杂交瘤细胞系的定义

骨髓瘤细胞与产生抗体的B细胞融合而构成的细胞,可在培养液中生长繁殖的细胞系,用于单克隆抗体的制备等方面的研究。......阅读全文

杂交瘤细胞的保存与复苏

(一)保存 当获得产生所需的单克隆抗体的杂交瘤细胞后,必须将一部分杂交瘤细胞保存,否则在连续传代的过程中,可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中,难免不发生污染以至于毁灭。所以必须冷藏保存一部分。保存方法如下: 1.材料 (1) 细胞:取对数生长期的细

细胞系的概念分歧

  现行的人教社大纲版选修教材中是这样介绍细胞株和细胞系的:  原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了,细胞的生长就会出现停滞,大部分细胞衰老死亡。但是有极少数的细胞能够度过“危机”而继续传下去,这些存活的细胞一般能够传到40--50代,这种传代细胞叫做细胞株。细胞株的遗传物质没有发生改变

无限细胞系的特点

无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生转化的细胞系。无限细胞系有永生性(不死性),但仍保留接触抑制和无异体接种致死;有的有永生性,异体接种有致瘤性,说明已恶性化。由某一细胞系分离出来的、在性状上与原细胞系不同的细胞系,称亚系(Subline)。

抗原抗体反应的人单克隆抗体的制备

  小鼠的单克隆抗体蛋白应用于人体后,作为抗原能引起人的免疫应答,大大降低其生物活性,并可能导致变态反应。因此人源单克隆抗体在临床治疗上有广泛应用前景,引起人们的普遍兴趣。但是人单克隆抗体制备存在许多技术上和伦理上的障碍,如人杂交瘤细胞系不稳定,有些抗原不能对人进行人工免疫,人B细胞只能从外周血中分

杂交瘤技术基本程序与方法1

一、杂交瘤技术的诞生 淋巴细胞杂交瘤技术的诞生是几十年来免疫学在理论和技术两方面发展的必然结果,抗体生成的克隆选择学说、抗体基因的研究、抗体结构与生物合成以及其多样性产生机制的揭示等,为杂交瘤技术提供了必要理论基础,同时,骨髓瘤细胞的体外培养、细胞融合与杂交细胞的筛选等提供了技术贮备。1975年8月

制备小鼠T细胞杂交瘤

可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 (T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子的条件下大量的扩增。研究证明,杂交瘤对研究T C R 特异性识别抗原以及C D 3-T C R 复合物的生物化学和分子生物

杂交瘤细胞和重组抗体

在过去的二十五年里,利用杂交瘤细胞生产了成千上万的鼠单克隆抗体。人们用同样的技术从转基因鼠中克隆人类的抗体,并设计了全长型抗体和重组片段,它们可以被用于多种诊断和治疗。而且如果他们能在哺乳动物细胞,牛奶及植物中表达,就可以大量获得。 一个世纪以前,Paul Ehrlich提出了著名的侧链理论来解

细胞系的多位点DNA指纹检测——细胞系-Southern-印迹-DNA-制备

实验方法原理细胞中提取的 DNA 经限制性酶消化,利用 Southern 印迹技术将消化产物固定在尼龙膜上 [ Ausubel et al.,1996,2002 ],与来自 M 13 噬菌体的标记 DNA 进行杂交。实验材料D-PBSHinfI酶及其缓冲液琼脂糖凝胶5×TBE储存液EDTA二钠盐6×

什么是细胞系?

细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广

什么是细胞系?

  经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生

什么是细胞系?

细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广

杂交瘤技术的基本原理

杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即具有所谓永生性。在选择培养基的作用下,

杂交瘤技术的基本原理

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠B细胞和小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长(选择原理见后),小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨

生物杂交瘤技术平台的优化策略

杂交瘤技术仍然是单克隆抗体发现的主要技术,尤其是在治疗性抗体药物治疗领域,相比噬菌体、酵母等非天然文库,具有成药性好、特异性强等特点。由于杂交瘤获得的单克隆抗体,系经过哺乳动物细胞自然进化筛选获得的序列,因此其通常不会遇到表达困难、产量低、非特异性结合等问题。 杂交瘤技术具有以下挑战:1. 对于免疫

杂交瘤技术的基本原理

杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠B细胞和小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长(选择原理见后),小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有B细胞与骨

骨髓红细胞系统的概述

  骨髓红细胞系统是骨髓细胞学检查的一个类型,骨髓细胞学检查对诊断造血系统疾病最有价值,同时对诊断其他非造血系统疾病,对不明原因发热、恶病质、原因不明的肝脾肿大有鉴别诊断意义。

无限细胞系的其他特性

癌细胞的组织化学特性与正常二倍体细胞也有不同程度的差别,如细胞表面特异性抗原的表达、细胞在植物凝集素存在条件下的凝集能力以及某些酶活性的改变等。癌细胞的脱氧核糖核酸酶、酸性磷酸酶增多,碱性磷酸酶减少;刀豆蛋白凝集试验中凝集性增强。

海拉细胞系的特点

1、可以连续传代;2、细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去;3、此细胞系跟其它癌细胞相比,增殖异常迅速;4、感染性极强。

细胞系的-DNA-STR-谱

细胞团抽提 用SGM Plus®进行扩增 利用ABI377DNA测序仪进行凝胶电泳 细胞系结果分析             实验方法原理 用 Qiage

骨髓粒细胞系统的概述

  骨髓粒细胞系统是骨髓细胞学检查的一个类型,骨髓细胞学检查对诊断造血系统疾病最有价值,同时对诊断其他非造血系统疾病,对不明原因发热、恶病质、原因不明的肝脾肿大有鉴别诊断意义。

细胞系培养的组织来源

组织来源:细胞供体所属物种,来自人体或者动物;个体性别、年龄;取材的器官或组织。如系肿瘤组织,应说明临床和病理诊断,以及病历号等。

无限细胞系的遗传特性

体外培养的大多数癌细胞有遗传学特性的改变,如呈现异倍体或多倍体核型、染色体片断的移位或缺失、癌基因特异表达等。光学显微镜下可见的核型变化在传代培养过程中稳定出现时,可作为标志性染色体,用于鉴别细胞的种属性。肿瘤细胞群常由多个细胞群组成,有干细胞系和数个亚系,并不断进行着适应性演变。

海拉细胞系的概念

海拉细胞系是源自一位美国黑人妇女海瑞塔‧拉克斯(Henrietta Lacks)的宫颈癌细胞的细胞系。一位外科医生从她的肿瘤上取下组织样本,并在实验室中进行培养,仍被不间断的培养。不同于其他一般的人类细胞,此细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去。此细胞系跟其他癌细胞系相比,增殖异常迅速。

无限细胞系的形态特征

在显微镜下观察,体外培养的大多数癌细胞比二倍体细胞图像清晰,核膜轮廓明显,核质比增大,核仁增大增多,核糖体颗粒丰富等。电子显微镜下观察,癌细胞表面不规则,有较多的胞浆突和微绒毛;细胞核形状多变,染色质分布不均;细胞内微丝走行不如正常细胞规则等。

细胞系的-DNA-STR-谱

实验材料 Qiagen®DNA迷你试剂盒试剂、试剂盒 无水乙醇磷酸缓冲液仪器、耗材 小离心管离心机水浴或可以维持56℃的烤箱涡流混合器实验步骤 一、开始实验前,必须准备以下试剂:(a)蛋白酶溶剂溶解:向 Qiagen® 冷冻干燥的蛋白酶中加适量蛋白酶溶剂。该溶液 2~8°C 保存 2 个月内稳定。(

海拉细胞系的特点

1、可以连续传代;2、细胞株不会衰老致死,并可以无限分裂下去;3、此细胞系跟其它癌细胞相比,增殖异常迅速;4、感染性极强。

无限细胞系的生长特性

1.永生性 体外培养的癌细胞具有永生性,表现为细胞可无限传代而不凋亡。虽然永生性可能是体内肿瘤细胞所固有的特性,但多数肿瘤细胞原代培养时并不容易,大多会增殖若干代后出现类似二倍体细胞培养中的停滞期。此阶段过后才获得永生性,顺利传代生长下去。说明体外肿瘤细胞的永生性有可能是体外培养后获得的。一些细胞系

辐射杂种细胞系的概念

中文名称辐射杂种细胞系英文名称radiation hybrid cell line;RH cell line定  义人与啮齿类的杂种体细胞经射线处理后,生成带有包含啮齿类染色体和有若干个不同的人体染色体断片的杂种细胞。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

单核巨噬细胞系统的简介

  单核吞噬细胞系统(mononeuclear phagocyte system)又称单核巨噬细胞系统,是高等动物体内具有强烈吞噬能力的巨噬细胞,及其前身细胞所组成的一个细胞系统,是机体防御结构的重要组成部分。  巨噬细胞细胞质内含丰富溶酶体、线粒体及粗糙内质网,细胞表面形成小突起和胞膜皱褶。静止时

海拉细胞系的应用

海拉细胞系被George Gey分送给众研究单位(并未通知拉克斯本人也未得到她的许可),并用作癌症模式细胞(model cancer cells)研究。HeLa细胞系也被用作研究细胞信号传导(cellular signal transduction)。1952年研究人员用各种从腮腺炎、麻疹到疱疹疾病