鸟枪克隆法的定义
中文名称鸟枪克隆法英文名称shotgun cloning method定 义用限制性酶或超声波将基因组DNA切成随机性片段,克隆入DNA载体,转化宿主细胞,构建基因组文库,再从基因组文库中筛选得所需要的序列或基因克隆。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)......阅读全文
RNA足迹法的定义
中文名称RNA足迹法英文名称RNA footprinting定 义分析RNA链与其他分子特异结合部位的方法。将标记的RNA与待研究的物质(如某种蛋白质或药物)进行结合反应后,用RNA酶清除未被结合的部分,再用电泳显示RNA链上结合位置的多寡和长度。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二
电泳法的基本定义
电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如纸、醋酸纤维素、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等)中,于电场的作用下,向其对应的电极方向按各自的速度进行泳动,使组分分离成狭窄的区带,用适宜的检测方法记录其电泳区带图谱或计算其含量(%)的方法。
单克隆抗体技术:克隆化(有限稀释法、软琼脂克隆化、...
经过抗体测定的阳性孔,可以扩大培养,进行克隆,以得到单个细胞的后代分泌单克隆抗体。克隆的时间一般说来越早越好。因为在这个时期各种杂交瘤细胞同时旺盛生长,互相争夺营养和空间,而产生指定抗体的细胞有被淹没和淘汰的可能。但克隆时间也不宜太早,太早细胞性状不稳定,数量少也易丢失。 克隆化的阳性杂交瘤细胞,经
关于鸟枪法的流程介绍
1、外源DNA片段的全克隆 根据外源DNA片段的末端性质及大小确定克降载体,鸟枪法一般选择质粒或入-DNA作为克隆载体,受体细胞大多选择大肠杆菌,只有当后续筛选必须采用外源基因表达产物检测法时才选择那些能使外源基因表达的相应受体系统 [1]。 2、目的重组子的筛选 从众多的鸟枪法克隆中快速
单克隆免疫球蛋白血症的定义
意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)也称为原发性单克隆免疫球蛋白血症,其特点是患者无恶性浆细胞病或可引起免疫球蛋白增多的疾病,单克隆免疫球蛋白水平升高有限(血M蛋白小于30g/l),骨髓浆细胞小于10%,尿中少量或无M蛋白,无溶骨性损害,无浆细胞病相关性 贫血、 高钙血症或肾功能不全。无需特
关于鸟枪法的特点介绍
“鸟枪法”优点是速度快,简单易行,成本较低 [4]。但用它来测序,最终排序结果的拼接组装不太容易。中国科学家设计出了一种序列组装软件,能有效克服“鸟枪法”全基因组测序组装过程中的困难 [4]。 在研究中,他们首先在整个水稻基因组上生成许多已知长度的DNA(脱氧核糖核酸)切片,然后使它们按DNA
鸟枪法测序的方法特点
中文名称鸟枪法测序英文名称shotgun sequencing定 义一种分析大片段基因组DNA序列的策略。系将大片段DNA(如噬菌体文库中约40 kb长或细菌人工染色体所含350 kb长的DNA插入片段)随机切成许多1~1.5 kb的小片段,分别对其测序,然后借助序列重叠区域拼接成全段序列。应用学
DNA测序鸟枪法的介绍
“鸟枪法”是一种由生物基因组提取目的基因的方法。首先利用物理方法(如剪切力、超声波等)或酶化学方法(如限制性内切核酸酶)将生物细胞染色体DNA切割成为基因水平的许多片段,继而将这些片段与适当的载体结合,将重组DNA转入受体菌扩增,获得无性繁殖的基因文库,再结合筛选方法,从众多的转化子菌株中选出含
单克隆抗体的克隆化方法软琼脂平板法介绍
软琼脂克隆化借助撒在软琼脂上单个细胞定位生长,而达到克隆化,具体操作如下:1.配2.5%的琼脂糖30ml,水浴溶化后,移入45℃水浴中。2.将117ml完全DMEM液和3ml10倍浓度的DMEM液混合,置45℃水浴预热。3.将琼脂糖与DMEM液混合,即为含0.5%琼脂糖的完全DMEM液,并加75×1
小量细菌克隆的杂交法筛选实验
实验方法原理 主琼脂板上和覆盖于另一块琼脂板表面的硝酸纤维滤膜或尼龙膜上的细菌克隆可以被定位, 经过一段时间,已经在滤膜上生长的克隆可以被原位裂解以备杂交之用。同时,主琼脂板可置于 4℃ 保存,直到筛选的结果出来为止。实验材料 E.coli试剂、试剂盒 LB 或 SOB 琼脂板仪器、耗材 硝酸纤维素
有限稀释法克隆抗体的过程介绍
1.材料(1)微量培养盘,盘内各孔于克隆化前一天培养小鼠腹腔细胞(即饲养细胞)每孔2万~4万。(2)HT培养基2.操作方法(1)取出抗体阳性孔细胞,用HT培养液制成细胞悬液。并取样进行台盼兰染色,计数。(2)用HT培养液将细胞稀释成200个/ml、40个/ml、20个/ml和的悬液。(3)用吸管将细
小量细菌克隆的杂交法筛选实验
实验方法原理 主琼脂板上和覆盖于另一块琼脂板表面的硝酸纤维滤膜或尼龙膜上的细菌克隆可以被定位, 经过一段时间,已经在滤膜上生长的克隆可以被原位裂解以备杂交之用。同时,主琼脂板可置于 4℃ 保存,直到筛选的结果出来为止。
热发声法的定义
中文名称热传声法英文名称thermoacoustimetry定 义在程序控温下,测量试样的声波特性与温度关系的方法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),热学式分析仪器-热学式分析仪器分析原理(三级学科)
差热滴定[法]的定义
中文名称差热滴定[法]英文名称differential thermometric titration定 义同时向空白和盛有被测试样的两个相同的滴定池内加入滴定剂,测量两者的温度差与滴定剂容积曲线的方法。应用学科机械工程(一级学科),分析仪器(二级学科),热学式分析仪器-热学式分析仪器分析原理(三级
直接电位法的定义
直接电位法是利用专用电极将被测离子的活度转化为电极电位后加以测定,如用玻璃电极测定溶液中的氢离子活度,用氟离子选择性电极测定溶液中的氟离子活度(见离子选择性电极)。
逆流色谱法的定义
逆流色谱法法(CCC)原理是基于样品在两种互不混溶的溶剂之间的分配作用,溶质中各组分在通过两溶剂相过程中因分配系数不同而得以分离。是一种不用固态支撑体的全液体色谱方法 [1]
等位[基因]共享法的定义
中文名称等位[基因]共享法英文名称allele-sharing method定 义鉴别受累者亲属获得相同等位基因或染色体区段的概率是否大于随机抽样个体的预期概率的一种遗传学研究方法。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)
比色分析法的定义
比色分析法是利用被测溶液本身的颜色,或加入试剂后呈现的颜色,用眼睛(或目测比色计)观察、比较溶液颜色深度,或用光电比色计进行测量以确定溶液中被测物质浓度的方法。比色法包括目视比色法和光电比色法。
伏安法的定义及介绍
是基于研究电解过程中电流和电位的变化为基础的分析方法。极谱法是以滴汞电极为指示电极的伏安法;溶出法是在某一恒定电压下进行电解,使被测物在电极上富集,再用适当的方法使富集物溶解,根据溶出时的电流电位或者电流时间曲线进行分析;电流滴定法是在固定电压下根据滴定过程中的电流的变化来确定滴定终点的分析方法。
离子色谱法的定义
离子色谱法采用柱色谱技术的一种高效液相色谱法,样品展开方式采用洗脱法。根据不同的分离方式,离子色谱可以分为高效离子色谱 、离子排斥色谱和流动相离子色谱3类。高效离子色谱法使用低容量的离子交换树脂,分离机理主要是离子交换。离子排斥色谱法用高容量的树脂,分离机理主要是利用离子排斥原理。流动相离子色谱用不
四唑氮法的定义
中文名称四唑氮法英文名称tetrazolium method定 义以四唑盐作为氧化酶活性的定性标志,在组织切片中显示酶活性定位的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
核酸序列扩增法的定义
中文名称核酸序列扩增法英文名称nucleic acid sequence-based amplification;NASBA定 义一种在等温系统中扩增核酸的方法。即利用T7RNA聚合酶仅在结合核酸上相应位点时才能起作用的特点,将结合位点序列与靶序列相连,然后产生靶分子的RNA拷贝,形成反转录和RN
平衡透析法的定义
中文名称平衡透析法英文名称equilibrium dialysis定 义用于测定溶液中小分子或离子与大分子间结合的技术。将大分子溶液和小分子溶液分别置于只允许小分子透过而不允许大分子透过的半透膜两侧,当透析达到平衡时,测定膜两侧溶液中小分子的浓度,即可分析得大分子与小分子结合的数据。应用学科生物化
关于鸟枪法的内容简介
鸟枪法是直接从生物细胞基因组中获取目的基因最常用的方法。它用限制酶将供体细胞中的DNA切成许多片段,将这些片段分别载入运载体,然后通过运载体分别转入不同的受体细胞,使供体细胞提供的DNA(即外源DNA)的所有片段分别在各个受体细胞中大量复制,从中找出含有目的基因的细胞,再用一定的方法把带有目的基
单克隆抗体的克隆化方法荧光激活分离法介绍
用一种荧光激活细胞分类器(FluoresceinActivafedCellSorter,FACS)。其基本原理是:将细胞经荧光抗体染色后,经喷嘴形成单个细胞的线形液滴,在莱塞光激发下,荧光素发射荧光,此信号由光电倍增管接收,再结合细胞形态大小产生光散射信号,经电脑处理,产生信号并与预定的信号对比,根
单克隆免疫球蛋白血症的分类及定义
分类 单克隆免疫球蛋白血症可分为①原发性单克隆免疫球蛋白血症;②继发性单克隆免疫球蛋白血症。 定义 意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)也称为原发性单克隆免疫球蛋白血症,其特点是患者无恶性浆细胞病或可引起免疫球蛋白增多的疾病,单克隆免疫球蛋白水平升高有限(血M蛋白小于30g/l),骨髓
关于单克隆免疫球蛋白血症的定义介绍
意义未明单克隆免疫球蛋白血症(MGUS)也称为原发性单克隆免疫球蛋白血症,其特点是患者无恶性浆细胞病或可引起免疫球蛋白增多的疾病,单克隆免疫球蛋白水平升高有限(血M蛋白小于30g/l),骨髓浆细胞小于10%,尿中少量或无M蛋白,无溶骨性损害,无浆细胞病相关性贫血、高钙血症或肾功能不全。无需特殊治
中等量细胞克隆的杂交法筛选实验
实验方法原理 这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中 采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下
小量细菌克隆的杂交法筛选实验步骤
小量细菌克隆的杂交法筛选实验步骤,一、材料1. 培养基含有适当抗菌素的 LB 或 SOB 琼脂板。含有氯霉素的 LB 或 SOB 琼脂板。2. 专用设备(1) 硝酸纤维素膜(Millipore HAWP,或类似产品)或尼龙膜。滤膜不必是无去污剂污染或无菌。(2) 注射器(3cc ),针头(18 号)
中等量细胞克隆的杂交法筛选实验
实验方法原理 这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中 采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下,用更大的滤膜很难正好覆盖于 150 mm 板。实验材料