接机常见问题解析
1、光纤能进行正常复位，进行间隙设置时光纤出现在屏幕上但停止不动，且屏幕显示停止在“设置间隙”。 解决方法： （1）按压“复位”键，使系统复位。 （2）打开防风罩，分别打开左、右压板。顺序进行下列检查： （3）检查是否存在断纤。 （4）检查光纤切割长度是否太短。 （5）检查载纤槽与光
双向电泳实验
试剂、试剂盒 尿素去污剂仪器、耗材 聚丙烯酰胺凝胶实验步骤 一、第一向1. 等电聚焦凝胶的准备双向电泳通常用聚丙烯酰胺凝胶作介质，但需含有 8 mol/L 尿素、0.5%~2% 非离子或两性离子去污剂。为了增加样品的可溶性，可加 0.5% CHAPS。在第一向电泳中，最重要的是用载体两性电解