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免疫共沉淀的技术优势

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免疫共沉淀

实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3

免疫共沉淀 简介

蛋白质间相互作用研究方法:免疫共沉淀1.用磷酸盐缓冲液洗30块10 cm培养板上的适宜细胞。刮去每块板上的细胞到1 ml冰冷的EBC裂解缓冲液中。2.将每毫升细胞悬液转移到微量离心管中,在微量离心机上4℃以最大速度离心15 min。3.收集上清(约30 ml)并加入30μg的适当抗体,4℃摇动免疫沉

免疫共沉淀技术

免疫沉淀可用于定位甲基化或转录因子结合的位置等DNA变化,但可能需要与假抗体进行斗争。尽管ChIP-seq、DIP-seq和相关技术可以提供全基因组测定的相关信息,但它们并非总是有效。染色质免疫沉淀(chromatin immunoprecipitation, ChIP)或DNA免疫沉淀(DNA

免疫共沉淀概述

实验概要本实验以植物叶片为试材介绍了免疫共沉淀的基本方法。主要试剂50uM雌激素,液氮,提取缓冲液TBS(50mM Tris-Cl,0.15M NaCl,pH 7.4,1mM PMSF,5mM Benzamidine),glycine-HCl,TBS,洗脱缓冲液(TBS,0.5mg/mL 3

关于免疫共沉淀的简介

  免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法,是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。免疫共沉淀具有经翻译后修饰的,处于天然状态的优点。  免疫共沉淀(Co -Immunoprecipitation

免疫共沉淀的实验过程

(1)转染后24-48 h 可收获细胞,加入适量细胞裂解缓冲液(含蛋白酶抑制剂),冰上裂解30min, 细胞裂解液于4°C, 最大转速离心30 min后取上清;(2)取少量裂解液以备Western blot分析,剩余裂解液加1μg相应的抗体加入到细胞裂解液,4°C缓慢摇晃孵育过夜;(3)取10μl

免疫共沉淀的原理介绍

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation),简称 Co-IP,其原理是当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来, 如果用蛋白质 X 的抗体 anti-X(通常称为 IP 抗体)将 X 特异地抓住并沉淀下来,那么与 X 在体内结合的蛋白质

基因免疫的技术优势

一种理想的疫苗应具备安全、价廉、性质稳定,最好单次注射即能诱生抗多种病原体的保护性免疫等特点。迄今,还未有一种已应用于人体的疫苗能同时具备上述优点。当前的疫苗可分成两大类,即复制型疫苗和非复制型病毒疫苗。复制型疫苗主要包括减毒疫苗和可表达靶抗原的复制型重组疫苗;而非复制型疫苗则包括灭活疫苗、纯化抗原

免疫共沉淀技术路线

准备工作: 预冷PBS,RIPA Buffer,细胞刮子(用保鲜膜包好后,埋冰下),离心机 1. 用预冷的PBS洗涤细胞两次,最后一次吸干PBS; 2. 加入预冷的RIPA Buffer(1ml/107个细胞、10cm培养皿或150cm2培养瓶,0.5ml/5×106个细胞、6cm培养皿、75cm2

免疫共沉淀​试剂准备

免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation)是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。其原理是:当细胞在非变性条件下被裂解时,完整细胞内存在的许多蛋白质-蛋白质间的相互作用被保留了下来。试剂准备   预