关于动物细胞工程的过程介绍
1)免疫脾细胞的制备 制备单克隆抗体的动物多采用纯系Balb/c小鼠。免疫的方法取决于所用抗原的性质。免疫方法同一般血清的制备,也可采用脾内直接免疫法。2)骨髓瘤细胞的培养与筛选 在融合前,骨髓瘤细胞应经过含8-AG的培养基筛选,防止细胞发生突变恢复HGPRT的活性(恢复HGPRT的活性的细胞不能在含8-AG的培养基中存活)。骨髓瘤细胞用10%小牛血清的培养液在细胞培养瓶中培养,融合前24h换液一次,使骨髓瘤细胞处于对数生长期。3)细胞融合的关键:1技术上的误差常常导致融合的失败。例如,供者淋巴细胞没有查到免疫应答。这必然要失败的。2融合试验最大的失败原因是污染,融合成功的关键是提供一个干净的环境,以及适宜的无菌操作技术。4)阳性克隆的筛选 应尽早进行。通常在融合后10天作第一次检测,过早容易出现假阳性。检测方法应灵敏、准确、而且简便快速。具体应用的方法应根据抗原的性质,以及所需单克隆抗体的功能进行选择。常用的方法有RIA法、E......阅读全文
关于动物的定向选择介绍
与陆生植物必须固着生活不同,绝大多数动物(无论水生或陆生)需主动寻找食物、猎物或配偶,因此普遍具有自由移动的能力(一些鸟类、鱼类、斑马等还能成群结队进行壮观的季节性迁徙)。所有的绿色植物都是为了光合作用而生,而所有的动物都直接或间接为了获得植物合成的有机物而生。植物之间的关系相对简单,主要是为了光、
关于动物病毒的增殖内容介绍
动物病毒的复制和噬菌体复制的过程相似:吸附、注入、复制、装配、释放,只是有些细节不同。动物病毒繁殖循环的第一步是吸附于宿主细胞表面。病毒与细胞质膜表面受体位点蛋白随机碰撞而结合。病毒感染细胞的能力极大地依赖于细胞表面特异性结合的能力。病毒结合宿主细胞的特异受体通常都是细胞所必需的表面蛋白。因而这
什么细胞工程?
细胞工程(英文:cell engineering)是指在细胞水平上,基于现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法所进行的的遗传操作。这些操作用于重组细胞的结构和内含物,以改变生物的结构和功能,并通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法,快速繁殖和培养出人们所
植物细胞工程常用技术手段介绍
植物细胞工程常用技术手段:植物组织培养、植物体细胞杂交。
细胞工程的基本操作
细胞工程的基本操作有细胞培养技术、细胞融合技术、细胞拆合技术、染色体及染色体工程技术、体外受精和胚胎移植技术等,在食品工业中应用较广泛的细胞工程技术为细胞培养技术、细胞融合技术以及细胞拆合技术。
细胞工程的技术原理
植物细胞具有全能性,即具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞,都具有发育成完整生物体的潜能。而让细胞发挥出全能性的方法,就是细胞脱分化。细胞脱分化,就是让已经分化的细胞,经过诱导后,失去其特有的结构和功能而转变成为未分化细胞,进而形成愈伤组织。愈伤组织在一定的培养条件下,分化出幼根和芽,进而形成完整
细胞工程的技术应用
1、微型繁殖技术2、作物脱毒3、人工种子作物新品种的培育1、单倍体育种2、突变体的利用3、细胞产物的工厂化生产
细胞工程的发展简史
细胞的发现 1665年,英国人胡克(Hooke)利用自己设计的显微镜第一次观察到了细胞。 细胞理论的提出 1838年,施莱登(Schleiden)发表“植物发生论”,认为无论怎样复杂的植物都由细胞构成。 1839年,施旺(Schwann)发表 “关于动植物结构和生长一致性的显微研究”。提
细胞工程的研究内容
动植物细胞与组织培养;细胞融合(新的物种或品系、单克隆抗体);细胞核移植(无性繁殖、克隆动物);染色体工程(多倍体育种,例:八倍体小黑麦);胚胎工程(优良品种、试管婴儿);干细胞与组织工程(胚胎干细胞、组织干细胞);基因生物与生物反应器(转基因动物、转基因植物)。
细胞工程的技术目的
细胞工程的目的,是得到人们所需要的生物产品。要使已经改造好的细胞产生大量具有经济价值的产物,就必须依靠下游加工过程,也就是我们常说的下游工程。它的作用就是大量培养细胞,并从培养液中分离、精制出有关的生物化工产品。由于植物细胞的高度易碎性,对剪切力的敏感、细胞有去分化和聚集作用,增殖时间长等独特性,使
关于变应原的基本过程介绍
变态反应的发生可分为两个阶段:致敏阶段,当机体初次接触变应原后,需要有一个潜伏期(1~2周),免疫活性细胞才能产生相应抗体或致敏淋巴细胞,在此期间机体无任何异常反应,但已具备了发生变态反应的潜在能力。变态反应发生阶段,当致敏机体再次与同一变应原接触,变应原与相应抗体或致敏淋巴细胞结合,引起机体生
关于分子蒸馏的过程介绍
短程蒸馏器还适合于进行分子蒸馏。分子流从加热面直接到冷凝器表面。分子蒸馏过程可发如下四步: 分子从液相主体向蒸发表面扩散 通常,液相中的扩散速度是控制分子蒸馏速度的主要因素,所以应尽量减薄液层厚度及强化液层的流动。 分子在液层表面上的自由蒸发 蒸发速度随着温度的升高而上升,但分离因素有时
关于中间代谢的过程介绍
中间代谢也称为细胞内代谢。在中间代谢过程中,机体借助于各种反应从营养素或消化产物中获得能量,以及机体构成所需要的“原材料”。整个中间代谢可以划分为两个过程,即分解代谢和合成代谢,其中分解代谢主要完成获取能量和“原材料”的工作,而合成代谢则主要完成利用贮能和“原材料”构成机体组成成分的任务。 在
关于糖异生作用的过程介绍
1、凡是能生成草酰乙酸的物质都可以变成葡萄糖。例如三羧酸循环的中间物,柠檬酸、异柠檬酸、α-酮戊二酸、琥珀酸、延胡索酸和苹果酸都可以转变成草酰乙酸而进入糖异生途径。 2、大多数氨基酸是生糖氨基酸如丙氨酸、谷氨酸、天冬氨酸、丝氨酸、半胱氨酸、甘氨酸、精氨酸、组氨酸、苏氨酸、脯氨酸、谷胺酰胺、天冬
关于克隆实验的过程介绍
先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相
关于β氧化的发现过程介绍
β氧化作用的提出是在二十世纪初,Franz Knoop 在此方面作出了关键性的贡献。他将末端甲基上连有苯环的脂肪酸喂饲狗,然后检测狗尿中的产物。结果发现,食用含偶数碳的脂肪酸的狗的尿中有苯乙酸的衍生物苯乙尿酸,而食用含奇数碳的脂肪酸的狗的尿中有苯甲酸的衍生物马尿酸。 Knoop由此推测无论脂肪酸
关于牙菌斑的形成过程介绍
牙菌斑,即“细菌社区”的建立、成熟需要经历三个阶段: 首先唾液中的营养物质吸附在牙齿表面,构成“社区”肥沃的“土壤”,即获得性薄膜形成。这个过程在刚清洁过的牙面上,数分钟内便可形成,1-2小时迅速增厚。 “土壤”形成之后,便可吸引细菌来定居,同时为细菌提供营养,即细菌粘附和共聚。首先会有先驱
关于免疫应答的过程介绍
适应性免疫应答可分为三个阶段: 1.识别阶段:T细胞和B细胞分别通过TCR和BCR精确识别抗原,其中T细胞识别的抗原必须由抗原提呈细胞来提呈; 2.活化增殖阶段:识别抗原后的淋巴细胞在协同刺激分子的参与下,发生细胞的活化、增殖、分化,产生效应细胞(如杀伤性T细胞)、效应分子(如抗体、细胞因子
关于化学渗透的过程介绍
①电子传递从NADH开始,复合物Ⅰ将还原型的NADH氧化,释放出的两个电子和一个H+质子被NADH脱氢酶上的黄素单核苷酸(FMN)接受,同时从基质中摄取一个H+ 将FMN还原成FMNH2,NADH被氧化成NAD+重新进入TCA循环; ②FMNH2 将一对H+质子传递到膜间隙,同时将一对电子经铁
关于多肽的合成过程介绍
除去保护 Fmoc保护的柱子和单体必须用一种碱性溶剂(piperidine)去除氨基的保护基团。 激活和交联 下一个氨基酸的羧基被一种激活剂所激活。化学工艺常用HBTU/HCTU/HITU/HATU+NMM/DIPEA或HOBT+DIC作激活剂,激活的单体与游离的氨基反应交联,形成肽键。在
关于基因转录的过程介绍
(1)基因转录— 转录的启动 DNA上存在着转录的起始信号,它是特殊的核苷酸序列,称为启动子。 转录是由RNA聚合酶全酶结合于启动子而被启动的。 其机理是:s因子能识别启动子,并识别有义链,它与核心酶结合,引导核心酶定位到启动子部位。 (2)基因转录— 转录的起始 当聚合酶结合到启动子
关于基因的认识过程介绍
从孟德尔定律的发现,一百多年来人们对基因的认识在不断深化。 1866年,奥地利学者G.J.孟德尔在他的豌豆杂交实验论文中,用大写字母A、B等代表显性性状如圆粒、子叶黄色等,用小写字母a、b等代表隐性性状如皱粒、子叶绿色等。他并没有严格地区分所观察到的性状和控制这些性状的遗传因子。但是从他用这些
关于动物病毒的感染与损伤介绍
细胞感染是导致细胞死亡的感染。病毒可以以多种方式损伤宿主细胞,经常导致细胞死亡。由病毒感染引起宿主细胞和组织中变化或异常现象称为致细胞病变效应。细胞损伤机制可能有七种:病毒抑制宿主DNA、RNA和蛋白合成;细胞溶酶体损伤,导致水解酶释放,细胞崩解;病毒感染后通过向细胞质膜中插入病毒特异性蛋白而迅
关于动物中的基因转换现象介绍
在蚂蝗、鲟鱼、果蝇、蜥蜴和人类等动物的核基因组中都发现有基因转换现象。以蜥蜴为例, 它是一种孤雌生殖的异源三倍体, 进行营养繁殖, 其r D N A的重复序列通过基因转换已高度纯合。这些三倍体蜥蜴有几千年历史, 只进行无性繁殖, 很少或无遗传重组, 且r D N A的基因座位没减少, 但其中一个
关于多克隆抗体免疫动物的介绍
供免疫用的动物主要是哺乳动物和禽类,常选择家兔、绵羊、山羊、马、骡和豚鼠及小鼠等。动物的选择常根据抗体的用途和量来决定,也与抗原的性质有关。如要获得大量的抗体,多采用大动物;如要是获得直接标记诊断的抗体,则直接采用本动物;如要获得间接的标记诊断用抗体,则必须用异源动物制备抗体;如果难以获得的抗原
细胞工程的发展研究历史
自1904年Hanning成功培养离体胚以来,伴随着相关理论与技术的飞速发展,植物细胞工程也取得了巨大的成就。我们已经可以利用细胞融合及DNA重组等现代生物技术从细胞和分子水平改良现有品种甚至于组建新品种。1983年转基因植物问世,并于1986年起被批准进入田间试验,美国APHIS到97年1月31日
细胞工程的概念和应用
细胞工程是生物工程的一个重要方面。总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。当前细胞工程所涉及的主要技术领域有细胞培养、细胞融合、细胞拆合、染色体操作及基因转移等方面。通过细胞工程可以生产有用的生物产品或培养有价
细胞工程的分类和组成
细胞工程根据研究材料的不同,可分为植物细胞工程和动物细胞工程,均主要由两部分构成。其一是上游工程,包含细胞培养、细胞遗传操作和细胞保藏三个步骤。第二则是下游工程,是将已转化的细胞应用到生产实践中去,以生产生物产品的过程。其中细胞培养是细胞工程的技术基础。顾名思义,植物细胞工程,是在细胞水平上针对植物
植物细胞工程的技术应用
植物繁殖的新途径1、微型繁殖技术2、作物脱毒3、人工种子作物新品种的培育1、单倍体育种2、突变体的利用3、细胞产物的工厂化生产
动物细胞工程中的传代培养与原代培养有什么区别
当原代培养成功以后,随着培养时间的延长和细胞不断分裂,一则细胞之间相互接触而发生接触性抑制,生长速度减慢甚至停止;另一方面也会因营养物不足和代谢物积累而不利于生长或发生中毒。此时就需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿内,再进行培养。这个过程就称为传代或者再培养,原代就是第一代培养的细