梯度洗脱的概念和用途
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。从而可以使一个复杂样品中的性质差异较大的组分能按各自适宜的容量因子k达到良好的分离目的。......阅读全文
梯度洗脱的概念和用途
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程
梯度洗脱的概念和目的
梯度洗脱(gradient elution)又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。在气相色谱中,为了改善对宽沸程样品的分离和缩短分析周期,广泛采用程序升温的方法。而在液相色谱中对组分复杂的样品则采用梯度洗脱的方法。在同一个分析周期中,按一定程
梯度洗脱层析的概念和原理
中文名称梯度洗脱层析英文名称gradient elution chromatography定 义使洗脱液形成由低到高或由高到低的极性、浓度或pH梯度等,将层析柱上不同的组分洗脱出来的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
梯度洗脱层析的基本概念
中文名称梯度洗脱层析英文名称gradient elution chromatography定 义使洗脱液形成由低到高或由高到低的极性、浓度或pH梯度等,将层析柱上不同的组分洗脱出来的层析技术。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
分级梯度洗脱的概念和离子交换剂介绍
分级梯度洗脱是依据各种离子或离子化合物与离子交换剂的结合力不同而进行分离纯化的。离子交换层析的固定相是离子交换剂,它是由一类不溶于水的惰性高分子聚合物基质通过一定的化学反应共价结合上某种电荷基团形成的。离子交换剂可以分为三部分:高分子聚合物基质、电荷基团和平衡离子。电荷基团与高分子聚合物共价结合,形
液相色谱法术语概念梯度洗脱
梯度洗脱(gradient elution)间断地或连续地改变流动相的组成或其他操作条件,从而改变其色谱洗脱能力的过程。
梯度洗脱分类
梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。(1)低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀,在常压下预先按一定的程序将溶剂混合后,再用泵输入色谱柱系统,也称为泵前混合。(2)高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控制)、混合器等部件所组成。两台
梯度洗脱的原理
流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。具体地讲,当样品随梯度起点的流动相进入色谱柱入口时,由于起点流动相中强洗脱溶剂B含量较低,化合物C1(保留性适中)和化合物C2(保留
梯度洗脱的优点
梯度洗脱的优点:1.缩短分析周期;2.提高分离能力;3.峰型得到改善,很少拖尾;4.增加灵敏度。但有时引起基线漂移。
梯度洗脱的技术要点和装置要求
①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高
什么是梯度洗脱?
梯度洗脱装置梯度洗脱就是在分离过程中使两种或两种以上不同极性的溶剂按一定程序连续改变它们之间的比例,从而使流动相的强度、极性、pH值或离子强度相应地变化,达到提高分离效果,缩短分析时间的目的。梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度),流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台
梯度洗脱的技术特点
提高柱效,改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。(一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后
梯度洗脱的技术特点
提高柱效,改善检测器的灵敏度。当样品中的一个峰的k值和最后一个峰的k值相差几十倍至几百倍时,使用梯度洗脱效果特别好。梯度洗脱中为保证流速的稳定,必须使用恒流泵,否则难获重复结果。梯度洗脱常用一个弱极性的溶剂A和一个强极性的溶剂B。(一种原理,前者为洗脱装置和柱子之间封闭,适用于配备压力泵的色谱柱,后
梯度洗脱的技术条件
①洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。②梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。③梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。
液相色谱法术语概念线性溶剂强度梯度洗脱
线性溶剂强度梯度洗脱(linear solvent strength gradient elution)流动相中溶剂强度参数较强或较弱的组分的体积百分数随时间或洗脱体积呈线性变化。
梯度洗脱装置怎么分类
梯度洗脱装置分为两类:一类是外梯度装置(又称低压梯度),流动相在常温常压下混合,用高压泵压至柱系统,仅需一台泵即可。另一类是内梯度装置(又称高压梯度),将两种溶剂分别用泵增压后,按电器部件设置的程序,注入梯度混合室混合,再输至柱系统。
洗脱剂的概念
在洗脱法色谱操作中,流动相携带待测组分在色谱柱内向前移动并流出色谱柱的过程称为洗脱。
洗脱物的概念
中文名称洗脱物英文名称eluate定 义样品经过层析分离,用溶剂流洗出的组分;或经过电泳分离后,用电泳等方法回收的组分。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
电洗脱的概念
中文名称电洗脱英文名称electroelution定 义将在某些支持物中含有的目的成分电泳迁移出来的技术。如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳后,将含有所分离成分的凝胶切出来,放在适当的电场中,使凝胶内所要的成分移到缓冲液中。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
梯度洗脱的基本原理
流动相由几种不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例改变流动相的极性,使每个流出的组分都有合适的容量因子k,并使样品中的所有组分可在最短时间内实现最佳分离。具体地讲,当样品随梯度起点的流动相进入色谱柱入口时,由于起点流动相中强洗脱溶剂B含量较低,化合物C1(保留性适中)和化合物C2(保留
液相色谱仪的梯度洗脱
液相色谱仪的梯度洗脱可以改进复杂样品的分离,改善峰形,减少脱尾并缩短分析时间,而且还能降低小检测量和提高分离精度。梯度洗脱对复杂混合物,特别是保留值相差较大的混合物的分离是极为重要的手段,因为这些样品的 k ′范围宽,不能用等度洗脱简单地处置。有些样品用等度洗脱可能分离的也很好,但色谱柱中可能会滞留
梯度洗脱方式的特点及优劣
1)线性梯度在某一段时间内连续而均匀地增加流动相强度。2)阶梯梯度流动相强度从低强度直接改变为较高强度。3)高压梯度利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。两种溶液在高压下混合。a.优点:通过梯度程序控制器控制每台泵的输出,能获得任意形式的梯度曲线,而且精
酶原的概念和用途
有些酶在细胞内合成或初级释放时只是酶的无活性前体,必须在一定的条件下,这些酶的前体水解开一个或几个特定的肽键,致使构象发生改变,表现出酶的活性。这种无活性酶的前体称作酶原。某些酶在细胞内合成或初分泌时只是酶的无活性前体,此前体物质称为酶原(zymogen),使酶原转变为有活性酶的作用称为酶原激活(z
梯度电泳的概念
中文名称梯度电泳英文名称gradient electrophoresis定 义所用的凝胶浓度从上到下呈梯度改变的凝胶电泳,或所用的缓冲液的成分呈梯度分布的电泳。这两种设计都是为了提高电泳的分辨率或适用范围。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
不同梯度洗脱系统的特征比较
不同梯度洗脱系统的特征比较特性二元高压梯度二元低压梯度多元低压梯度可能洗脱范围较广较广广梯度的重现性较好好较好成本较高低低改变流动项较容易容易较容易机械性能较简单,较可靠简单,可靠较简单,较可靠自动化难以程度容易容易较容易对溶解气体的敏感性较敏感敏感敏感梯度准确性较准确准确较准确不同溶剂混合能力较强
高效液相色谱仪的梯度洗脱
高效液相色谱仪的梯度洗脱是指在一个分析周期内按一定程序连续变化流动相的浓度配比、极性、PH 值或离子强度。对于复杂混合物,特别是保留性能相差较大的混合物,梯度洗脱是改进高效液相色谱仪分离效果的重要手段。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例而改变流动
液相色谱仪的梯度洗脱技术
液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。在液相色谱仪中流速(压力)梯度洗脱和温度梯度洗脱效果不大,而且会带来一些不利影响,因此,
液相色谱仪梯度洗脱曲线
液相色谱仪梯度洗脱时,常用一个弱极性溶剂A和一个强极性溶剂B组合,以梯度洗脱时间为横坐标,以流动相中强极性组分B的体积百分含量为纵坐标,可绘出梯度洗脱曲线。若在单位时间内,强极性溶剂B在流动相中的体积百分含量以恒定速率增加,则流动相的极性呈线性梯度输出;若不以恒定速度增加,则流动相的极性呈凸形或凹形
液相色谱仪梯度洗脱概述
液相色谱仪在进行多成分的复杂样品分离时,经常会碰到前面的一些成分分离不完全,后面的一些成分分离度太大,且出峰很晚和峰形较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并相互分离,往往要用到梯度洗脱技术。一、工作原理:流动相由两种(或多种)不同极性的溶剂组成,通过改变流动相中各溶剂组成的比例
液相色谱仪梯度洗脱技术
液相色谱仪梯度洗脱(溶剂程序)是通过改变流动相组成来调整组分k值,改变分离因子α值,以达到在zui短时间内实现zui优分离的目的。一、对色谱泵的要求:色谱泵在任何情况下都要保持高精度。 1、流速要稳定平滑,重现性好。 2、溶剂混合要可靠充分:(1)准确、重现的自动溶剂混合。(2)准确、重现的梯