基因测定方法假连锁法

相互易位杂合体只有在减数分裂过程中通过交互离开所形成的平衡配子才能够存活,并使非同源染色体上的基因显示假连锁现象(见染色体畸变)。所以把带有属于已知染色体的标记基因的相互易位品系作为测交品系和一个突变型品系杂交,如果发现这一突变基因经常和标记基因的野生型等位基因相连锁,就可以判定突变基因一定在相互易位的两个染色体中的一个上面。例如在粗糙脉孢菌中有一个品系,它的第 Ⅰ染色体上带有白色分生孢子基因(albino,al),第Ⅳ 染色体上带有温度敏感的蔓延菌落基因(colonial temperature sensitive,cot),第Ⅵ染色体上带有黄色分生孢子基因(yellow conidia,ylo),同时它还是染色体Ⅰ-Ⅱ、Ⅳ-Ⅴ和Ⅲ-Ⅵ相互易位品系。用它作为测试菌株和任何一个突变型菌株进行杂交,就可以通过一次杂交大致上测得这一突变型所属的染色体。例如具有这一突变性状的杂交子代菌株总是菌丝蔓延的,就知道它的突变基因属于染色体Ⅳ或......阅读全文

Mol-Cell.:-基因突变的“连锁”反应

  约翰霍普金斯大学科学家发现在酵母中删除任何一个基因都会对基因组产生压力,造成其他基因的突变。研究人员称该发现对人类遗传学有启示作用,因为DNA序列在物种之间具有保守性,该研究对癌症和其他领域的遗传分析有重要意义。相关报道发表在近期的Molecular Cell杂志上。   该文章的通讯作者

基因测定的方法四分体分析法

四分体分析法由于子囊菌减数分裂所形成的四分体包被在一个子囊里,所以判断两个基因是否连锁,只需计算出各种类型的四分体数(即子囊数)。如果其中一个基因所属的连锁群已经知道,便很容易测定另一基因是否属于同一连锁群。四分体有三种,即亲代二型(PD)、非亲代二型(NPD)和四型(T)。如果有关的两个基因是连锁

基因定位方法介绍同线法

如果一个细胞得到或丢失一条染色体则将同时得到或失去这条染色体上的全部基因。如果其中某些基因是已知的,而另一连锁关系未知的基因恰恰和上述基因同时得到或失去,便可以判定后一基因和前一基因属于同一连锁群(表2)。这一原理曾广泛应用于人的基因定位。仙台病毒或聚乙二醇能促使人的体细胞和啮齿类动物的体细胞相融合

脂肪的测定方法罗兹法

1、原理:(1)在牛奶中加入氨水(浓氨水)破坏牛奶中蛋白质的胶体性质,使乳中酪蛋白钙盐生成可溶性的氨盐。(2)加入95%乙醇使乳中脂类与非脂类分离。(3)加入乙醚抽取脂类。(4)加入石油醚除去乙醚中包容的水分。(5)到出醚层,挥发除去乙醚、石油醚;剩下的脂肪即为牛奶中的脂肪。2、检测步骤:(1)用电

花叶假连翘的繁殖方法

  花叶假连翘主要采取扦插繁殖和嫁接繁殖,前者用一二年生枝条扦插效果好,热带地区全年都可扦插,枝条插后约20天即可生根,生根率高。嫁接以假连翘为砧木,以枝接为主。嫁接后可用塑料袋套上,避免日晒雨淋以增加成活率。

HLA基因分型方法:RFLP法

RFLP法1)常规制备DNA盐析法1.用淋巴细胞分离液从抗凝血中分离出白细胞。2.每3ml细胞悬液加10ml红细胞裂解液溶解红细胞两次,再加2ml白细胞裂解液溶解白细胞。3.加50μl 10% SDS和70μl蛋白酶K消化蛋白质,37℃过夜或55℃ 3h。4.加0.25体积饱和醋酸钠溶液,剧烈摇动1

溶出度测定法第二法(浆法)测定方法

测定方法:测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部(25±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过±1%。待溶出介质温度恒定在(37±0.5)℃,取供试品6片(袋、粒),分别投入6个溶出杯内。当品种项下规定需要使用沉降篮或其他

溶出度测定法第一法(篮法)测定方法

测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使转篮底部距溶出杯的内底部(25±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过±1%,待溶出介质温度恒定在(37±0.5)℃后,取供试品6片(粒、袋),分别投入6个干燥的转篮内,将转篮降入溶出杯中,注意供试品表面上不

酶免法检测HBeAg假阳性原因分析

我们在应用酶免法检测乙型肝炎病毒血清学标志物时,发现有时会出现单项HBeAg(+)或HBeAg(+)、抗-HBs(+)等罕见模式。为慎重起见再将标本离心后复检 HBeAg, 结果为阴性。为此我们特做如下实验。取10份 HBeAg 阴性的献血员的不抗凝血液,每份分两管,一管静置0.5h、1h、2h;另

蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法(Lowry法)

(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产

蛋白测定方法之Folin—酚试剂法(Lowry法)

(一)实验原理这种蛋白质测定法是最灵敏的方法之一。过去此法是应用最广泛的一种方法,由于其试剂乙的配制较为困难(现在已可以订购),近年来逐渐被考马斯亮兰法所取代。此法的显色原理与双缩脲方法是相同的,只是加入了第二种试剂,即Folin—酚试剂,以增加显色量,从而提高了检测蛋白质的灵敏度。这两种显色反应产

蛋白测定方法介绍Folin—酚试剂法(Lowry法)操作方法

1.标准曲线的测定:取16支大试管,1支作空白,3支留作未知样品,其余试管分成两组,分别加入0,0.1,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0毫升标准蛋白质溶液(浓度为250mg/ml)。用水补足到1.0毫升,然后每支试管加入5毫升试剂甲,在旋涡混合器上迅速混合,于室温(20~25℃)放置10分钟。

氯法齐明的含量测定方法

含量测定取本品约0.3g,精密称定,加冰醋酸25ml溶解后,照电位滴定法(通则0701),用高氯酸滴定液(0.1mol/L)滴定,并将滴定的结果用空白试验校正。每1ml高氯酸滴定液(0.1mo/L)相当于47.34mg的C2rH2Cl2N4。

酸值的测定方法介绍试纸法

该法的原理是利用食用油酸败所产生的游离脂肪酸与试纸上的药剂发生显色反应,然后根据试纸的颜色变化情况与标准的比色块比较,从而确定食用油样品酸败的程度 。杨漓等开发了一种试纸比色快速法测定食用油酸价,该法利用食用油脂酸败所产生的游离脂肪酸与试纸中的pH试剂发生显色反应,试纸的颜色变化反映了食用油的酸价变

叶片水势测定方法小叶流法

Ⅰ、小液流法一、目的通过实验,掌握用小液流法测定植物组织水势的原理和方法。二、原理水势代表水的能量水平,水总是从水势高处流向低处。水进入植物体内并分布到各组织器官中的快慢或难易由水势差来决定,水势越高,植物组织的吸水能力越差,而供给水能力越强。当植物组织与一系列浓度递增的溶液接触后,如果植物组织水势

氯气测定方法介绍碘量法

一、原理氯被氢氧化钠溶液吸收,生成次氯酸钠,用盐酸酸化,释放出游离氯。反应式如下: 游离氯再氧化碘化钾生成碘,用硫代硫酸钠标准溶液滴定,计算出氯的量。测定范围:35mg/m3以上。二、仪器①多孔玻板吸收瓶:125ml。②碘量瓶:250ml。③棕色酸式滴定管:10或25ml。④烟气采样器。三、试剂①吸

脂肪的测定方法盖勃法

吸收10ml硫酸(90%),注入盖勃氏乳脂汁内,用1lml的特别牛乳吸管吸取牛乳样品至刻度并注入乳脂汁内,再加入1ml异戊醇,塞紧橡皮塞,充分摇动,使牛乳凝块溶解。将乳脂计放入65~70℃的水浴锅中5min,再以1000r/min旋转5min后,放置65~70℃水浴锅中;5min后取出擦干,按脂肪柱

连锁图谱的定义

又称连锁图谱(linkage map),它是以具有遗传多态性(在一个遗传位点上具有一个以上的等位基因,在群体中的出现频率皆高于1%)的遗传标记为“路标”,以遗传学距离(在减数分裂事件中两个位点之间进行交换、重组的百分率,1%的重组率称为1cM)为图距的基因组图。遗传图谱的建立为基因识别和完成基因定位

石油产品残炭测定仪测定方法微量法

石油产品残炭测定仪测定方法微量法   石油产品的残炭值是指将油品放入残炭测定仪中,在不通入空气的条件下,加热至特定温度条件下,使其蒸发及热解后,排出燃烧的气体,所剩余的焦黑色残余物占油品的质量百分数。   残炭值可以间接表明基础油的精制程度。深度精制的基础油,重芳香烃和胶质的含量较低,残炭值也低。人

基因定位方法介绍单元化定位法

在构窠曲霉这一类真菌的准性生殖过程中,杂合二倍体细胞在有丝分裂时常随机地丢失它的染色体。染色体在多次有丝分裂过程中逐条丢失而使二倍体细胞终于转变为单倍体细胞的过程称为单元化。如果一对染色体中带有显性的野生型基因的染色体丢失了,那么同源染色体上隐性基因的性状便得以表现。此外,通过体细胞交换也可以从杂合

基因定位方法介绍直接观察法

易位(见染色体畸变)使染色体上的基因改变连锁关系,所以易位可以用来进行基因定位。如果易位所涉及的染色体是可以被识别的,那就更有利于定位工作。如果在遗传学分析中发现某两个连锁群的连锁关系都发生了改变,同时在显微镜下又可以辨认出有两个染色体发生了相互易位,那么就可以知道两个连锁群和两个染色体的对应关系。

基因转移的物理方法转移法介绍

  包括显微镜注射法、电脉冲介导法。显微注射法是应用特别的玻璃显微注射器在显微镜下把重组DNA导入靶细胞;电脉冲介导法又称电穿孔法,是指在高压电脉冲的作用下,使细胞膜上出现瞬间微小的孔洞,从而介导不同细胞之间的原生质膜发生融合,使外源DNA通过细膜上出现的瞬间小孔而进入细胞。

寻找差异表达基因方法——简化SSH法

 无论是从一个胚胎细胞分化为不同的组织器官,或者是从正常的组织突变为肿瘤组织,都可能涉及在同一基因组背景下不同基因的差异性表达。寻找差异表达的基因就有可能揭示细胞分化的机制或者肿瘤的成因,因而也就成为一项热门的技术。    寻找差异表达的基因有不少方法,抑制消减杂交(SSH)是比较有效的一种方法

elisa-法检测HIV为什么总是出现假阳性

造成ELISA检测HIV假阳性的原因主要有3个:1.试剂影响因素,可能与试剂盒包被抗原组合不同有关。目前第3代双抗原夹心法试剂的质量优于第2代间接法试剂,具有更好的敏感性和特异性,尤其对感染早期的弱阳性标本,主要包被的抗原的种类及比例,纯度有关系。2.患者自身情况的影响, 患者体内特有的内源件物质可

全基因组连锁分析和高通量测序结合寻找疾病相关基因

  在寻找疾病相关基因的研究中,使用基因芯片对家系进行连锁分析,将基因定位于少数几个区域中,接着进行外显子组测序或全基因组重测序寻找候选区域中的遗传变异,是一个准确高效的研究方案。本文列举了上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科李明老师团队的两项研究,均使用了上述方法成功找到了疾病相关的基因变异位点。

全基因组连锁分析和高通量测序结合寻找疾病相关基因

  在寻找疾病相关基因的研究中,使用基因芯片对家系进行连锁分析,将基因定位于少数几个区域中,接着进行外显子组测序或全基因组重测序寻找候选区域中的遗传变异,是一个准确高效的研究方案。本文列举了上海交通大学医学院附属新华医院皮肤科李明老师团队的两项研究,均使用了上述方法成功找到了疾病相关的基因变异位点。

溶出度测定法第三法(小杯法)测定方法

测定方法:测定前,应对仪器装置进行必要的调试,使桨叶底部距溶出杯的内底部(15±2)mm。分别量取经脱气处理的溶出介质,置各溶出杯内,实际量取的体积与规定体积的偏差应不超过1%(当品种项下规定需要使用沉降装置时,可将片剂或胶囊剂先装入规定的沉降装置内)。以下操作同第二法。取样位置应在桨叶顶端至液面的

使用血液进行基因检测如何减少假阴性

基因检测-入门攻略什么是基因检测?肿瘤基因检测是通过特定检测设备对被检测者细胞中的DNA分子信息作检测,分析它所含有的各种基因突变情况,从而能针对性地为每位患者“量身定制”一套最合适的治疗方案。它是肿瘤精准医疗的基础。选择什么样本最合适?做基因检测,是检测肿瘤细胞的突变,因此需要获取肿瘤细胞。临床上

基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因

出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个

探讨两种方法检测HBsAg假阳性和假阴性的影响因素

目前HBsAg的检测方法很多,但是在临床实验室检测HBsAg的方法最常用的主要是金标法和酶联免疫吸附试验(ELISA)。常常会有患者及其他工作人员反映HBsAg检验结果与其他医疗单位不一致,为此常会发生医疗纠纷。因此,提高HBsAg检测的准确性,避免假阳性和假阴性所造成的不良社会影响,是我们临床检验