原生质体融合的融合过程介绍
将植物细胞A与植物细胞B用纤维素酶和果胶酶处理,得到不含细胞壁的原生质体A和原生质体B,运用物理方法或是化学方法诱导融合,形成杂种细胞,再利用植物细胞培养技术将杂种细胞培养成杂种植物体。①杂交时间:植物细胞杂交是从细胞融合开始,到培育成的新植物体结束。a.原生质体制备:用酶解法去除细胞壁(纤维素酶和果胶酶)b.原生质体融合:膜融合(高钙、高pH诱导融合)、核融合(杂种细胞第一次有丝分裂时融合)......阅读全文
原生质体融合的化学试剂一般用什么
基础是膜的流动性病毒诱导融合 在植物细胞融合中不使用. 聚乙二醇诱导融合 聚乙二醇是化学试剂,使用起来很方便,诱导细胞融合的频率比较高,但是它有一定毒性,对某些细胞(如卵细胞)不适用. 电场诱导融合 电融合技术有许多优点,如诱导细胞融合的频率高,对细胞无毒害作用,操作简便,可重复性好.
细胞融合的融合过程
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个
转基因植物的原生质体融合和花粉管通道法介绍
1、原生质体融合 将不同物种的原生质体进行融合,可实现两种基因组的结合。也可将一种细胞的细胞器,如线粒体或叶绿体与另一种细胞融合,此时,是一种细胞的细胞核处于两种细胞来源的细胞质中,这就形成了胞质杂种(cybrid)。 2、花粉管通道法 在授粉后向子房注射含目的基因的DNA溶液,利用植物在
细胞融合的融合过程简述
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互
两个不同种类的植物细胞的原生质体怎样融合
首先因为它们是植物细胞,具有细胞壁,要发生原生质体融合就必须除去细胞壁。而细胞壁的成分是纤维素和果胶,所以要用纤维素酶和果胶酶。即我们生物学上的酶解法。形成3种细胞团:1两个番茄原生质体融合2两个马铃薯原生质体融合3一个番茄的一个马铃薯原生质体。
制备融合蛋白的过程介绍
1、进行目的基因的克隆:根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cDNA为模板,利用PCR技术扩增不同的目的DNA片段。 2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个DNA片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质
细胞融合的过程介绍
融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。1.试剂与材料(1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2)1640培养液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(5)HAT培养液100m
关于细胞融合的过程介绍
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个
细胞膜的融合过程介绍
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互
诱导番茄和马铃薯原生质体融合的化学试剂一般用什么
聚乙二醇番茄和马铃薯原生质体融合的是化学融合(常用 PEG聚乙二醇诱导融合法)第二问是动物血清、血浆合成培养基时通常需加入血清,血浆等天然成分
细胞融合的融合过程及研究进展
融合过程 细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-
细胞融合的过程
细胞膜有内外两层,细胞融合首先发生在外层,然后再到内层,由此就出现了两种融合通道,细胞体内物质通过这两种通道转移。病毒膜与目标细胞融合时,只出现一种融合通道,即导致融合的基因只能在病毒中找到,而在目标细胞中却找不到。但是,通过EFF-1发生的细胞融合则是一个双向融合过程,需要EFF-1出现在两个相互
原生质体的再生有哪些过程
原生质体再生过程是指分离、纯化的原生质体在适当的培养方法和良好的培养条件下,很快恢复细胞壁,再生细胞持续分裂形成细胞团,最后或通过愈伤组织或通过胚状体分化出完整植株的过程。
单克隆抗体的融合过程介绍
1.试剂与材料(1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2)1640培养液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(5)HAT培养液100ml。(6)50%PEG:取分子量4000,高纯度的(日本进口或Serva)PEG10g放入25ml瓶中高压灭菌,使用前
细胞融合技术的融合方法介绍
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合;异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。仙台病毒法融合①两种细胞在一起培养,加入病毒,在4℃条件下病毒附着在细胞膜上。并使两细胞相互凝聚;②在37℃中,病毒与细胞膜发生反应,细胞膜受到破环,此时需要Ca2+和Mg2+,最适PH为8.0
原生质体的应用介绍
由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选突变体5. 膜的结构、运输、激素接受位点等的研究6. 用于分离细胞器和大分子7. 种质资源保存
什么叫融合基因-融合基因介绍
1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融合蛋白。根据构成融合基因的种类,可以将融合基因分为...1、所谓融合基因,是指将两个或多个基因的编码区首尾相连。置于同一套调控序列控制之下,构成的嵌合基因。融合基因的表达产物为融
原生质体培养的方法介绍
主要有液体浅层培养法、液体悬滴培养、固体平板法、固液双层培养法(应用最广泛)、琼脂糖珠培养法。
关于原生质体的基本介绍
原生质体是细胞壁以内各种结构的总称,也是组成细胞的一个形态结构单位,活细胞中各种代谢活动均在此进行。原生质体包括细胞膜(cell membrane)、细胞质(cytoplasm)、细胞核(nucleus)和细胞器(organelle)等。原生质体化学成分十分复杂,其组分也随着细胞不断的新陈代谢活
植物原生质体的特点介绍
植物原生质体具有以下的特点: ①无细胞壁的物理障碍; ②能获得遗传性状和生理性状较一致的细胞群体; ③植物原生质体同样具有全能性; ④用组织培养方法可进行大量繁殖。 这些有利的特征决定了原生质体是一个极好的实验体系,在植物育种上有广泛用途。
原生质体的分离方法介绍
机械分离法 :常用于分离藻类原生质体,采用渗透方法使细胞发生质壁分离,用刀把细胞壁切破,使原生质体流出。(手工操作难度大,得率低,费时费力)酶解分离法:用酶(琼脂酶,果胶酶,纤维素酶等)将细胞壁分解。(条件温和,原生质体完整性好,活力高,得率高) 因此原生质体制备多采用酶解法,此法操作过程分为:取材
原生质体的鉴定方法介绍
即检验所获得的原生质体是否是真正的原生质体(1)低渗胀破法:把原生质体放入低渗透溶液中,在显微镜下观察原生质体从低渗溶液中吸水胀破的过程。如果是真正的原生质体,因为没有细胞壁,这样在胀破后留下的残迹应该是无形的。如果原生质体还带有部分细胞壁,则原生质体从无壁部分吸水向外膨胀直至胀破,破碎后留下的残迹
细胞融合过程技术分析
细胞融合过程技术分析融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1zui为常用。1.试剂与材料(1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。(2)1640培养液100ml。(3)完全1640液100ml。(4)2.5%FCS-1640液50ml。(
原生质体的概念
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。
原生质体的培养
原生质体(Protoplast):指采用机械或酶解法去掉细胞壁的裸露细胞。一、原生质体的应用 由于没有细胞壁,原生质体为作物遗传改良和植物学研究提供了极为有利的试验材料。原生质体可以用于下面几种研究。1. 用作细胞杂交服务于作物改良2. 用作遗传转化的对象3. 研究细胞壁的发生过程4. 筛选
融合基因的种类介绍
根据构成融合基因的种类,可以将融合基因分为四大类:(1)由报告基因和功能基因构成的融合基因。常用的报告基因有:GFP(绿色荧光蛋白)基因、GUS基因、LacZ基因和Luciferasese(虫荧光素酶)基因等,主要目的是对功能基因进行示踪,研究其功能及特性。 (2)由信号肽或单体蛋白的序列与功能基因
细胞融合的介绍
细胞融合(cell fusion),细胞遗传学名词,是在自发或人工诱导下,两个细胞或原生质体融合形成一个杂种细胞。基本过程包括细胞融合形成异核体(heterokaryon)、异核体通过细胞有丝分裂进行核融合、最终形成单核的杂种细胞。细胞融合可作为一种实验方法被广泛适用于单克隆抗体的制备,膜蛋白的
融合蛋白的基本介绍
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白
细胞融合技术诱发融合
异种间的细胞必须经诱导剂处理才能融合,称诱发融合。
细胞融合技术自发融合
同种细胞在培养时2个靠在一起的细胞自发合并,称自发融合。