同聚物加尾法的方法核心

这种方法的核心是利用末端转移酶的功能,将核苷酸转移到双链DNA分子的突出或隐蔽的3'-OH上。以Mg作为辅助因子,该酶可以在突出的3'-OH端逐个添加单核苷酸,如果用Co作辅助因子则可在隐蔽的或平末端的3'-OH端逐个添加单个核苷酸。......阅读全文

同聚物加尾法的方法核心

这种方法的核心是利用末端转移酶的功能,将核苷酸转移到双链DNA分子的突出或隐蔽的3'-OH上。以Mg作为辅助因子,该酶可以在突出的3'-OH端逐个添加单核苷酸,如果用Co作辅助因子则可在隐蔽的或平末端的3'-OH端逐个添加单个核苷酸。

同聚物加尾法的方法优缺点

同聚物加尾法优点: 1)首先不易自身环化. 2)因为载体和外源片段的末端是互补的黏性末端,所以连接效率较高.3)用任何一种方法制备的DNA都可以用这种方法进行连接.缺点:(1)方法繁琐;(2)外源片段难以回收。由于添加了许多同聚物的尾巴,可能会影响外源基因的表达.重组连接后往往会产生某种限制性内切核

同聚物加尾法的概念

所谓同聚物加尾法就是利用末端转移酶在载体及外源双链DNA的3’端各加上一段寡聚核苷酸,制成人工黏性末端,外源DNA和载体DNA分子要分别加上不同的寡聚核苷酸,如dA(dG)和dT(dC),然后在DNA连接酶的作用下连接成为重组的DNA。

DNA连接酶同聚物加尾法连接法的介绍

  这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子单链延伸末端的3′-OH基团上。由核酸外切酶处理过的DNA,以及dATP和末端脱氧核苷酸转移酶组成的反应混

体外连接DNA片段的具体方式介绍

平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子

体外连接DNA片段的具体方式介绍

平末端DNA片段的连接常用的平末端DNA片段连接法,主要有同聚物加尾法、衔接物连接法及接头连接法。同聚物加尾法这种方法的核心部分是,利用末端脱氧核苷酸转移酶转移核苷酸的特殊功能。末端脱氧核苷酸转移酶是从动物组织中分离出来的一种异常的DNA聚合酶,它能够将核苷酸(通过脱氧核苷三磷酸前体)加到DNA分子

DNA连接酶的连接方法有哪几种?

第一种方法是,用DNA连接酶连接具有互补粘性末端的DNA片段;第二种方法是,用T4DNA连接酶直接将平末端的DNA片段连接起来,或是用末端脱氧核苷酸转移酶给具平末端的DNA片段加上poly(dA)-poly(dT)尾巴之后,再用DNA连接酶将它们连接起来;第三种方法是,先在DNA片段末端加上化学合成

羟磷灰石层析法纯化核心组蛋白实验

实验方法原理 实验材料 精核试剂、试剂盒 HAP 缓冲液BioGel HTP 粉(Bio-Rad)Bio-Rad 蛋白定量系统(可选)仪器、耗材 2 cm×15 cm 柱及附件 Centriprep-10 浓缩器(Amicon; 可选)实验步骤 1. 用 25 ml HAP 重悬约 2 ml 精核(

羟磷灰石层析法纯化核心组蛋白实验

实验材料精核试剂、试剂盒HAP 缓冲液BioGel HTP 粉(Bio-Rad)Bio-Rad 蛋白定量系统(可选)仪器、耗材2 cm×15 cm 柱及附件 Centriprep-10 浓缩器(Amicon; 可选)实验步骤1. 用 25 ml HAP 重悬约 2 ml 精核(约含有 6 mg DN

化学发光法检测乙肝核心抗体阳性率相较酶联免疫法

前言:    HBV感染呈世界性流行,但不同地区HBV感染的流行强度差异很大。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染HBV,其中2.4亿人为慢性HBV感染者,每年约有65万人死于HBV感染所致的肝功能衰竭、肝硬化和肝细胞癌(HCC)。全球肝硬化和HCC患者中,由HBV感染引起的比例分别为30%和4

关于核心抗体(抗HBc)阳性的缓解方法介绍

  核心抗体(抗HBc)阳性患者,可多摄入一些高纤维素以及新鲜的蔬菜和水果,营养均衡,包括蛋白质、糖、脂肪、维生素、微量元素和膳食纤维等必需的营养素,荤素搭配,食物品种多元化,充分发挥食物间营养物质的互补作用,对预防此病也很有帮助。尽量少吃辛辣、刺激的食物要少食加工食品,这些食品都含有防腐剂和添加剂

关于同聚寡核苷酸末端连接的基本介绍

  同聚寡核苷酸末端连接(也叫同聚物加尾连接、同聚末端连接),是在脱氧核苷酸转移酶(terminal transferase,也称DNA 转移酶、末端转移酶) 的作用下可以在DNA 的3'; 一羧基端合成低聚多核苷酸(添加同聚物造成延伸部分)。如果把所需要的DNA 片段接上低聚腺嘌呤核苷酸(d

核心序列的概念

中文名称核心序列英文名称core sequence定  义重复序列共有的核苷酸序列。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

钾的核心功效

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分子蒸馏的核心

   分子蒸馏已经成为国际上高度重视的高科技物理分离技术,它在原有技术的基础上有了很大的突破。从整个技术的实现过程可以看出,分子蒸馏的核心是分子蒸馏设备。    在技术方面,分子蒸馏突破了传统蒸馏依靠沸点差分离的原理,而是依靠不同物质分子运动平均自由程的差别来实现物质的分离,采用这种分离原理

核心DNA的定义

中文名称核心DNA英文名称core DNA定  义缠绕在核小体核心颗粒上的DNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

超纯水机核心耗材维护和膜的清理方法

超纯水机核心耗材维护  精密滤芯又称过滤滤芯,分线绕滤芯和PP熔喷滤芯,主要过滤原水中的泥沙等大的颗粒物,其过滤精度有5微米、1微米等。新的滤芯是白色,如果时间长了表面会淤积泥沙等,呈现褐色,这就表示该滤芯不能用了,用自来水冲洗掉表面淤泥后,可以勉强继续使用1-2周,但不能长期使用。滤芯放在滤瓶里面

乙肝核心抗体的简介

  乙肝核心抗体,也叫抗-HBc,英文缩写是HBcAb。包括乙肝核心抗体IgM和乙肝核心抗体IgG,常用竞争法检测。HBV感染后,在多数人血清中能检出此抗体,是一种敏感的血清学标志。  也是乙型肝炎急性感染的早期标志,在血清中存在的时间很长,有些人滴度很高。在HBsAg和抗-HBs阴性时,能从血 清

乙肝核心抗体的类别

  抗—HBc可分为三型:抗—HBcIgM、抗—HBcIgA、抗—HBcIgG,在HBV感染中这几个型依次出现,也会依次消失,只有IgG这一型可长期存在。在化验室报告的化验单中,如果只标明“抗—HBc”,没有分型,那么它应当是这三型的总和,不过大部分医院化验室报告的都分为IgM和IgG二型。  抗—

乙肝核心抗体的简介

  乙肝核心抗体,也叫抗-HBc,英文缩写是HBcAb。包括乙肝核心抗体IgM和乙肝核心抗体IgG,常用竞争法检测。HBV感染后,在多数人血清中能检出此抗体,是一种敏感的血清学标志。  也是乙型肝炎急性感染的早期标志,在血清中存在的时间很长,有些人滴度很高。在HBsAg和抗-HBs阴性时,能从血 清

恒电位仪的核心

  恒电位仪的核心是比较放大器,由深度负反馈的差动放大器构成,现在一般采用性能优良的集成运算放大器担任,其输入是控制和参比(取样)电路,输出到跟随放大、控制移相、振荡等电路生成触发脉冲,极化电源由晶闸管整流电路构成,通过改变导通角实现调节输出。 [1]

DBS技术的核心原料

DBS(Dry blood spot)技术是一项性价比较高的采集,储存和运输婴儿/孩童和成人全周血样品的技术,尤其是在资源相对贫乏无法进行冷链运输的区域,只需将少量的足跟血(婴儿),指尖血(儿童/成人)或者加了抗凝的全血滴在903卡后干燥封存运输即可。最早进行DBS采样主要用于血糖测定,而最早将这项

MTT法的配制方法

通常,此法中的MTT浓度为5mg/ml。因此,可以称取MTT 0.5克,溶于100 ml的磷酸缓冲液(PBS)或无酚红的培养基中,用0.22μm滤膜过滤以除去溶液里的细菌,放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的过程中,容器最好用铝箔纸包住。

临床化学检查方法介绍乙型肝炎核心抗原介绍

乙型肝炎核心抗原介绍:  乙型肝炎核心抗原(hepatitis B core antigen,HBcAg)是单一多肽,分子量18848u。HBcAg在HBV感染中占有重要地位,他能反映血清中:Dane颗粒的存在及肝内HBV的复制,并可与其他的HBV血清学标志物起互相配合和互相补充的作用。只是由于其抗

临床化学检查方法介绍乙型肝炎核心抗体介绍

乙型肝炎核心抗体介绍:  HBcAb包括IgM和IgG抗体,早期以IgM为主,一般持续6-18周,一般作为急性HBV感染的指标;急性感染恢复期或慢性持续感染时以IgG为主,可持续存在数年。  正常为阴性。  Cutoff值计算原倍血清COV=阴性对照OD值×0.3。  1∶30稀释血清(血浆)COV

什么是基因的核心序列?

中文名称核心序列英文名称core sequence定  义重复序列共有的核苷酸序列。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)

核小体核心颗粒的定义

中文名称核小体核心颗粒英文名称nucleosome core particle定  义由长度为146 bp的DNA区段与各两分子的H3/H4/H2A/H2B组蛋白八聚体组成。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)

乙肝核心抗体的生理意义

  乙肝核心抗体(HBcAb)是乙肝病毒核心抗原的对应抗体,它不是保护性抗体,它的存在反而是受到乙肝病毒侵害的指标之一。它包括IgM、IgA、IgG三种类型。IgM型是判定急性乙肝的重要指标,是机体感染乙肝病毒后在血液中最早出现的特异性抗体,一般持续3-6个月。假如HBcAb-IgM持续高滴度,表明

乙肝核心抗体的抗体类别

  抗—HBc可分为三型:抗—HBcIgM、抗—HBcIgA、抗—HBcIgG,在HBV感染中这几个型依次出现,也会依次消失,只有IgG这一型可长期存在。在化验室报告的化验单中,如果只标明“抗—HBc”,没有分型,那么它应当是这三型的总和,不过大部分医院化验室报告的都分为IgM和IgG二型。  抗—

核心酶的基本信息

核心酶(core enzyme):大肠杆菌的RNA聚合酶全酶由6个亚基组成(2αββ’ωσ)(即两个α亚基、β亚基、β′亚基、ω亚基和σ亚基),还含有两个锌原子。而无σ亚基的酶(2αββ’ω)叫核心酶。亦指DNA聚合酶Ⅲ中由α、ε、θ三种亚基组成全酶的核心酶(core enzyme)。