杂交瘤细胞系的定义
骨髓瘤细胞与产生抗体的B细胞融合而构成的细胞,可在培养液中生长繁殖的细胞系,用于单克隆抗体的制备等方面的研究。......阅读全文
杂交瘤细胞系的定义
骨髓瘤细胞与产生抗体的B细胞融合而构成的细胞,可在培养液中生长繁殖的细胞系,用于单克隆抗体的制备等方面的研究。
杂交瘤细胞系的产生与筛选
脾B细胞+骨髓瘤细胞,加聚乙二醇(PEG)促进细胞融合,HAT培养基中培养(内含次黄嘌呤、氨基蝶呤、T)生长出来的脾B-骨髓瘤融合细胞继续扩大培养。细胞融合物中包含:脾-脾融合细胞:不能生长,脾细胞不能体外培养。骨-骨融合细胞:不能利用次黄嘌呤,但可通过第二途 径利用叶酸还原酶合成嘌呤。氨基蝶呤对叶
杂交细胞系的定义
中文名称杂交细胞系英文名称hybrid cell line定 义由杂交细胞建成的细胞系。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
[淋巴细胞]杂交瘤的定义
中文名称[淋巴细胞]杂交瘤英文名称hybridoma定 义肿瘤细胞与正常来源淋巴细胞融合产生的杂种细胞。实际上多指T或B淋巴细胞与骨髓瘤细胞系融合成的杂交瘤细胞。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
非整倍体细胞系的定义
中文名称非整倍体细胞系英文名称aneuploid cell line定 义由非整倍体细胞建立的细胞系,通常为无限增殖的肿瘤细胞系。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
二倍体细胞系的定义
中文名称二倍体细胞系英文名称diploid cell line定 义由一物种正常组织细胞的原始培养物得到的细胞群,至少有75%以上的细胞与该物种的正常细胞(2n)的核型一致。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
单克隆抗体上清制备实验——大量制备杂交瘤或细胞系
实验步骤1. 同备择方案 1 中大规模制备 MAb 上清的步骤 1~4,但等细胞长到合适的密度时就应收获细胞,或者是在细胞生长的平台期收获。2. 将细胞倒入无菌的 250 ml 锥形离心管中,于 4℃ 250 g 离心 15 min, 弃上清,置细胞沉淀于冰上。3. 将 10 瓶细胞沉淀用 4℃ 的
杂交瘤细胞的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死,用75
杂交瘤细胞的筛选
杂交瘤细胞的筛选 在细胞融合后,要从上述五种细胞中筛选出杂交瘤细胞,一般使用HAT培养进行筛选,HAT培养基中含有次黄嘌呤(H)、氨基喋呤(A)和胸腺嘧啶(T)三种成分。细胞的DNA合成有内源性途径(主要途径)和外源性途径(旁路途径)两种方式。内源性途径就是利用谷氨酰胺或单磷酸尿苷酸在二氢叶酸还原
杂交瘤技术原理
单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。 杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在
细胞杂交瘤技术
细胞杂交瘤技术 杂交瘤技术 杂交瘤技术是1975年Kohler和Milstein用于制备单克隆抗体而创建的一项重要技术,被誉为“免疫学上的一次革命”。此技术被广泛用于各种单克隆抗体的制备。抗体是由B淋巴细胞分泌的,一个B淋巴细胞只能分泌一种抗体。把B淋巴细胞和骨髓细胞融合,即可形成在体外长期存活并分
ClonePix结合CloneSelect-Imager技术加强开发病毒特异...(一)
ClonePix结合CloneSelect Imager技术加强开发病毒特异性的杂交瘤细胞ClonePix结合CloneSelect Imager技术加强开发 病毒特异性的杂交瘤细胞 双链DNA病毒引起人类大多数疾病。疱疹病毒和腺病毒家族和乳头瘤病毒在人体中会产生相似的症状。而且,由
杂交瘤细胞的基本介绍
杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是它的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的
杂交瘤细胞(hybridoma)的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备 选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。 2. 脾淋巴细胞的准备 a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。 b、颈脱位将小鼠致死,
杂交瘤细胞(hybridoma)的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞,浑圆透亮,大小均一,边缘清晰,排列整齐,呈半致密分布。弃上清,以不完全培养基洗涤一次后,用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞(SP2/0)轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠,摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死,用75
关于杂交瘤细胞的简介
杂交瘤细胞(hybridoma)是一种在制备单克隆抗体过程中,用骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合而成的细胞。杂交瘤细胞一般通过瘤细胞培养来制备。 杂交瘤技术是指两个或两个以上细胞合并形成一个细胞的现象。他可使两个不同来源的细胞核在同一细胞中表达功能。
杂交瘤细胞的克隆化
融合后的细胞在孔里生长时,一般并不是一个单纯的克隆(一般是两个或者多个克隆,就算肉眼看到的是形成一个完整的克隆,但事实上可能是由两个或者多个原始的杂交瘤形成的),如果直接将其扩大培养将会产生两个问题:一是如果有两个或两个以上的克隆或一个克隆实际上是由两个克隆长在一起形成的,并且都分泌抗体,那么就有可
细胞系的-DNA-STR-谱_细胞系结果分析
实验材料GeneScan®和Genotyper®软件PowerMac计算机实验步骤本节包括 2 个主要领域:分析利用GeneScan®分析软件中 DNA 程序收集软件收集到的原始数据,和利用Genotype®软件为前面用GeneScan®软件分析过的 DNA 谱中的指定等位基因名称。1. 打开凝胶图
细胞系的概念
细胞系(cell line)指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广
细胞系的简介
经过40-50次分裂的渡过第二次死亡危机的细胞,称之为细胞系。如细胞系的生存期有限,则称之为有限细胞系(FiniteCellLine);已获无限繁殖能力的细胞系,称连续或无限细胞系(InfiniteCellLine)。无限细胞系大多已发生异倍化,具异倍体核型,可能成为恶性细胞,因此本质上已是发生
细胞系的简述
细胞系(cell line)指原代细胞培养物经*传代成功后所繁殖的细胞群体。 也指可长期连续传代的培养细胞。(由此便引申出了后来的有限细胞系(FiniteCellLine)、无限细胞系(InfiniteCellLine)),因此,细胞系狭义的是指可连续传代的细胞(特定环境下口语和书面语都使用),广义
杂交瘤细胞是什么
骨髓瘤细胞和成熟B细胞融合。成熟B细胞的基因负责产生抗体,而骨髓瘤细胞则提供不断生长的动力
杂交瘤细胞技术分析
杂交瘤细胞技术分析克隆化的细胞可以在体外进行大量培养,收集上清液而获得大量的单一的克隆化抗体。不过体外培养法得到的单克隆抗体有限,其不能超过特定的细胞浓度,且每天要换培养液。而体内杂交瘤细胞繁殖可以克服这些限制。杂交瘤细胞具有从亲代淋巴细胞得来的肿瘤细胞的遗传特性。如接种到组织相容性的同系小鼠或不能
关于杂交瘤技术的基本介绍
杂交瘤技术(hybridoma technique) 即淋巴细胞杂交瘤技术,又称单克隆抗体技术。它是在体细胞融合技术基础上发展起来的。克勒(Kohler)和米尔斯坦(Milstein)(1975)证明,骨髓瘤细胞与免疫的动物脾细胞融合,形成能分泌针对该抗原的均质的高特异性的抗体——单克隆抗体,
杂交瘤细胞的制作方法
1) 瘤细胞培养(无特殊要求)骨髓瘤细胞呈悬浮或轻微附着形式生长, 如附着性生长的细胞多时, 用吸管轻轻吹打或轻轻 叩击培养容器即可分离下来。 通常要维持细胞于指数生长期 (细胞培养时间为 15~20 小时) , 5 6 每 3~5 天取细胞 0.2~1ml 移入到 10ml 新培养液中, 其最大细
简述杂交瘤技术的产生背景
科勒和米尔斯廷于1975年发明了淋巴细胞杂交瘤技术,终于使制备纯一抗体的难题获得了解决。杂交瘤技术是由细胞融合技术发展而来。抗体是由免疫的B淋巴细胞分泌的球蛋白,各个淋巴细胞分泌的抗体各不相同。因而,要获得一种纯一的抗体只有从一个B淋巴细胞产生的细胞群制取。然而,B淋巴细胞在体外不能长期存活,分
关于杂交瘤技术的应用介绍
单克隆抗体不仅在生物学和免疫学基础研究中具有重要的价值,而且在实践中的应用范围亦极为广泛。在医学中,单克隆抗体已用于疾病的诊断,其优点是诊断准确,无交叉反应。例如,单克隆抗体诊断乙型肝炎及潜伏的乙型肝炎病毒,则很少发生假阴性的漏诊。单克隆抗体还可作为治疗疾病的药物载体。单克隆抗体对靶组织有专一亲
杂交瘤细胞的保存与复苏
(一)保存 当获得产生所需的单克隆抗体的杂交瘤细胞后,必须将一部分杂交瘤细胞保存,否则在连续传代的过程中,可能产生突变或染色体的漂移以至丧失固有特性或丢失产生抗体的特性。另外在长期的培养过程中,难免不发生污染以至于毁灭。所以必须冷藏保存一部分。保存方法如下: 1.材料 (1) 细胞:取对数生长期的细
浆细胞系统
1﹒原始浆细胞(plasmablast)胞体直径为14~18μm,圆形或椭圆形;胞浆量多,呈深蓝色或淡紫色,于近核处有淡染区,偶见空泡,无颗粒;胞核圆形,占细胞的2/3 以上,居中或偏位;核染色质呈粗颗粒网状,染紫红色,核仁2~4 个。在多发性骨髓瘤、浆细胞性白血病骨髓及血液中大量出现。2﹒幼稚浆细
红细胞系统
(一)正常红细胞系统1﹒原始红细胞(nor moblast)胞体直径为12~20μm,圆形或椭圆形,胞浆量少,深蓝色,不透明,有油画蓝感,偶有伪足突起,胞浆边缘着色深蓝,在核周围常形成淡染区;胞核圆形,居中或稍偏于一侧,染色质呈紫红色颗粒状,如串珠样排列,核仁1~2 个,大小不一,染浅蓝色。2﹒早幼