定向测序的方法介绍

中文名称定向测序英文名称directed sequencing定 义对染色体上已知序列邻近段落的连续DNA测定的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文

定向测序的方法介绍

中文名称定向测序英文名称directed sequencing定  义对染色体上已知序列邻近段落的连续DNA测定的方法。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

RainDance的定向DNA测序方案

  当今,生物医学研究面临的一个主要挑战是确定复杂疾病的特定表型下隐藏的遗传变异。就临床可行性和成本而言,与低覆盖度的全基因组测序、甚至全外显子组测序相比,定向测序是目前最有希望且最可行的方式,有望可靠发现人类基因组中的常见和稀有变异。   定向DNA测序提供了目标区域的更深度覆盖,实现

ELISA方法的标记方法介绍

良好的酶结合物取决于两个条件:即高效价的抗体和高活性的酶。抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要,因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。在酶标记过程中,抗体的活性有所降低,故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白,最好使用亲和层析提纯的抗体,可提高敏感性,而且可稀释使用,减少非特异性

​萃取的方法介绍

向待分离溶液(料液)中加入与之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取剂,形成共存的两个液相。利用原溶剂与萃取剂对各组分的溶解度(包括经化学反应后的溶解)的差别,使它们不等同地分配在两液相中,然后通过两液相的分离,实现组分间的分离。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,几乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以与大量的水

洗脱的方法介绍

洗脱也可以分为两种:一种是选择与配体有亲和力的物质进行洗脱,另一种是选择与待分离物质有亲和力的物质进行洗脱。前者在洗脱时,选择一种和配体亲和力较强的物质加入洗脱液,这种物质与待分离物质竞争对配体的结合,在适当的条件下,如这种物质与配体的亲和力强或浓度较大,配体就会基本被这种物质占据,原来与配体结合的

分离方法的介绍

蒸馏利用液体混合物中各组分挥发性的不同,将它们分离的方法和过程,它可以将液体混合物中各组分部分地或全部地分离。除了简单的蒸馏技术外,还有分馏、减压蒸馏、共沸蒸馏、水汽蒸馏、萃取蒸馏、等温蒸馏和亚沸点蒸馏等。升华固态物质不经液态直接转变成气态的现象,可作为一种应用固-气平衡进行分离的方法。可分为常压升

升华的方法介绍

常压升华在一个标准大气压(1.013×10^5 Pa)下固体的升华。常温升华在室温(25 ℃)下固体的升华。真空升华又称减压升华,由于升华与固体蒸气压和外压的相对大小有关,降低外压可以降低升华温度,在常压下不能升华或升华很慢的物质可以采用真空升华。真空升华还可防止被升华的物质因温度过高而分解或在升华

灼烧的方法介绍

灼烧的方法是将固体放在坩埚中,直接用煤气灯或电炉加热,或置于高温电炉中按要求温度进行加热。例如:重量分析祛中灼烧硫酸钡晶体,分解矿石(煅烧石灰石为氧化钙和二氧化碳)的反应。高岭土熔烧脱水使其结构疏松多孔,进一步加工生产氧化铝;焙烧二氧化钛使其改变晶型和性质等,都是高温灼烧固体的实例。实验室中常用的电

关于重量分析方法的方法介绍

  重量分析方法根据分离方法的不同,又可分为下列三种方法:  ①沉淀法。将被测组分以微溶化合物的形式沉淀出来,再将沉淀过滤、洗涤、烘干或灼烧,最后称重计算其含量。例如用SiO2重量法测定矿石中的Si,用丁二酮肟镍重量法测定合金中的Ni等。  ②气化法。一般先通过加热(或其它方法)使试样中的被测组分挥

皮肤试验的方法介绍

皮肤试验是借助抗原、抗体在皮肤内或皮肤上的反应进行免疫学检测的方法。根据反应机制不同可分为两大类,一类为中合反应皮肤试验,可观察机体的体液免疫状态;另一类为超敏反应皮肤试验,用来检测机体的超敏反应和细胞免疫状态。锡克试验是衡量人体对白喉易感性或免疫程度的一种皮试。方法是注射一定量的白喉毒素于受试者前

细胞转染的方法介绍

脂质体转染法阳离子脂质体表面带正电荷,能与核酸的磷酸根通过静电作用,将DNA分子包裹入内,形成DNA脂复合物,也能被表面带负电的细胞膜吸附,再通过融合或细胞内吞进入细胞。脂质体转染适用于把DNA转染入悬浮或贴壁培养细胞中,是目前实验室最方便的转染方法之一,其转染率较高,优于磷酸钙法。由于脂质体对细胞

siRNA的制备方法介绍

体外制备1.化学合成许多国外公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成siRNA。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3—4对siRNAs 的成本就更高了,比较常见的做法是用其他方法筛选出最有效的序列再进行化学合成。最适用于:已经找到最有效的si

萃取技术的方法介绍

萃取方法向待分离溶液(料液)中加入与之不相互溶解(至多是部分互溶)的萃取剂,形成共存的两个液相。利用原溶剂与萃取剂对各组分的溶解度(包括经化学反应后的溶解)的差别,使它们不等同地分配在两液相中,然后通过两液相的分离,实现组分间的分离。如碘的水溶液用四氯化碳萃取,几乎所有的碘都移到四氯化碳中,碘得以与

共沉淀方法的介绍

  共沉淀(coprecipitation),一种沉淀从溶液中析出时,引起某些共存的可溶性物质一起沉淀的现象。共沉淀是重量分析法误差的主要来源之一,主要原因有表面吸附,混晶,包埋等。  共沉淀分离法是富集痕量组分的有效方法之一,是利用溶液中主沉淀物(称为载体)析出时将共存的某些微量组分载带下来而得到

肛裂的检查方法介绍

  肛裂检查也很简单,不需要特殊设备,在肛肠科门诊即能完成。但要注意,可看,可触,但不要随便用肛镜,避免造成患者更大痛苦和肛门撕裂伤。  1.看  (1)看“哨兵痔” 肛裂患者一般都会在肛缘前后侧长赘皮,这在临床被形象称为“哨兵痔”,是肛裂的重要标志之一。  (2)看裂口 位于肛门的前后正中位置,需

治疗脑卒中的方法介绍

  严重脑卒中可造成永久性神经损伤,急性期如果不及时诊断和治疗可造成严重的并发症,甚至死亡。脑卒中可分为出血性卒中和缺血性卒中,又根据发生部位有不同的治疗方式。对其特异性的治疗包括溶栓、抗血小板治疗、早期抗凝和神经保护等,非特异性的治疗包括降压治疗、血糖处理、脑水肿和颅内高压的管理等。  1.药物治

泼尼松的测定方法介绍

照高效液相色谱法(2010年版药典二部附录Ⅴ D)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(24:76)为流动相;检测波长为240nm。取泼尼松与可的松,加流动相溶解并稀释制成每1ml中各约含5μg的溶液,取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图,泼尼松峰与可的松峰的分离

检查硬皮病的方法介绍

  硬皮病的辅助检查主要有实验室检查与影像学检查。  1.血红蛋白可减低,蛋白尿提示肾损伤。血沉增快,血清球蛋白增高,类风湿因子可呈低滴度阳性。  2.约90%的硬皮病患者ANA阳性,多为斑点型或核仁型,抗着丝点抗体多为阳性。抗Scl-70抗体为SSc特异性抗体,但阳性率低(20%~30%阳性)。抗

治疗喉炎的方法介绍

  1.去除刺激因素  戒除烟酒。注意声带适当休息,减少发声,禁止大声叫喊,纠正发音方法。积极治疗鼻咽、下呼吸道感染,减少邻近器官病变的分泌物对喉部的刺激。  2.酌情应用雾化吸入法  将青霉素、庆大霉素及地塞米松等药物注入雾化器内,病人口含雾化器的喷出口,接上氧气或高压气泵使药液雾化。连续作深呼吸

叶绿素的测定方法介绍

叶绿素含量的测定方法主要有紫外分光光度法、荧光分析法、活体叶绿素仪法、光声光谱法和高效液相色谱法。不过目前应用最为广泛的还是分光光度法。叶绿素提取液的吸收光谱表明:有两个强吸收峰,分别在红光区和蓝紫区,不同提取溶剂和原料所得的叶绿素溶液的吸收光谱比较相似。叶绿素a、叶绿素b的红区最大吸收峰分别在66

酶的命名方法介绍

通常有习惯命名和系统命名两种方法。习惯命名常根据两个原则:1.酶的作用底物,如淀粉酶;2催化反应的类型,如脱氢酶。也有根据上述两项原则综合命名或加上酶的其它特点,如琥珀酸脱氢酶、碱性磷酸酶等等。习惯命名较简单,习用较久,但缺乏系统性又不甚合理,以致造成某些酶的名称混乱。如:肠激酶和肌激酶,从字面看,

检查气胸的方法介绍

  1、影像学检查  X线检查是诊断气胸的重要方法。胸片作为气胸诊断的常规手段,若临床高度怀疑气胸而后前位胸片正常时,应该进行侧位胸片或者侧卧位胸片检查。气胸胸片上大多有明确的气胸线,即萎缩肺组织与胸膜腔内的气体交界线,呈外凸线条影,气胸线外为无肺纹理的透光区,线内为压缩的肺组织。大量气胸时可见纵隔

试剂的提纯方法介绍

①蒸馏。对于易挥发的试剂,如常用的无机酸,有机溶剂等是最常用的提纯方法。根据沸点的高低选用常压或减压蒸馏法。②升华。对于某些易升华的试剂,如碘、萘等,此法最简便。③重结晶。适用于大多数固体试剂的提纯,其关键是选择好合适的溶剂。④溶剂萃取。无论将母体或杂质萃取到有机溶剂相中,均可达到提纯的目的。⑤离子

有机合成的方法介绍

(1)有机合成的方法包括正向合成分析法和逆向合成分析法。(2)正向合成分析法是从已知原料入手,找出合成所需的直接或间接的中间体,逐步推向合成的目标有机物。基础原料→中间体→中间体→……→目标化合物(3)逆向合成分析法是设计复杂化合物的常用方法。它是将目标化合物倒退一步寻找上一步反应的中间体,而这个中

疫苗疗法的方法介绍

中文名称疫苗疗法英文名称vaccinotherapy定  义通过接种疫苗以治疗某些疾病的方法。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫治疗(三级学科)

重力分离的方法介绍

重力分离是指固体物料在水和空气介质中借助于以重力运动规律为依据的分离和分选过程,在废弃物治理和再资源化领域大体可分为重力沉降和重力分选两过程。

石墨的氧化方法介绍

石墨的氧化方法是用无机强质子酸处理石墨,将强酸小分子插入石墨层间,再用强氧化剂KMnO4等对其进行氧化。

酶的生产方法介绍

酶的生产是指经过预先设计,并且通过人工控制而获得所需要的酶的过程。概括地说,酶的生产方法有提取法、发酵法和化学合成法三种。提取法是最早采用并且一直沿用至今的一种方法。提取法采用各种技术,直接从动植物或微生物的细胞或组织中将酶提取出来。提取法虽简单易行,但必须要有充足的原材料,这就使提取法的广泛应用受

肽的制备方法介绍

传统法主要有:微生物发酵法、酸法、碱法、电法、人工嫁接法、基因表达法、酶解法等。·微生物发酵法:微生物发酵法的生产工艺技术主要是通过现代微生物发酵技术将大分子球蛋白转化为小分子肽,通过控制微生物的代谢和发酵条件可生产不同氨基酸排序和分子量不同的肽。在发酵过程中,产生的游离氨基酸被微生物再次吸收利用,

悬浮培养的方法介绍

悬浮培养指的是一种在受到不断搅动或摇动的液体培养基里,培养单细胞及小细胞团的组织培养系统,是非贴壁依赖性细胞的一种培养方式。某些贴壁依赖性细胞经过适应和选择也可用此方法培养。增加悬浮培养规模相对比较简单,只要增加体积就可以了。深度超过5mm,需要搅动培养基,超过10cm,还需要深层通入CO2和空气,