细胞培养的具体步骤
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。二、细胞传代细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10ml PBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放入细胞培养箱3min。加人1ml DMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10ml PBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,弃上清液。再加入10ml PBS(经高压灭菌,保存于40C),吹匀,吸取10微升进行计数,按照1×105/盘接种,在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。三、细胞冻存细胞密度达到80%~90%时,去培养基,10ml PBS......阅读全文
northern,southern,western杂交的具体步骤
所用于分析的对象不同。 Northern杂交用于分析RNA; Southern杂交用于分析DNA; Western杂交用于分析蛋白质。大致过程如下: (1) 酶切DNA, 凝胶电泳分离各酶
细胞克隆实验操作的具体步骤
一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
细胞检测的具体步骤有哪些?
细胞检测的具体步骤会因检测的目的和方法不同而有所差异。以下是一些常见细胞检测方法的一般步骤示例:细胞形态观察:样本制备:获取细胞样本,如通过组织解离、细胞培养等方式。涂片或制片:将细胞均匀地涂在载玻片上或制成切片。固定:使用化学试剂固定细胞,以保持其形态。染色:根据需要选择合适的染色剂,如苏木精 -
土壤取样的具体步骤和方法
土壤取样的具体方法步骤: 1.布点:按照土壤类型和作物种植品种分布,按土壤肥力高、中、低分别采样。一般150-300亩(不同地区可根据情况确定)采取一个耕层混合样,每个示范村的主要农作土种至少采集3-4个混合农化土样。采样点以锯齿型或蛇型分布,要做到尽量均匀和随机。应用土壤底图确定采样地块和采样点,
免疫组化的具体步骤
免疫组化操作步骤一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
金相分析实验的具体步骤
金相分析实验的具体步骤分为五步:一、试样制备:1.1 试样截取的方向,垂直于径向,长度不超过8mm。1.2 试样可用手锯或切割机床等切取,不论用何种方法取样均应注意试样的温度条件,必要时用水冷却,以避免正式试样因过热而改变其组织。二、试样的研磨2.1 准备好的试样,先在粗砂轮上磨平,候磨痕均匀一致后
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
免疫组化的具体步骤
一 免疫组化( LP 法)操作步骤 :1. 切片常规脱蜡至水。如需抗原修复,可在此步后进行2. 缓冲液洗 3min/2 次。3. 为了降低内源性过氧化物酶造成的非特异性背景染色 , 将切片放在 Hydrogen Peroxide Block 中孵育 10-15 分钟。4. 缓冲液洗 5min/2 次
金相分析实验的具体步骤
金相分析实验的具体步骤分为五步:一、试样制备:1.1 试样截取的方向,垂直于径向,长度不超过8mm。1.2 试样可用手锯或切割机床等切取,不论用何种方法取样均应注意试样的温度条件,必要时用水冷却,以避免正式试样因过热而改变其组织。二、试样的研磨2.1 准备好的试样,先在粗砂轮上磨平,候磨痕均匀一致后
凯氏定氮的具体步骤
1、消化:精密称取大豆样品1.0g左右,放入干燥的250 ml消化管中,加入0.4g CuSO4 7g K2SO4 10ml H2SO4先200'C炭化,待泡沫停止后提高温度到450'C,加热至液体沸腾,待瓶内液体呈蓝绿色透明后,再继续加热0.5h。冷却后加入20ml水,移入100m
金相分析实验的具体步骤
金相分析实验的具体步骤分为五步:一、试样制备:1.1 试样截取的方向,垂直于径向,长度不超过8mm。1.2 试样可用手锯或切割机床等切取,不论用何种方法取样均应注意试样的温度条件,必要时用水冷却,以避免正式试样因过热而改变其组织。二、试样的研磨2.1 准备好的试样,先在粗砂轮上磨平,候磨痕均匀一致后
RTPCR检测方法的具体步骤
RT-PCR检测方法的具体步骤如下:(一)RNA提取1、根据标本数量分装RLT液:从Kit中取出RLT液,用1.5mL离心管分装,每管500μL(在体系配制区操作)。2、在生物安全柜内将采样液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培养物(鸡胚尿囊液或细胞培养液)取100μL加入RLT液管中,充分混匀。 3
RTPCR检测方法的具体步骤
RT-PCR检测方法的具体步骤如下:(一)RNA提取1、根据标本数量分装RLT液:从Kit中取出RLT液,用1.5mL离心管分装,每管500μL(在体系配制区操作)。2、在生物安全柜内将采样液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培养物(鸡胚尿囊液或细胞培养液)取100μL加入RLT液管中,充分混匀。 3
包被ELISA试剂盒的具体步骤
包被:用0.05M PH9.6碳酸盐包被缓冲液将抗体稀释至蛋白质含量为1~10μg/ml。在每个聚苯乙烯板的反应孔中加0.1ml,4℃过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次,每次3分钟。包被缓冲液(PH9.6 0.05M碳酸盐缓冲液):Na?CO3 1.59克NaHCO3 2.93克加
RTPCR检测方法的具体步骤
RT-PCR检测方法的具体步骤如下:(一)RNA提取1、根据标本数量分装RLT液:从Kit中取出RLT液,用1.5mL离心管分装,每管500μL(在体系配制区操作)。2、在生物安全柜内将采样液(鼻拭子、咽拭子、胸水等)或病毒培养物(鸡胚尿囊液或细胞培养液)取100μL加入RLT液管中,充分混匀。 3
光泽度仪测试的具体步骤
光泽度仪(英文:Gloss meter)又称作:光泽机、光泽度测量仪、光泽度测定仪、光泽度测试仪、光泽度检测仪、光泽度试验仪。是用来测量物体表面的光泽程度的仪器。高精度光泽度仪按照角度分为高光泽、中光泽和低光泽三种类型。 1、用擦镜纸将随机附带的标准板擦干净。将仪器的测量头置于标准板框内。2、
细胞培养技术的细胞培养方式
高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不
免疫琼脂双向扩散实验具体步骤
琼脂扩散( agar diffusion )为可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中所呈现的一种沉淀反应。当对应的抗原、抗体在半固体琼脂终相遇,且二者比例适当时,便出现可见的白色沉淀线,这组沉淀线是一组抗原、抗体的特异性复合物。当琼脂中有多组不同的抗原、抗体存在时,便各自依其扩散速度的差异,再适当的部位形成独
使用尘埃粒子计数器的具体步骤
尘埃粒子计数器就是对尘埃粒子个数进行统计的仪器,从而为空气洁净度的评定提供依据。作为一种用于检测洁净环境中单位体积内尘埃粒子数目及其分布的仪器,其具有检测速度快、测量精度高、可靠性高、使用灵活度高、测量性能稳定等优点,被广泛应用于为血液中心、防疫站、疾控中心、质量监督所等权威机构、电子行业、制药车间
使用普通光学显微镜的具体步骤
普通光学显微镜的使用方法装在镜台下方,包括反光镜,集光器。(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔使用方法:(一)显微镜的主要构造普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。1.机械部分(1)镜座:是显微镜的底座
使用普通光学显微镜的具体步骤
普通光学显微镜的使用方法装在镜台下方,包括反光镜,集光器。(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔使用方法:(一)显微镜的主要构造普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。1.机械部分(1)镜座:是显微镜的底座
使用普通光学显微镜的具体步骤
普通光学显微镜的使用方法装在镜台下方,包括反光镜,集光器。(1)反光镜:装在镜座上面,可向任意方向转动,它有平、凹两面,其作用是将光源光线反射到聚光器上,再经通光孔使用方法:(一)显微镜的主要构造普通光学显微镜的构造主要分为三部分:机械部分、照明部分和光学部分。1.机械部分(1)镜座:是显微镜的底座
杂交瘤技术的原理及具体步骤
杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下,
使用普通光学显微镜的具体步骤
一、取镜1.右手握住镜臂,左手托住镜座。2.把显微镜放在实验台上,略偏左。安装好目镜和物镜。 二、对光3.转动转换器,使低倍物镜对准通光孔(物镜的前端与载物台要保持2厘米的距离)。4.把一个较大的光圈对准通光孔。左眼注视目镜内(右眼睁开,便于以后同时画图)。转动反光镜,使光线通过通光孔反射到镜筒内。