疏水作用层析与反向液相色谱分离疏水性蛋白质的比较
疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团，我们把这些疏水性基团称为疏水补丁，疏水补丁可以与疏水性层析介质发生疏水性相互作用而结合。不同的分子由于疏水性不同，它们与疏水性层析介质之间的疏水性作用力强弱不同，疏水作用层析就是依据这一原理分离纯化蛋白质和多肽等生物大分子的。反向液相色谱RPC一般用非极性固定相（如C18、C8）；流动相为水或缓冲液，常加入甲醇、乙腈、异丙醇、丙酮、四氢呋喃等与水互溶的有机溶剂以调节保留时间。它是根据被测组分离子与离子对试剂离子形成中性的离子对化合物后，在非极性固定相中溶解度增大，从而使其分离效果改善。疏水作用层析：溶液配置简单，性状温和，能保持蛋白活性，但操作复杂，分离效率低反向液相色谱：洗脱液要求高，蛋白变性，操作......阅读全文
比较疏水作用层析与反向液相色谱分离疏水性蛋白质
疏水作用色谱是根据分子表面疏水性的差异，分离蛋白质、多肽等生物大分子的常用方法。疏水基团经常暴露在蛋白质、多肽等生物大分子的表面。我们称这些疏水基团为疏水斑块。疏水性斑块可以与疏水性色谱介质发生疏水性相互作用由于不同分子的疏水性不同它们与疏水色谱介质之间的疏水力是不同的疏水作用色谱是基于这一原理分离
疏水作用层析与反向液相色谱分离疏水性蛋白质的比较
疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团，我们把这些疏水性基团称为疏水补丁，疏水补丁可以与疏水性层析介质发生疏
液相色谱与气相色谱的比较
液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气
柱层析原理及影响因素
免疫亲和层析 原理：亲和色谱分离蛋白以一个蛋白与特异性配基配对到色谱基质上，且蛋白质与配基间具有可逆的相互作用作为基础。目标蛋白与配基之间的生物学相互作用，可以是由于静电学的相互作用或是分子间疏水的相互作用，也可以是范德华力或氢键结合力产生的。 影响因素：主要是亲和标签的完整程度，缓冲液的组
关于αs2酪蛋白的疏水层析法分离介绍
疏水层析也称疏水作用下层析，疏水层析和反向色谱的分离原理类似，其原理是基于在固定相中偶联载体的疏水性配基和在流动相中的某些疏水分子可以发生可逆性结合从而达到分离的效果。这种方法利用的是蛋白质的疏水差异，在高浓度盐溶液的条件下，蛋白质会结合固定相中的疏水配基，而其他的杂蛋白则没有此种性质，利用此种
疏水作用层析
实验概要通过实验了解疏水作用层析的原理与方法。实验原理疏水作用层析（Hydrophobic Interaction Chromatography，HIC）是根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团，我们把这些
疏水色谱的原理和应用
疏水色谱是利用样品分子与固定相的疏水力作用的不同，用流动相洗脱时，各组分迁移速度不同而达到分离的目的。流动相一般为pH 6-8的盐水溶液，具有对蛋白质的回收率高，蛋白质变性可能性小等优势。由于流动相中不使用有机溶剂，也有利于蛋白质保持固有的活性。 疏水作用色谱是在高离子强度的条件下，蛋白质
蛋白质的亲疏水性
可以从氨基酸组成上分析，比如用软件分析有多少个氨基酸组成，其中疏水性氨基酸有多少，亲水性氨基酸有多少，然后软件会综合分析出整个序列的亲疏水性。不过这个方法只是预测，未必准确。然后就是通过盐析实验来分析，具体就是通过加入不同浓度的中性盐比如硫酸铵，分级沉淀蛋白质，根据蛋白质沉淀时的盐浓度来判断亲疏水性
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更疏水时，疏水强的少量蛋白质被吸附。这时疏水相互作用太强，需用极端方法洗脱，可能会导致蛋白质变性。苯基琼脂糖比辛基琼脂糖疏水性低，是疏水纯化中效果不错的常用介质
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
疏水相互作用层析是以介质疏水基团和蛋白质疏水区域间的亲和作用为基础的。疏水力是浸在一种极性液体（如水）中的非极性物质的排斥力。胞膜蛋白都具有一个明显的疏水区域以锚定在膜上。可溶性蛋白质在外表面上可能存在疏水小区，它促进蛋白复合物的形成，也可能是疏水配基结合部位或活性部位。这些暴露的疏水区对疏水层析纯
疏水作用层析法纯化蛋白质实验
疏水作用层析法 实验方法原理 在疏水层析的主要支持介质上含有大小不等的疏水侧链，烷基或芳香基，可是绝大多数情况起作用的是苯基或辛基。当碳氢链长度增加，即变得更
液相色谱分离层析仪的原理
液相分离层析仪，一般由恒流泵、层析柱、检测器、数据记录及收集器等组成，其中层析柱、检测器是关键部位。那么这些装置在使用过程中是如何配合完成工作的呢？液相色谱分离层析仪的工作原理： 液相色谱仪的系统由恒流泵、层析柱、检测器、记录仪和收集器等几部分组成。储液器中的流动相被恒流泵打入层析柱，样品溶液经层
液相色谱与气相色谱的比较及差异
液相色谱中使用的基本概念：保留值、塔数、塔高、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱中使用的基本理论：板理论和速率方程也与气相色谱基本相同，但因为液体是在液相色谱中使用，而不是在气相色谱中作为流动相的气体，液体和气体的性质是不一样的。此外液相色谱法使用的设备和操作条件也与气相色谱法不同因此液相色谱
液相色谱柱的正反向
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本
液相色谱柱的正反向
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚
液相色谱柱的正反向
液相色谱的柱子通常分为正相柱和反相柱。正相柱大多以硅胶为柱，或是在硅胶表面键合-CN,-NH3等官能团的键合相硅胶柱;反相柱填料主要以硅胶为基质，在其表面键合非极性的十八烷基官能团（ODS）称为C18柱，其它常用的反相柱还有C8,C4,C2和苯基柱等。另外还有离子交换柱，GPC柱，聚合物填料柱等。本
亲水性色谱柱具有适度的疏水性和亲水性
亲水性色谱柱是硅胶基质的体积排阻色谱柱，也称为“球状蛋白亲水改性硅胶柱”，是中国药典中检测头孢类抗生素中β内酯类聚合物的指定色谱柱。其色谱填料为高纯度、具有良好稳定性的硅胶微球表面键合亲水性聚合物。本公司采用特殊的表面修饰技术，确保了该填料具有良好的稳定性和批与批之间的重现性。 亲水性色谱柱具有适
反相高效液相层析实验_多肽和蛋白质的分离
实验材料蛋白质试剂、试剂盒TFA乙腈盐酸胍仪器、耗材层析柱HPLC进样器实验步骤1. 用经脱气的HPLC级水洗去反相柱的有机溶剂，梯度从100%有机溶剂到100%水，流速1 ml/min，持续15 min 以上。 2. 以100%的TFA/乙腈缓冲液平衡柱子至柱压和光吸收值达到恒定。用10~15
蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法
由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低，并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构，和不影响其生理功能的情况下，把蛋白质分离、纯化出来，需要使用一些技术，如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋白分离纯化的一种
蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法
由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低，并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构，和不影响其生理功能的情况下，把蛋白质分离、纯化出来，需要使用一些技术，如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋
蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法
由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低，并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构，和不影响其生理功能的情况下，把蛋白质分离、纯化出来，需要使用一些技术，如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋白分离纯化的一种
疏水相互作用层析的原理
疏水层析根据蛋白表面疏水性的不同，利用蛋白质与疏水层析介质疏表面可逆的相互作用来分离蛋白。纯水状态下，任何疏水作用都太弱而不能导致配基与蛋白之间的相互作用。某些盐却可以增强疏水相互作用。高浓度的盐会增强相互作用，而低浓度的盐会降低相互作用。但是目前尚无被广泛接受的关于疏水相互作用层析机制的理论。
自动低压液相色谱分离层析仪简介
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液湘色谱仪中的一种紫外检测装置，该仪器配有层析柱、恒流泵、部分收集器等，即组成一套完整的液色湘色谱分离分析系统。它可应用于现代生物学研究，药物测定、农业科研、化工、食品及医疗单位对具有紫外吸收的样品作定量分析。本仪器主要元器件均采用进口，仪器全部采用LED数字显示，使
纳米氧化硅与疏水性气相白炭黑的区别
疏水性气相白炭黑是通过亲水性气相白炭黑与活性硅烷（例如氯硅烷或六甲基二硅胺烷）发生化学反应而制得。它具有疏水性（憎水性），而且不能在水中分散。为了解决工业中一些特殊的技术问题，各种型号的疏水性气相白炭黑被研发出来。如通过用硅烷或硅氧烷处理改性亲水级别的气相法白炭黑生产疏水性的气相白炭黑，在最终的
自动低压液相色谱分离层析仪的特征
1. 该仪器除配有输出10mV记录仪信号外，还配有输出适合计算机积分仪的输口，这样很方便构成色谱工作站系统。（可同时进行计算机和记录仪信号输出，亦可省去记录仪） 2. 该仪器的数字显示设计为固定光吸收，A显示计算机用和可变量程光吸收A显示记录仪用两种可选模式，这样可方便于规范化读数，同时亦可根
自动低压液相色谱分离层析仪的简介
核酸蛋白检测仪、紫外检测仪是液湘色谱仪中的一种紫外检测装置，该仪器配有层析柱、恒流泵、部分收集器等，即组成一套完整的液色湘色谱分离分析系统。它可应用于现代生物学研究，药物测定、农业科研、化工、食品及医疗单位对具有紫外吸收的样品作定量分析。本仪器主要元器件均采用进口，仪器全部采用LED数字显示，使
简述蛋白质分离纯化与鉴定的主要方法有哪些
①浊点萃取法(CPE)： 浊点萃取法(cloud point extraction，CPE)是近年来出现的一种新兴的液—液萃取技术，它不使用挥发性有机溶剂，不影响环境。它以中性表面活性剂胶束水溶液的溶解性和浊点现象为基础，改变实验参数引发相分离，将疏水性物质与亲水性物质分离。目前该法已成功地应用于金
怎样利用高效液相色谱分离蛋白质
高效液相色谱纯化蛋白质一般是反相色谱和正相色谱两种柱子 反相色谱类似于疏水相互作用色谱，正相色谱类似于分子排阻色谱，都是针对纯化蛋白质的柱子。
与经典液相（柱）色谱法比较
经典液相（柱）色谱法使用粗粒多孔固定相，装填在大口径、长玻璃柱管内，流动相仅靠重力流经色谱柱，溶质在固定相的传质、扩散速度缓慢，柱入口压力低，仅有低柱效，分析时间冗长。 高效液相色谱法使用了全多孔微粒固定相，装填在小口径、短不锈钢柱内，流动相通过高压输液泵进入高柱压的色谱柱，溶质在固定相的传质
疏水性的特点
疏水性分子偏向于非极性，并因此较会溶解在中性和非极性溶液（如有机溶剂）。疏水性分子在水里通常会聚成一团，而水在疏水性溶液的表面时则会形成一个很大的接触角而成水滴状。