免疫琼脂双向扩散实验具体步骤
琼脂扩散( agar diffusion )为可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中所呈现的一种沉淀反应。当对应的抗原、抗体在半固体琼脂终相遇,且二者比例适当时,便出现可见的白色沉淀线,这组沉淀线是一组抗原、抗体的特异性复合物。当琼脂中有多组不同的抗原、抗体存在时,便各自依其扩散速度的差异,再适当的部位形成独立的沉淀线。因此,琼脂扩散不仅用于疾病的诊断,更广泛地用于抗原成分的分析。......阅读全文
免疫琼脂双向扩散实验具体步骤
琼脂扩散( agar diffusion )为可溶性抗原与抗体在琼脂凝胶中所呈现的一种沉淀反应。当对应的抗原、抗体在半固体琼脂终相遇,且二者比例适当时,便出现可见的白色沉淀线,这组沉淀线是一组抗原、抗体的特异性复合物。当琼脂中有多组不同的抗原、抗体存在时,便各自依其扩散速度的差异,再适当的部位形成独
琼脂扩散实验——双向琼脂扩散
实验材料待测血清试剂、试剂盒生理盐水琼脂粉仪器、耗材载玻片打孔器微量进样器实验步骤1. 取一清洁载玻片,倾注3.5~4.0毫升加热熔化的1%食盐琼脂制成琼脂板。2. 凝固后,用直径3毫米打孔器,孔间距为5毫米。孔的排列方式如图2所示。图2 双向琼脂扩散原抗体孔位置示意图3. 用微量进样器于中央
双向琼脂扩散实验
一、原理双向琼脂扩散实验,是将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板内的相邻小孔中。两者相互扩散,当扩散到他们的浓度比例合适的部位相遇时,就会形成抗原抗体复合物的沉淀。二、操作步骤1.取一块干净的玻璃板,用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台,将1%琼脂糖融化,56℃水浴中保温。2.将琼脂糖铺于玻璃板上,
双向免疫扩散实验
抗原、抗体在凝胶中扩散,并进行沉淀反应,叫做免疫扩散反应(immunodiffusion)。将抗原与其相应抗体放在凝胶(如琼脂)平板中的邻近孔内,使它们互相扩散,当扩散到两者浓度比例合适的部位相遇时,即出现乳白色的沉淀线,称为双向免疫扩散试验。此方法是由 Ouchterlony 所提出,因此又称 O
双向免疫扩散实验
实验方法原理 双向免疫扩散试验不仅可对抗原或抗体进行定性鉴定和测定效价,还可对抗原或抗体进行纯度分析和同时对两种不同来源的抗原或抗体进行比较,分析其所含成分的异同。若在两孔内有两对或两对以上的抗原抗体系统,就能产生相应数量的分离的沉淀线(图 1)。因此,利用此法可进行抗原或抗体的纯度分析。图 1 双
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳1
可溶性抗原与相应抗体以合适的比例发生特异反应时,在一定温度和电解质存在的条件下,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、脂类等。 根据抗原与抗体的不同条件及其它因素,沉淀反应可以分为以下三种主要形式。即:环状沉淀反应(ring precipitation
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳2
二、实验材料 1%琼脂(生理盐水配制)管,每管约4ml 载玻片 打孔器及打孔模板 微量加样器及塑料吸头 抗原:0.5μg/ml 牛血清白蛋白(BSA)、0.5μg/ml 人血清白蛋白(HSA) 抗体:兔抗人血清白蛋白加兔抗牛血清白蛋白 湿盒 三、实验方法 1.将已
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳(图)
可溶性抗原与相应抗体以合适的比例发生特异反应时,在一定温度和电解质存在的条件下,经过一定的时间,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、脂类等。根据抗原与抗体的不同条件及其它因素,沉淀反应可以分为以下三种主要形式。即:环状沉淀反应(ring precipitatio
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳1
可溶性抗原与相应抗体以合适的比例发生特异反应时,在一定温度和电解质存在的条件下,形成肉眼可见的沉淀物,称为沉淀反应。沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、脂类等。 根据抗原与抗体的不同条件及其它因素,沉淀反应可以分为以下三种主要形式。即:环状沉淀反应(ring precipitation
双向琼脂扩散的概念
中文名称双向琼脂扩散英文名称double immunodiffusion定 义将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,两者自由向四周扩散并相遇,在比例合适处形成沉淀线。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
双向琼脂扩散的定义
中文名称双向琼脂扩散英文名称double immunodiffusion定 义将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,两者自由向四周扩散并相遇,在比例合适处形成沉淀线。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳(图)(四)
(三) 免疫电泳(Immunoelectrophoresis)——示教一、基本原理免疫电泳法是将凝胶电泳与双向免疫扩散两种技术相结合的一种实验方法。在电场作用下标本中各组分因电泳迁移率不同而分成区带,然后沿电泳平行方向将凝胶挖一沟槽,将抗体加入沟槽内,使抗原与抗体相互扩散而形成沉淀线。根据沉淀线的数
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳(图)(三)
三、实验方法1.将已溶化的1%盐水琼脂管放58℃~60℃水浴箱中平衡温度备用。2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板(注意:倾注速度不要过快,以免琼脂溢出载玻片;倾注过程要连续以保证琼脂板均匀、平滑)。3.琼脂凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器
单向、双向免疫琼脂扩散和免疫电泳(图)(二)
(二)人血清中IgG正常值的测定: 1.将已制备好的抗体琼脂板置打孔模板上,每一琼脂板可打孔4个(孔径3mm,孔距10mm)。 2.将单位正常人血清用PBS分别作1/50稀释。 3.用微量加样器分别取1/50稀释的单人份血清标本10µl加入孔中,每份标本应各加两孔。 4.作好标记放湿
双向琼脂扩散结果分析
双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。 将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。 临床常用本方法检查原发性肝癌患者血
琼脂扩散试验(单向和双向)
实验概要可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有单向扩散和双向扩散两种。本文介绍了单向和双向两种琼脂扩散试验的操作流程。单向琼脂扩散试验主要用于检查血清中各种免疫球蛋白和补体成份的含量;双向琼脂扩散试验可用来分析和鉴定标本中多种抗原或抗体成份,并用以
琼脂扩散试验(单向和双向)
实验概要可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。基本类型有单向扩散和双向扩散两种。本文介绍了单向和双向两种琼脂扩散试验的操作流程。单向琼脂扩散试验主要用于检查血清中各种免疫球蛋白和补体成份的含量;双向琼脂扩散试验可用来分析和鉴定标本中多种抗原或抗体成份,并用以
琼脂扩散实验——单向琼脂扩散
实验材料待检血清试剂、试剂盒生理盐水琼脂粉仪器、耗材微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤1. 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2. 在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。图1 单向琼脂扩散试验抗原孔位置示
双向免疫扩散法测定抗血清效价实验—双向免疫扩散法
双向免疫扩散法可用于:(1)诊断疾病;(2)测定抗体的效价。实验方法原理将抗原和相应抗体分别加入同一凝胶板中的相邻小孔中,使两者互相扩散,当扩散到它们的浓度达当量点时(浓度相当)形成沉淀线。如果抗原-抗体的浓度合适时,沉淀线在两孔的中间。如抗体过量,沉淀线靠近抗原孔。如抗原过量,沉淀线靠近抗体孔。此
双向琼脂扩散试验(Double-immunodiffusion-test)
可溶性抗原与相应抗体在半固体琼脂凝胶内扩散,二者相遇,在比例合适处形成白色沉淀。双向琼脂扩散试验(Double immunodiffusion test) 抗原和抗体加到琼脂板上相对应的孔中,两者各自向四周扩散,如两者相对应,浓度比例合适,则经一定时间后,在抗原、抗体孔之间出现清晰致密的白色沉淀线。
琼脂扩散实验
实验材料 待检血清试剂、试剂盒 生理盐水琼脂粉仪器、耗材 微量进样器打孔器玻璃板湿盒实验步骤 1. 将适当稀释(事先滴定)的诊断血清与予溶化的2%琼脂在60℃水浴预热数分钟后等量混合均匀制成免疫琼脂板。2. 在免疫琼脂板上按一定距离(1.2~1.5厘米)打孔,见图1。1~5孔加参考血清,6~7孔
双向免疫扩散试验的实验方法
1.将已溶化的1%琼脂盐水管放56~60℃水浴箱中平衡温度备用。2.将载玻片置于水平桌面上,倾注已溶化琼脂3.5~4ml,使成厚度约1.5mm琼脂板。 3.凝固后,将打孔模板置于琼脂板下,然后用打孔器打孔,根据不同需要可制成三角型、方阵型或梅花型。本次实验采用三角型,即每一个三角型的三个孔为一组。(
双向免疫扩散试验的实验结果分析
(1)融合性沉淀弧,说明两孔中抗原相同,为同一性反应。(2)两沉淀线独自形成并形成交叉,说明两孔中的抗原完全不同,为非同一性反应。(3)融合性沉淀弧出现支线,或同时有另一条或两条沉淀线,说明两孔中抗原有相同部分又有不同部分,此为部分同一性反应。
简述双向琼脂扩散试验的临床意义
双向琼脂扩散试验的异常结果:这个实验中的抗原抗体并没有特别固定,双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。浓度不同,形成不同的沉淀的线。临床常用本方法检查原发性肝癌患者血清中的甲胎蛋白,作为原发性肝癌的早期辅助诊断。 双向琼
关于双向琼脂扩散试验的检查情况介绍
一、双向琼脂扩散试验的正常值: 沉淀线靠近抗原孔,则提示抗体含量大;靠近抗体孔,则提示抗原含量较多;不出现沉淀线则表明抗体或抗原的缺乏或抗原过剩;另外,如出现多条沉淀线,则说明抗原和抗体皆不是单一的成分。因此,可用于鉴定抗原或抗体的纯度。 二、双向琼脂扩散试验的注意事项: 不合宜人群:无特
单向琼脂扩散实验
一、原理单向琼脂扩散实验又称单向免疫扩散实验。指可溶性抗原在相应抗体的琼脂介质中的扩散,可定性、定量抗原。二、操作步骤 1.取一块干净的玻璃板,用少量75%乙醇冲洗,晾干后置于水平台,将1%琼脂糖融化,56℃水浴中保温。2.取15ml琼脂糖加到56℃预热玻璃管中,加入约200微升抗血清,充分混匀后铺
双向免疫扩散与单向免疫扩散的区别
双向免疫扩散是指可溶性抗原与相应抗体在琼脂介质中相互扩散,彼此相遇后形成一定类型的特异性沉淀线。沉淀线的特征与位置不仅取决于抗原抗体的特异性及相互间比例,而且与其分子大小及扩散速度相关。当抗原、抗体存在多个系统时,可呈现多条沉淀线乃至交叉反应。依据沉淀线的形态、条数、清晰度及位置可了解抗原或抗体的若
关于双向琼脂扩散试验的基本信息介绍
双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。临床常用本方法检查原发性肝癌患者血清中的甲
双向琼脂扩散技术的的技术特点和原理
中文名称双向琼脂扩散英文名称double immunodiffusion定 义将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶的小孔中,两者自由向四周扩散并相遇,在比例合适处形成沉淀线。应用学科免疫学(一级学科),应用免疫(二级学科),免疫学检测和诊断(三级学科)
临床化学检查方法介绍双向琼脂扩散试验介绍
双向琼脂扩散试验介绍: 双向琼脂扩散试验常用于定性检测,也可用于半定量检测。将抗原与抗体分别加入琼脂凝胶板上相邻近的小孔内,让它们相互向对方扩散。当两者在最适当比例处相遇时,即形成一条清晰的沉淀线。根据有否出现沉淀线,可用已知的抗体鉴定未知的抗原,或用已知的抗原鉴定未知的抗体。临床常用本方法检查原