DEAE葡聚糖转染试剂的功能特点
DEAE-葡聚糖是最早应用哺乳动物细胞转染试剂之一,DEAE-葡聚糖是阳离子多聚物,它与带负电的核酸结合后接近细胞膜而被摄取,用DEAE-葡聚糖转染成功地应用于瞬时表达的研究,但用于稳定转染却不是十分可靠。......阅读全文
动物细胞培养及外源基因导入的原理和操作步骤(一)
实验原理细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等;二是可以人为地严格控制研究条件,便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响,有利于单因子分析;三是研究的样本可以达到比较
VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明
一、性能参数产品名称:VigeneFection 简称“VGF” 产品货号: FH880806浓度:1μg/μl 推荐使用浓度:1μg-10μg/ml规格:50μl (赠送) 保存条件:2-8℃ ,切勿放
RNA干扰实验技术
实验概要本文介绍了RNA干扰的原理及基本实验方法,包括了siRNA的设计、siRNA的制备和siRNA的转染等方法,及RNA干扰实验中的注意事项。实验原理近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因
细胞转染原理及常见转染方法的比较(一)
实验原理:转染是将外源性基因导入细胞内的一种专门技术。随着基因与蛋白功能研究的深入,转染目前已成为实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染)。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的
如何优化LipoD293转染试剂?
LipoD293DNA转染试剂是脂质体DNA转运工具的升级版本。我们实验室使用LipoD293DNA转染试剂成功转染了HepG2,LNCaP,CHO及HEK293细胞。接下来,我们乐意就如何提高转染效率,降低毒性等方面的小技巧同大家分享。1、LipoD293/DNA的比率。尽管合适的比率由细胞类型决
高效转染试剂盒操作说明书
Ø 百恩维公司生产研发的高效转染试剂盒(HET)可有效地转染各种哺乳动物细胞,通常 293 细胞转染率很容易达到 40-50%,优化条件后更能高达 90%以上。并且对细胞基本没有毒 性。不仅可以瞬时表达,也可以筛选稳定细胞株。 Ø 质粒 DNA, DNA, siRNA 等均可使用。 Ø 可用
全球首发“基因转染荧光试剂”-瞄准癌细胞
4月18日,“癌症早期诊断与个体化医疗新技术研讨会暨2010纳奥生物产品发布会”在浙江杭州举行,纳奥生物全球首家出产的“基因转染荧光试剂和系列纳米荧光探针产品”正式上市,并现场给多家全国知名医疗机构赠送了试用品。 恶性肿瘤是严重危害人类生命和健康的常见病和多发病,据了解,在35~59岁年龄组中,
内切葡聚糖酶的外切葡聚糖酶
中文名称外切葡聚糖酶英文名称exoglucanase定 义催化葡聚糖中末端糖苷键水解,将单糖分子切下,有一定的底物专一性的酶。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
PPO粗酶液的纯化
实验材料 葡聚糖凝胶SephadexG-200干粉试剂、试剂盒 Tris-HCL缓冲液NaCL聚已二醇DEAE-纤维素DE52仪器、耗材 试管试管架烧杯玻璃搅棒移液管滴管试剂瓶层析柱pH计恒流泵梯度混合仪核酸蛋白监测仪GL-20C高速冷冻离心机DL-7A大容量低速冷冻离心机
siRNA-转染程序
A.siRNA转染的方法 哺乳动物转染的常见方法有:磷酸钙共沉淀、电穿孔法、DEAE-葡聚糖和polybrene、机械法(例如,显微注射和基因枪)、阳离子脂质体试剂,其中阳离子脂质体试剂转染法是目前最常用的转染方法。应用脂质体型转染试剂进行转染需要注重的几个方面:1. 转染试剂的用
细胞转染的途径与方法
细胞转染是指将外源分子如DNA,RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控,突变分析等的常规工具。细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后,存在于游离的载体上,不整合到细胞的染色体上。稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中。细胞转染途径(一) 物理介导:电穿孔法、
常用的细胞转染方法
转染是将外源性基因导入细胞内的一种技术,是实验室工作中经常涉及的基本方法。常规转染技术可分为两大类:瞬时转染和稳定转染(永久转染)。前者外源 DNA /RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析;后者外源DNA
肠炎模式动物造模试剂-硫酸葡聚糖Dextran-Sulfate,Na(DSS)
葡聚糖硫酸钠DSS又称硫酸葡聚糖, 一般用于实验动物模型-诱导结肠炎,硫酸葡糖钠盐(葡聚糖硫酸钠),英文Dextran Sulfate Sodium Salt,缩写DSS,是葡聚糖的聚阴离子衍生物,由葡聚糖和氯huang酸的酯化反应形成。其中含硫量约为17%,相当于葡聚糖分子的每个葡萄糖残糖
物理转染法的主要类型和技术特点
包括:①显微注射②电穿孔③基因枪等,显微注射虽然费力,但是非常有效的将核酸导入细胞或细胞核的方法。这种方法常用来制备转基因动物,但却不适用于需要大量转染细胞的研究。电穿孔法常用来转染如植物原生质体这样的常规方法不容易转染的细胞。电穿孔靠脉冲电流在细胞膜上打孔而将核酸导入细胞内。导入的效率与脉冲的强度
VGF(质粒转染试剂)Fection使用说明书
一、性能参数 产品名称:VigeneFection 简称“VGF” 产品货号: FH880806 浓度:1μg/μl 推荐使用浓度:1μg-10μg/ml 规格:50μl (赠送) 保存条件:2-8℃ ,切勿放-20℃ 有效期至: 18个月 运输条件:常温运输
RNAi实验原理与方法
RNAi实验原理与方法近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(
RNAi的实验原理与方法
近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义RNA组成的双链RNA(dsRNA)导入细胞,可以使mRNA发生特异性的降解,导致其相应的基因沉默。这种转录后基因沉默机制(post-transcriptional gene silencing, PTGS)被称为RNA干扰(RNAi)。一、RNA
格利雅试剂的试剂特点
格利雅试剂一般不单独使用,而是将其溶于有机溶剂中使用。因为 它对空气敏感,处理时,反应器必须用干燥氮气 置换。以RMgX表示,只是一种简单的示意方 法,实际上格利雅试剂是由多种化合物形成的 一种平衡体系。这种平衡称为许克伦平衡:2RMgX⇌R2Mg+MgX2若溶剂的种类、格利雅试剂的浓度等发生变化时
格利雅试剂的试剂特点
格利雅试剂的应用十分广泛,重要的有:①可以和许多含有活泼氢的化合物发生 剧烈反应而生成烃。2RMgX+NH4Cl→ 2RH+Mg(NH2)X+MgXCl酸、醇、酚、肟等均可发生上述反应,而制备烃。②与有机卤代物反应,生成碳原子较的烷烃(增长碳链)、环烷烃或不饱和烃。RMgX+R′X→R—R′+MgX
层析技术(Layeranalise-technique)(2)
离子交换纤维素的优点为:①离子交换纤维素为开放性长链,具有较大的表面积,吸附容量最大;②离子基团少,排列稀疏,与蛋白质结合不太牢固,易于洗脱;③具有良好的稳定性,洗脱剂的选择范围广。 2.离子交换交联葡聚糖 离子交换交联葡聚糖也是广泛使用的离子交换剂,它与离子交换纤维素不同点是载体不同,常用交联葡聚
细胞转染技术原理及应用
常规转染技术可分为两大类,一类是瞬时转染,一类是稳定转染(永久转染).前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其它调控元件的分析.一般来说,超螺旋质粒DNA转染效率较高,在转染后24-72小时内(依赖于各种不同
RNAi的实验原理和操作实用技术
几十年来生物学上最重要的进展,也许是关于RNA分子能调节基因表达的发现。RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。 此后,科学家们明白,RNAi还有其他形式,它既是一种了解基因功能的强大工具,又是很多生
关于细胞转染-你知道多少?
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可分为瞬时转染,稳定转染等瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒 DNA 转染效率较高,在转染
关于细胞转染-你知道多少?
细胞转染是指将外源分子如 DNA RNA 等导入真核细胞的技术。可分为瞬时转染,稳定转染等瞬时转染是指外源 DNA/RNA 不整合到宿主染色体中,因此一个宿主细胞可存在多个拷贝数,产生高水平的表达,但通常只持续几天,多用于启动子和其他调控元件的分析。一般来说,超螺旋质粒 DNA 转染效率
简单说说大学试剂柜的八个功能特点
大学试剂柜是一款以智能硬件为平台的试剂信息化管理系统。柜体集成内循环过滤除味、压缩机直冷控温(非标配)、CCD条码识别和多点触摸操控等功能;可将人员、试剂信息与一维条码绑定录入系统,形成完整的试剂信息数据库;并对数据进行分类统计、筛选,开启了试剂存储、管理的全新模式。 大学试剂柜的功能
动物细胞培养及外源基因导入的原理和方法
细胞培养是现代生物学研究中应用最为广泛的技术之一。它的突出优点,一是研究对象是活的细胞,可长时期地监控、检测甚至定量评估其形态、结构和生命活动等;二是可以人为地严格控制研究条件,便于研究各种物理、化学、生物等外界因素对细胞生长、发育和分化等的影响,有利于单因子分析;三是研究的样本可以达到比较均一性。
磷酸钙共沉淀转染法的技术特点
磷酸钙法是磷酸钙共沉淀转染法,因为试剂易取得,价格便宜而被广泛用于瞬时转染和稳定转染的研究,先将DNA和氯化钙混合,然后加入到PBS中慢慢形成DNA磷酸钙沉淀,最后把含有沉淀的混悬液加到培养的细胞上,通过细胞胞膜的内吞作用摄入DNA。磷酸钙似乎还通过抑制血清中和细胞内的核酸酶活性而保护外源DNA免受
人工脂质体法转染的技术特点和应用
人工脂质体法采用阳离子脂质体,具有较高的转染效率,不但可以转染其他化学方法不易转染的细胞系,而且还能转染从寡核苷酸到人工酵母染色体不同长度的DNA,以及RNA,和蛋白质。此外,脂质体体外转染同时适用于瞬时表达和稳定表达,与以往不同的是脂质体还可以介导DNA和RNA转入动物和人的体内用于基因治疗。Li
基因转染技术的转染方法介绍
1、转染 转染指通过生化或者物理方法将目的基因导入真核细胞中 。 2、感染 感染指通过病毒介导,用基因组中携带有克隆目的片断的病毒来感染靶细胞。
基本方案6-对人类支气管移植物的转基因
实验材料原初增生人类支气管细胞试剂、试剂盒反转录病毒上清液HamF-12 培养基实验步骤用反转录病毒体外转导1a.用重组反转录病毒转导原初增生人类支气管细胞(基本方案 2)。转染细胞三次为最好的转导。2a.胰蛋白酶处理原初支气管上皮细胞(一般接种后 5 山基本方案 1,第 12 步)并接种到异种移植