离子交换层析的原理和过程

离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有负电荷的称之阳离子交换树脂;而带有正电荷的称之阴离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。......阅读全文

离子交换层析的预处理和装柱

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终

离子交换层析的概述

  离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。  离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基

离子交换层析的应用

离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

离子交换层析的发展

  1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换现象。上世纪40年代,出现了具有稳定交换特性的聚苯乙烯离子交换树脂。50年代,离子交换层析进入生物化学领域,应用于氨基酸的分析。离子交换层析是生物化学领域中常用的一种层析方法,广泛的应用于各种生化物质如氨基酸、蛋白、糖类、核

离子交换层析的概念

离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基氨基乙基

离子交换层析实验

离子交换层析技术             实验方法原理 离子交换层析(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离

离子交换层析实验

实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 离子交换缓冲液仪器、耗材 离子交换层析柱梯度混合器电导表实验步骤 1.  配制离子交换层析缓冲液,安装好层析柱,但以离子交换层析缓冲液取代其中的凝胶过滤缓冲液。 2.  用起始梯度的缓冲液溶解含蛋白质混合物的样品。3.  弃去柱床上部的大部分缓冲液,并将样品加在凝胶的顶

离子交换层析法

离子交换层析法(ion exchange chromatography,简称IEC)是从复杂的混合物中,分离性质相似大分子的方法之一,依据的原理是物质的酸碱性、极性,也就是所带阴阳离子的不同。电荷不同的物质,对管柱上的离子交换剂有不同的亲和力,改变冲洗液的离子强度和pH值,物质就能依次从层析柱中分离

离子交换层析法

离子交换层析法是以具有离子交换性能的物质作固定相,利用它与流动相中的离子能进行可逆的交换性质来分离离子型化合物的一种方法。⒈ 离子交换剂预处理和装柱 对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处

离子交换层析实验

基本方案 离子交换层析介质和层析柱的选择             实验材料 蛋白质 试剂

离子交换柱层析分离蛋白原理详解

 1.离子交换与洗脱   所谓离子交换,是指溶液中的某一种离子与另一种靠静电力结合在惰性载体上的离子进行可逆交换的过程,即溶液中的离子结合到载体上而载体上的离子被替换下来。若惰性载体上以共价键结合着带正电荷的活性基团,则可交换阴离子,叫阴离子交换剂;若以共价键结合着带负电荷的活性基团,则可交换阳离子

凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原同

所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同.离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.

渗透层析的概念和原理

中文名称渗透层析英文名称permeation chromatography定  义被分离的物质能进入固定相的层析系统,其中混合物的分离是根据固定相基质的选择性容纳和排阻的效应,如分子大小、形状的不同(分子筛层析)或电荷多寡的不同(离子交换层析)等。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术

同系层析的概念和原理

同系层析指在核酸分析中,将样品经核酸酶部分裂解成不同长度的核苷酸片段,用同位素标记后,在DEAE纤维素薄层上分离,用含有未标记的相同的核苷酸片段作展层溶剂,这样,未标记的核苷酸把标记过的核苷酸推进,使按分子量大小不同把标记核苷酸片段,按由小到大的次序排列,达到分离的目的的层析法。

径向层析的概念和原理

中文名称径向层析英文名称radial chromatography定  义在圆形的滤纸距圆心适当距离位置处点样后置于离心轴上,在离心力作用下,样品向外周移动,分离条带呈同心圆状的一种离心纸层析技术。此法优点是快速,条带细而清晰。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

双向层析的概念和原理

中文名称双向层析英文名称two-dimensional chromatography定  义在纸层析、薄层层析或聚酰胺尼龙薄膜等层析时通过两次不同方向的流动相展开,以期获得样品的进一步分离的方法。一般是在第一次层析分离后,变换90°方向用不同的溶剂系统进行第二次层析。应用学科生物化学与分子生物学(一

离子交换层析的技术应用

离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

离子交换层析的应用介绍

离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。离子交换层析分离蛋白质是根据在一定pH 条件下,蛋白质所带电荷不同而进行的分离方法。常用于蛋白质分离的离子交换剂有弱酸型的羧甲基纤维素(CM纤维素) 和弱碱型的二乙基氨基乙基

离子交换层析的发展简介

  1848年,Thompson等人在研究土壤碱性物质交换过程中发现离子交换现象。上世纪40年代,出现了具有稳定交换特性的聚苯乙烯离子交换树脂。50年代,离子交换层析进入生物化学领域,应用于氨基酸的分析。离子交换层析是生物化学领域中常用的一种层析方法,广泛的应用于各种生化物质如氨基酸、蛋白、糖类、核

简述离子交换层析的应用

  离子交换层析(ion-exchange chromatography,IEC) 是在生物大分子提纯中得到最广泛应用的方法之一。  离子交换层析技术已广泛用于各学科领域。在生物化学及临床生化检验中主要用于分离氨基酸、多肽及蛋白质,也可用于分离核酸、核苷酸及其它带电荷的生物分子。

离子交换层析的基本概述

  离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后

概述离子交换层析的洗脱

  离子交换层析的洗脱会受到线性或分步盐梯度或置换展开的影响。一般最好先采用线性的盐梯度洗脱,维持梯度约10个柱体积。在最简单的情况下,梯度操作需两种缓冲液,平衡缓冲液(buffer A)和用于加载相反电荷离子所用缓冲液(buffer B)。大多数情况下,并不需要后半段的梯度,因为多数蛋白质都可以在

离子交换层析小知识

  离子交换层析利用含有能与周围介质进行离子交换的不稳定离子的不溶 性基质来分离分离物质。  1、离子交换基质Adams 和Holnes 有1935 年通过酚、甲醛和磺酸缩 聚成不溶性树脂,制成了第一个人工合成的离子交换材料。从此以后,人工 合成的离子交换树脂日见增多(多数是从芳香族化合物合成的),

离子交换凝胶柱层析

原理 在植物生理生化的研究中,往往要从一个组分复杂的混合物中,将性质很相近的生物大分子分离,这是研究工作中一个很关键的问题,需要一种具有高度分辨力的技术,才能满足这一要求。离子交换层析就是这样的技术,能够分离只有很小差异的物质(例如仅有一个氨基酸不同的两种蛋白质),是分离生物大分子的一

离子交换层析实验(四)

六、实例: 复杂蛋白质混合物的分离采用离子交换层析分离复合蛋白质混合物的一个典型例子就是从乳清中分离蛋白质。它可以进行一定程度的工业化放大,但也可作为一个廉价的检测体系用于离子交换剂的评价。实际上, 我们也已经通过这种蛋白质混合物来比较不同供应商所提供的离子交换剂的吸附能力(Hahnetal.,

离子交换层析简要概述

  离子交换层析(IEX)基于特定pH下的净电荷差异分离生物分子。蛋白电荷取决于可电离氨基酸侧链基团的数量和类型。每个蛋白具有等电点(pI),即负电荷和正电荷的总数为零的pH。在低于蛋白pI的缓冲溶液中,蛋白带正电并将结合阳离子交换树脂的带负电荷的官能团。在高于蛋白pI的缓冲液中,蛋白是带负电荷的,

阳离子交换层析介绍

中文名称阳离子交换层析英文名称cation exchange chromatography定  义利用不同分子在所设计的条件(如pH、离子强度等)下,携带电荷情况不同,与阳离子交换剂结合的强度不同,可以用不同的条件洗脱出不同的组分的一种层析法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二

离子交换层析法简介

  离子交换层析法(Ion Exchange Chromatography简称为IEC)是以离子交换剂为固定相,依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。常用的离子交换剂有:离子交换纤维素、离子交换葡聚糖和离子交换树脂 。

离子交换层析实验(二)

三、结合条件根据离子交换平衡的一般性原理,很显然,应在很低的盐浓度条件下对蛋白质进行上样 (图 22.1)。盐浓度也必须适当地调节,这具体取决于离子交换剂配体的密度。通常推荐的盐浓度为 1 〇?100_〇 l/L 的缓冲液,其电导率相应为 1?4mS/cm。来源于细菌培养物的一般性原料或细胞

离子交换层析实验(一)

一、实验原理离子交换层析用于蛋白质分离的原理的最简单解释是,基于带相反电荷分子间的相互吸引力。蛋白质表面所带的电荷取决于其 Pl 和环境 PH。构成离子交换剂的基础介质通常为多孔珠形式,可以为蛋白质的吸附提供足够大的表面积。固定于基础介质上的带电配基可以带正电荷也可以带负电荷。为提高介质的结